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公开(公告)号：CN116410914A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202310583434.8
申请日：2023-05-18
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/75 , C12N15/55 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12P17/18 , C12N15/60 , A23L11/50 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种发酵脱臭解淀粉芽胞杆菌工程菌及其在血红素合成中的应用，该工程菌以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌株，在出发菌株中通过CRISPR/Cas9n基因敲除技术叠加敲除基因gudB、ptb、speA、ureC得到发酵脱臭的解淀粉芽胞杆菌HZC9n△GPSU，该菌株在豆粕固体发酵中异味物质（氨气、腐胺、短链脂肪酸）生成量显著降低。在发酵脱臭的解淀粉芽胞杆菌中异源表达血红素关键合成基因dhemA，构建了高产血红素的发酵脱臭解淀粉芽胞杆菌HZC9n△GPSU/pHY‑dhemA，该菌株的血红素产量高达51.29 mg/L，比未脱臭宿主菌HZC9n/pHY‑dhemA提高了1.42倍。
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公开(公告)号：CN114934005A
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN202210567786.X
申请日：2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽胞杆菌表达宿主，以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌，敲除基因epr、nprE、aprE、aprX、mpr、pbpF、vpr、ykct1、htrB、hag，获得突变株BAX‑10，在野生菌HZ‑12和突变株BAX‑10异源表达碱性蛋白酶基因aprE，BAX‑10分泌表达的碱性蛋白酶AprE的酶活力相对于野生菌HZ‑12提高了57%，BAX‑10具有更高效地表达异源蛋白酶的能力。
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公开(公告)号：CN111961634B
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202010446029.8
申请日：2020-05-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一株高效抑制金黄色葡萄球菌的解淀粉芽胞杆菌工程菌，通过基因工程的方法敲除了解淀粉芽胞杆菌HZ‑12的基因组内表面活性素Surfactin合成相关基因srfAC基因，成功得到了缺失srfAC基因的解淀粉芽胞杆菌HZΔsrfAC，显著提高了解淀粉芽胞杆菌对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。相对于解淀粉芽胞杆菌HZ‑12来说，本发明所构得的工程菌株对金黄色葡萄球菌的抑制效果提高了64%。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114606172B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202210336379.8
申请日：2022-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高血红素产量的解淀粉芽胞杆菌工程菌及其构建方法，该工程菌以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌株，在出发菌株强化表达了解淀粉芽胞杆菌自身的关键基因hemZ，通过上述基因操作得到血红素产量显著提高的解淀粉芽胞杆菌工程菌HPHZ，该菌株在液态发酵培养中血红素的产量达到0.55 mg/L，比野生型菌株HZ‑12提高了18倍。
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公开(公告)号：CN111961634A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010446029.8
申请日：2020-05-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一株高效抑制金黄色葡萄球菌的解淀粉芽胞杆菌工程菌，通过基因工程的方法敲除了解淀粉芽胞杆菌HZ-12的基因组内表面活性素Surfactin合成相关基因srfAC基因，成功得到了缺失srfAC基因的解淀粉芽胞杆菌HZΔsrfAC，显著提高了解淀粉芽胞杆菌对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。相对于解淀粉芽胞杆菌HZ-12来说，本发明所构得的工程菌株对金黄色葡萄球菌的抑制效果提高了64%。
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公开(公告)号：CN114934005B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202210567786.X
申请日：2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽胞杆菌表达宿主，以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌，敲除基因epr、nprE、aprE、aprX、mpr、pbpF、vpr、ykct1、htrB、hag、获得突变株BAX‑10，在野生菌HZ‑12和突变株BAX‑10异源表达碱性蛋白酶基因aprE，BAX‑10分泌表达的碱性蛋白酶AprE的酶活力相对于野生菌HZ‑12提高了57%，BAX‑10具有更高效地表达异源蛋白酶的能力。
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公开(公告)号：CN114606172A
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202210336379.8
申请日：2022-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种提高血红素产量的解淀粉芽胞杆菌工程菌及其构建方法，该工程菌以解淀粉芽胞杆菌HZ‑12为出发菌株，在出发菌株强化表达了解淀粉芽胞杆菌自身的关键基因hemZ，通过上述基因操作得到血红素产量显著提高的解淀粉芽胞杆菌工程菌HPHZ，该菌株在液态发酵培养中血红素的产量达到0.55 mg/L，比野生型菌株HZ‑12提高了18倍。
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公开(公告)号：CN118599875A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410877846.7
申请日：2024-07-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12R1/07
Abstract: 本发明公开了一种解淀粉芽胞杆菌体内进化系统及其应用，所述的进化系统是在解淀粉芽孢杆菌中融合表达Cas9n蛋白和胞苷脱氨酶AID，构建sgRNA单质粒系统的CBE碱基编辑器，以此为基础进一步插入含GGGGGGGG编辑区域的进化模板XP43，设计延长的sgRNA以拓宽编辑窗口，提升体内进化系统的效率。进一步以碱性蛋白酶活性为筛选目标，采用延长sgRNA启动进化程序进行多代编辑富集筛选后得到能产生梯度酶活的系列菌株，其中RBS序列为GGAGAAAA的编辑菌株HZCAX‑R7碱性蛋白酶活性最高，较出发菌株HZC9A提高4.70倍。
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