中药材乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN115109854A

    公开(公告)日:2022-09-27

    申请号:CN202110291503.9

    申请日:2021-03-18

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及中药分子鉴定领域,是一种乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括:乳鹿基因组DNA的提取、设计乳鹿mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、核酸试纸条鉴定乳鹿真伪图谱和结果判定。试剂盒包括:乳鹿基因组DNA提取试剂、乳鹿PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及核酸试纸条。本发明利用乳鹿独一无二的mtDNA Cytb基因序列,设计的特异性引物,利用PCR技术的特异性、灵敏性特点,利用核酸试纸条技术的简便、快速、低成本优势,所建立的鉴定方法能够特异、准确、快速地鉴定乳鹿与其易混品种;所研制的试剂盒能够使鉴定方法更标准化、更规范化。

    茯苓荧光定量PCR检测试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN114182040A

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN202111568493.5

    申请日:2021-12-21

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域,是一种茯苓荧光定量PCR检测试剂盒,其特征是由鉴定反应、阳性对照反应和阴性对照反应三部分体系组成。本发明方法包括使用特异性引物及SYBR Green染料法对茯苓的分子特征进行鉴定,荧光定量PCR鉴定方法所用上游引物序列为5′‑GCACCGTCTACAGCCATCTTCC‑3′,下游引物序列为5′‑CCTCCCCACGCCCCAATAAATG‑3′,该方法特征是,总体系为20μL,其中2×RealStar Green Power Mixture 10μL,上下游引物0.2μL,待检样本DNA 0.2μL,余为双蒸馏水。一种茯苓荧光定量PCR鉴定方法是设计合成一对茯苓特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准:茯苓正品出现特异性“S型”扩增曲线且Ct值小于31。茯苓荧光定量PCR检测试剂盒及鉴定方法能够准确区别茯苓及其伪品。

    一种袋鼠、豚鼠与褐家鼠多重PCR检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN111118176A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN202010074289.7

    申请日:2020-01-22

    Applicant: 北华大学

    Inventor: 李明成 段思琪

    Abstract: 本发明涉及食品检测技术领域,是一种袋鼠肉、豚鼠肉与褐家鼠肉多重PCR检测试剂盒,其特点是,它包含:动物组织线粒体DNA提取体系和鉴定反应体系(同阳性对照反应体系、阴性对照液反应体系)。鉴定反应总体系为50μL,其中含有反应缓冲液5μL,dNTP 2-5μL,MgCl23μL,Taq DNA聚合酶1-5μL,袋鼠引物2.25μL、豚鼠引物3μL和褐家鼠引物2μL,待检样本DNA 2-6μL,余为双蒸馏水;袋鼠肉、豚鼠肉与褐家鼠肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤,能够同时区别三种鼠肉的特异性;具有快速、检测结果可靠等优点。

    鼠肉与山羊肉、绵羊肉多重PCR检测试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN109988849A

    公开(公告)日:2019-07-09

    申请号:CN201910320851.7

    申请日:2019-04-21

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及食品检测技术领域,是一种鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR检测试剂盒,其特点是,它包含:动物组织线粒体DNA提取体系和三种多重PCR反应体系(阳性对照反应体系、阴性对照反应体系和鉴定反应体系)。PCR反应总体系为50μL,其中含有反应缓冲液5μL,dNTP 2‑5μL,MgCl23μL,Taq DNA聚合酶1‑5μL,每种引物0.5‑2μL,待检样本DNA 1‑3μL,余为双蒸馏水。鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤,能够同时区别鼠肉、山羊肉及绵羊肉的特异性;具有简便、快速、检测结果可靠等优点。

    柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱及鉴定方法

    公开(公告)号:CN103122381A

    公开(公告)日:2013-05-29

    申请号:CN201210593407.0

    申请日:2012-12-22

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及中药鉴定技术领域,具体为一种柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱及鉴定方法。柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱包括DNA的提取、PCR扩增、扩增产物的分析、柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱的建立。柴胡DNA指纹鉴定方法包括柴胡DNA标准指纹图谱的建立、样品DNA指纹图谱的建立、利用相似度软件进行结果鉴定。该指纹图谱及鉴定方法可用于柴胡样品的鉴定。本发明能从遗传本质上对柴胡进行真伪鉴定,方法快速、准确、客观,可用于柴胡样品的鉴定。

    貂心DNA检测试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN101434990B

    公开(公告)日:2011-03-23

    申请号:CN200810051643.3

    申请日:2008-12-15

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域,是一种貂心DNA检测试剂盒,它包含:含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1或引物2的一种,Taq DNA聚合酶,待检样本DNA,双蒸馏水的鉴定反应体系;含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一种,Taq DNA聚合酶,貂心DNA,双蒸馏水的阳性对照反应体系;含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一种,Taq DNA聚合酶,鸡心、鸭心、鹅心和兔心DNA按1∶1混合,双蒸馏水的阴性对照反应体系。貂心DNA鉴定方法是设计貂心线粒体DNA二对特异寡核苷酸引物、人工合成貂心线粒体DNA二对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤,能够准确同时区别与貂心易混的多种动物心脏的特异性;鉴定方法具有简便、快速、检测结果可靠等优点。

    西洋参DNA检测试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN105039584A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510593457.2

    申请日:2015-09-18

    Applicant: 北华大学

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q2521/301 C12Q2535/138

    Abstract: 本发明涉及中药鉴定技术领域,具体为一种西洋参DNA检测试剂盒及鉴定方法。一种西洋参DNA检测试剂盒包括样本前处理液,基因组DNA提取体系,PCR反应体系,限制性核酸内切酶反应体系,结果观察体系五部分组成。一种西洋参DNA鉴定方法,包括检测样本前处理,基因组DNA提取,PCR引物设计与合成,建立PCR反应,限制性核酸内切酶反应,结果判定六步。判断标准为同时出现100bp和50bp条带为正品西洋参,只出现一条或不出现均为伪品西洋参。本发明建立的PCR-AFLP鉴定方法具有简便、快速、检测结果可靠等优点,能够准确同时鉴别西洋参和伪品的特异性。

    野山参与栽培参多重PCR检测试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN102191308A

    公开(公告)日:2011-09-21

    申请号:CN201010118823.6

    申请日:2010-03-01

    Applicant: 北华大学

    Abstract: 一种中药检测领域的野山参与栽培参多重PCR检测试剂盒,其特点是,含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一种,Taq DNA聚合酶,待检样本DNA,双蒸馏水的鉴定反应体系;含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一种,Taq DNA聚合酶,野山参与栽培参DNA 1∶1混合物,双蒸馏水的阳性对照反应体系;含有缓冲液,12.5mM dNTP,0.1mM引物1和引物2的一种,Taq DNA聚合酶,五加科同属DNA 1∶1混合物,双蒸馏水的阴性对照反应体系;其检测鉴定方法是设计野山参与栽培参线粒体DNA二对特异寡核苷酸引物、人工合成野山参与栽培参线粒体DNA对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。能够准确同时区别野山参与栽培参的特异性,检测结果可靠。

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