公开(公告)号：CN117305196A

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202310610090.5

申请日：2023-05-26

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 魏雪团 ,  江学登 ,  韩文元 ,  马红伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种产耐热谷氨酰胺转氨酶的解淀粉芽胞杆菌工程菌，该工程菌是以解淀粉芽胞杆菌BAX‑4为出发菌株，通过基因工程手段，将含有基因X9tgl的表达载体转入出发菌株中，构建的工程菌命名为BAX‑4/pHY‑X9tgl。该工程菌与茂源链霉菌来源的谷氨酰胺转氨酶（STG）相比，工程菌BAX‑4/pHY‑X9tgl产的谷氨酰胺转氨酶（X9tgl）在70‑80℃具有更强的耐热性能，为谷氨酰胺转氨酶在高温环境中的应用奠定了基础，还具有广阔的开发和应用前景。

公开(公告)号：CN118599750A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410881471.1

申请日：2024-07-02

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 魏雪团 ,  赵紫悦 ,  李舟 ,  马红伟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/75 ,  C12P13/00 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种通过调控三维基因组提高亚精胺产量的解淀粉芽胞杆菌工程菌及方法，以解淀粉芽胞杆菌HSPM1为出发菌，通过基因工程的方法敲除了解淀粉芽胞杆菌HSPM1的基因组内调控三维基因组的相关基因ypuF，成功得到了缺失ypuF基因的解淀粉芽胞杆菌PM1ΔypuF，显著提高了亚精胺产量。该工程菌在液态发酵培养中亚精胺产量达到70.62 mg/L，比对照菌株HSPM1提高了80%。

公开(公告)号：CN118599875A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410877846.7

申请日：2024-07-02

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 魏雪团 ,  姜聪 ,  韩文元 ,  马红伟

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种解淀粉芽胞杆菌体内进化系统及其应用，所述的进化系统是在解淀粉芽孢杆菌中融合表达Cas9n蛋白和胞苷脱氨酶AID，构建sgRNA单质粒系统的CBE碱基编辑器，以此为基础进一步插入含GGGGGGGG编辑区域的进化模板XP43，设计延长的sgRNA以拓宽编辑窗口，提升体内进化系统的效率。进一步以碱性蛋白酶活性为筛选目标，采用延长sgRNA启动进化程序进行多代编辑富集筛选后得到能产生梯度酶活的系列菌株，其中RBS序列为GGAGAAAA的编辑菌株HZCAX‑R7碱性蛋白酶活性最高，较出发菌株HZC9A提高4.70倍。