一种采用毛细管电泳-质谱联用分析鉴定落叶松中二氢槲皮素的方法

    公开(公告)号:CN108802160B

    公开(公告)日:2019-03-12

    申请号:CN201810694533.2

    申请日:2018-06-29

    Abstract: 本发明提供了一种使用毛细管电泳‑质谱联用(CE‑MS)法检测落叶松中二氢槲皮素的方法。所述方法包括步骤为:(1)制备纯品二氢槲皮素的标准溶液,在毛细管电泳仪中进样,在质谱仪中分析,获得质谱图;(2)绘制标准曲线和计算最低检测限;(3)采用步骤(1)的方法获得样品的质谱图,计算样品加样回收率;(4)根据样品色谱峰与特征子离子信息,对落叶松中二氢槲皮素进行鉴定;(5)根据标准曲线对落叶松中二氢槲皮素进行定量分析。本发明具有操作简单、节约时间、检测高效、重复性好等特点,所需样品用量少,检测结果准确可靠,是一种对落叶松中二氢槲皮素进行定性、定量分析的优良方法。

    一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统

    公开(公告)号:CN104450696A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410721269.9

    申请日:2015-01-05

    Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统,由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p-FRT、p-loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体,本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体,可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p-FRT、克隆载体p-loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下,可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换,达到将目的基因转移至植物表达载体的目的,过程中只需要重组酶介导,不需其它操作,简便易行。

    一种落叶松体细胞胚再生的方法

    公开(公告)号:CN111280065A

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN202010265138.X

    申请日:2020-04-07

    Abstract: 本发明提供了一种落叶松体细胞胚再生方法,所述方法的步骤包括:采集落叶松未成熟种子合子胚为外植体,诱导出落叶松胚性愈伤组织;在新继代培养基上培养7~10天,选择生长良好的胚性愈伤组织,接于锥形瓶中液体培养基中,于摇床50~125rpm,20~25℃,悬浮条件下暗培养4~7天;然后将培养物转入半固体培养基,于摇床50~125rpm,20~25℃,悬浮条件下暗培养4~7天;最后将培养物接于固体培养基表面,20~25℃,暗培养23~30天,形成后期子叶胚。所述方法能大量诱导产生优质体细胞胚,减少畸形胚,诱导体胚形成时间短,且能达到更好的同步化效果并且具有高诱导效率。

    一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法

    公开(公告)号:CN109115903A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201810817102.0

    申请日:2018-07-24

    Abstract: 本发明提供一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法,所述方法为将独脚金内酯类似物溶液在毛细管电泳-质谱联用仪中上样检测,其特征为:(1)采用5-15kV的电压在毛细管电泳-质谱联用仪中电泳,选用75μm内径的色谱柱,采用乙酸铵溶液作为缓冲液,添加乙酸铵的50%甲醇作为鞘流液;(2)使用Chemstation对色谱图进行分析,得到色谱峰;(3)使用Data Analysis对质谱图进行分析,得到质谱图,通过该图分析子离子信息。所述方法可以高效的检测独脚金内酯类似物,且色谱峰型良好,出峰速度快,所述方法具有样品用量小、操作便捷、检测时间短、价格低廉、样品无需衍生化等优点。

    一种采用毛细管电泳-质谱联用分析鉴定落叶松中二氢槲皮素的方法

    公开(公告)号:CN108802160A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810694533.2

    申请日:2018-06-29

    Abstract: 本发明提供了一种使用毛细管电泳‑质谱联用(CE‑MS)法检测落叶松中二氢槲皮素的方法。所述方法包括步骤为:(1)制备纯品二氢槲皮素的标准溶液,在毛细管电泳仪中进样,在质谱仪中分析,获得质谱图;(2)绘制标准曲线和计算最低检测限;(3)采用步骤(1)的方法获得样品的质谱图,计算样品加样回收率;(4)根据样品色谱峰与特征子离子信息,对落叶松中二氢槲皮素进行鉴定;(5)根据标准曲线对落叶松中二氢槲皮素进行定量分析。本发明具有操作简单、节约时间、检测高效、重复性好等特点,所需样品用量少,检测结果准确可靠,是一种对落叶松中二氢槲皮素进行定性、定量分析的优良方法。

    一种利用多菌株固定化细胞组合物连续生产4-羟基肉桂醇的方法

    公开(公告)号:CN105925625A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610413615.6

    申请日:2016-06-14

    CPC classification number: C12P7/22 C12N11/10 G01N30/02 G01N2030/027

    Abstract: 本发明涉及多菌株固定化细胞组合物连续生产4‑羟基肉桂醇的方法。该方法所用A菌株为重组菌株E.coli M15‑4Cl‑CCR,B菌株为重组菌株E.coli M15‑CAD;具体操作步骤如下:1、菌株培养;2、菌株的固定化,分别制得A菌株固定化细胞颗粒和B菌株固定化细胞颗粒;3、固定化细胞连续生产4‑羟基肉桂醇。本发明采用现代生物工程技术进行4‑羟基肉桂醇的生产,将多菌株固定化细胞组合物连续生产的方法运用于植物然代谢物的合成,具有重要的实践意义。同时建立了4‑羟基肉桂醇的高效液相色谱串联质谱检测方法,为这类芳香族聚合物提供更有效的分析手段。

    双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体

    公开(公告)号:CN101544976B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910083479.9

    申请日:2009-05-06

    Abstract: 本发明公开了双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体。双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体是在出发载体的多克隆位点插入如下DNA分子的重组表达载体:自5’末端依次含有EcoRI酶识别序列、NoS终止子、SacI酶识别序列、kpnI酶识别序列、红色荧光蛋白基因、SmalI酶识别序列、BamHI酶识别序列、XbalI酶识别序列、双向启动子、XholI酶识别序列、SpeI酶识别序列、绿色荧光蛋白、HindIII酶识别序列、HpaI酶识别序列、SalI酶识别序列、NoS终止子和Clal酶识别序列;所述双向启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第5917-6834位。本发明的双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体具备通过直接酶切连接简单操作就可以用于融合功能基因的目的。

    一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法

    公开(公告)号:CN109115903B

    公开(公告)日:2019-05-10

    申请号:CN201810817102.0

    申请日:2018-07-24

    Abstract: 本发明提供一种使用毛细管电泳‑质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法,所述方法为将独脚金内酯类似物溶液在毛细管电泳‑质谱联用仪中上样检测,其特征为:(1)采用5‑15kV的电压在毛细管电泳‑质谱联用仪中电泳,选用75μm内径的色谱柱,采用乙酸铵溶液作为缓冲液,添加乙酸铵的50%甲醇作为鞘流液;(2)使用Chemstation对色谱图进行分析,得到色谱峰;(3)使用Data Analysis对质谱图进行分析,得到质谱图,通过该图分析子离子信息。所述方法可以高效的检测独脚金内酯类似物,且色谱峰型良好,出峰速度快,所述方法具有样品用量小、操作便捷、检测时间短、价格低廉、样品无需衍生化等优点。

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