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公开(公告)号：CN107815424B
公开(公告)日：2021-03-05
申请号：CN201610817882.X
申请日：2016-09-12
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种产柠檬烯的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。该基因工程菌是将含有优化的基因LS和基因NDPS1的重组载体转化尿嘧啶和亮氨酸营养缺陷型解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)构建而成，所述优化的基因LS和NDPS1的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID No.1～2所示。在此基础上同时过表达基因HMG1和基因ERG12，能使柠檬烯达到0.67mg/g DCW的极高产量。此外，通过对该基因工程菌两相发酵时添加的丙酮酸和十二烷的浓度进行选择，进一步提高柠檬烯的产量。该基因工程菌能用于大规模商业化生产，前景良好。
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公开(公告)号：CN111979135A
公开(公告)日：2020-11-24
申请号：CN202010909142.5
申请日：2020-09-02
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一种产蜡酯的解脂耶氏酵母基因工程菌，其是在能够生产超长链脂肪酸的解脂耶氏酵母工程菌的基础上通过过表达蜡酯合成酶和脂肪酰辅酶A还原酶基因后得到。所述的生产超长链脂肪酸的解脂耶氏酵母基因工程菌是将AtKCS基因、CraKCS基因和MaELO3基因敲入敲除了PEX10基因的解脂耶氏酵母的染色体中构建而成。最终构建了四个产蜡酯的解脂耶氏酵母工程菌WE01、WE02、WE03、WE04。其中WE01工程菌通过连续补料发酵，蜡酯的产量可以达到2g/L。本发明构建的解脂耶氏酵母基因工程菌，其操作简便，性能定可靠，能够应用于大规模的商业化生产。
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公开(公告)号：CN115369048B
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202110534354.4
申请日：2021-05-17
Applicant: 华东理工大学 , 浙江赫凯生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种产玉米黄质的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法，其是将2个拷贝的优化的crtZ基因依次导入解脂耶氏酵母基因工程菌XK17中，获得解脂耶氏酵母基因工程菌MY1；再将HMG基因导入工程菌MY1，得到解脂耶氏酵母基因工程菌MY3；接着，将优化的HMG基因和优化的AtoB基因，整合到解脂耶氏酵母基因工程菌MY3中，得到解脂耶氏酵母基因工程菌HA，所述优化的crtZ基因、优化的HMG基因和优化的AtoB基因的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。采用该方法构建获得的解脂耶氏酵母基因工程菌HA可以提高玉米黄质的产量具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN111321087A
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN202010107322.1
申请日：2020-02-21
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一种产β-胡萝卜素的解脂耶氏酵母基因工程菌，所述的产β-胡萝卜素的解脂耶氏酵母基因工程菌是将carRP基因和carB基因敲入尿嘧啶和亮氨酸营养缺陷型解脂耶氏酵母的染色体中，再敲入GGS1基因、HMG基因、两个拷贝的carRP基因和1个拷贝的carB基因、ERG13基因，最后将尿嘧啶和亮氨酸两个营养缺陷型筛选标记回补构建而成，最后通过连续补料发酵，β-胡萝卜素的产量可以达到4.5g/L。本发明构建的解脂耶氏酵母基因工程菌，其操作简便，性能稳定可靠，能够应用于大规模的商业化生产，所得的β-胡萝卜素能够被安全的利用，前景良好。
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公开(公告)号：CN107815424A
公开(公告)日：2018-03-20
申请号：CN201610817882.X
申请日：2016-09-12
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种产柠檬烯的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。该基因工程菌是将含有优化的基因LS和基因NDPS1的重组载体转化尿嘧啶和亮氨酸营养缺陷型解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)构建而成，所述优化的基因LS和NDPS1的核苷酸序列分别如序列表SEQ ID No.1～2所示。在此基础上同时过表达基因HMG1和基因ERG12，能使柠檬烯达到0.67mg/g DCW的极高产量。此外，通过对该基因工程菌两相发酵时添加的丙酮酸和十二烷的浓度进行选择，进一步提高柠檬烯的产量。该基因工程菌能用于大规模商业化生产，前景良好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112300952A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011361363.X
申请日：2020-11-27
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了一种产α‑蒎烯的解脂耶氏酵母基因工程菌，其利用CRISPR/Cas9系统，将基因HMG1、基因NDPS1和基因PTEF‑tPS依次导入尿嘧啶和亮氨酸营养缺陷型解脂耶氏酵母的染色体中构建获得可以生产α‑蒎烯的基因工程菌YT‑14；再利用质粒pUC19‑rDNA‑HisG，构建含有基因PTEF‑tPS和基因ERG8的重组载体，并转化基因工程菌YT‑14，得到基因工程菌YT‑29；再利用质粒pINA1269，构建含有基因HMG1和带有MBP标签的基因ERG12，并转化解脂耶氏酵母基因工程菌YT‑29。本发明获得的解脂耶氏酵母基因工程菌YT‑30可以产α‑蒎烯。
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公开(公告)号：CN110527701A
公开(公告)日：2019-12-03
申请号：CN201810509755.2
申请日：2018-05-24
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种解脂耶氏酵母生产脂肪酸乙酯的方法及其发酵培养基。该发酵培养基中，所述解脂耶氏酵母为重组解脂耶氏酵母菌株GQY001、GQY004和GQY007中的一种或多种；所述发酵培养基包括碳源和氮源，所述碳源为油酸和/或葵花籽油。利用本发明的发酵培养基生产脂肪酸乙酯可大幅提高脂肪酸乙酯的产量，有利于生物柴油的产业化应用，节能环保，有非常好的应用前景。
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公开(公告)号：CN108998383A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201710419622.1
申请日：2017-06-06
Applicant: 华东理工大学
CPC classification number: C12N9/88 , C12N1/16 , C12N15/81 , C12P7/04 , C12Y402/03
Abstract: 本发明公开了一种产芳樟醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其应用。该基因工程菌是将来自猕猴桃(Actinidia arguta)的芳樟醇合成酶基因LIS经优化后，转化解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Po1f；在此基础上同时过表达内源HMG1、IDI1或ERG中的一种或多种基因。此外，通过对该基因工程菌发酵时添加的碳源如葡萄糖、甘油、果糖、柠檬酸以及丙酮酸及其浓度进行选择，进一步提高芳樟醇的产量。芳樟醇的产量最高能达到6.96mg/L，以及单位胞内芳樟醇含量939.04μg/g细胞干重(DCW)的极高产量。该基因工程菌能用于大规模商业化生产，前景良好。
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公开(公告)号：CN102505023A
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN201110368962.9
申请日：2011-11-18
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种由珍贵橙色束丝放线菌(Actinosynenma pretiosun)aroF基因编码的DAHP合酶的异源可溶性表达方法及所用的重组载体和基因表达工程菌。该方法通过将aroF基因连接到表达载体上形成重组表达载体，并将之转化到已含有编码分子伴侣蛋白GroEL/GroES的质粒pGro7的大肠杆菌中，诱导表达后可得到可溶性的具有酶活性的DAHP合酶，之后进行分离纯化和酶活检测。本发明首次实现了珍贵橙色束丝放线菌DAHP合酶的异源可溶性表达并得到纯化的DAHP合酶；分离纯化和酶活检测的方法较之前有了较大改进。本发明对于研究珍贵橙色束丝放线菌(A.pretiosum)的莽草酸合成途径和氨基莽草酸途径有着重要意义。
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公开(公告)号：CN102146415A
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN201010228337.X
申请日：2010-07-16
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)的基因敲除菌及其制备方法和用途以及所用的基因敲除载体。该制备方法包括：1)用基因敲除重组载体转化大肠杆菌，得到转化子，该基因敲除重组载体依次含有氧化葡萄糖酸杆菌mgdh基因同源重组前臂、标记基因和mgdh基因同源重组后臂；2)用转化子和氧化葡萄糖酸杆菌进行两亲本接合，所述的重组载体进入氧化葡萄糖酸杆菌中和其染色体上的mgdh基因发生同源双交换，获得的接合子即为mgdh基因敲除菌。本发明的膜结合葡萄糖脱氢酶基因(mgdh)敲除菌利用葡萄糖为唯一碳源生长良好，克服了原氧化葡萄糖酸杆菌只能利用价格高昂的山梨醇作为有效碳源的不足，大大节约生产成本，在生物合成及手性合成领域具有重要意义。
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