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公开(公告)号：CN119618928A
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202411790828.1
申请日：2024-12-06
Applicant: 华北制药金坦生物技术股份有限公司
Inventor： 刘容麟 , 李岩异 , 高珊 , 张永红 , 吕娜 , 罗楚 , 牛维兵 , 庞晓敏 , 张红霞 , 杨玉凤 , 刘子放 , 李晓 , 贾思凝 , 李亮 , 张丽 , 王珂 , 刘兴坤 , 石玉璇
IPC: G01N15/02 , G01N23/2251 , G01N23/2202 , G01N23/201
Abstract: 本发明提供了一种针对病毒样颗粒的快速高效分子筛层析介质筛选方法。本发明对于某种特定的病毒样颗粒，选用平均内部孔径为该病毒样颗粒直径1.6～1.8倍的分子筛介质用来进行分子筛层析。病毒样颗粒直径通过透射电镜测得，分子筛介质孔径的获取方式为通过询问介质厂家获知或通过小角X射线散射仪分析获知。本发明为分子筛介质筛选提供了筛选标准和步骤，解决了传统的依靠分子量选择分子筛介质不适用于病毒样颗粒的问题。而且本发明筛选方法比传统耗时的层析试错法筛选介质更快速，更加准确。通过精确选择介质，减少了层析介质的筛选次数，有效降低了时间和介质试错成本。
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公开(公告)号：CN116768985A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202211560087.9
申请日：2022-12-07
Applicant: 华北制药金坦生物技术股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种有效纯化病毒样颗粒的方法。本发明所提供的方法重点包括两步，其中一步是采用内部孔径比所需纯化的病毒样颗粒直径小的小孔阴离子层析介质进行层析，另一步是采用内部孔径为所需纯化的病毒样颗粒直径2‑8倍的大孔阴离子层析介质进行层析。通过本发明中方法可以有效去除常规吸附洗脱层析中难以去除干净的与目的蛋白等电点接近、携带电荷量相近的小分子宿主蛋白、酶、核酸、VP1单体、VP1截短蛋白，减少最终产品中杂质的含量。且本发明还可以去除带负电量强于目的蛋白病毒样颗粒的大部分杂质，明显提高后续层析对目的蛋白病毒样颗粒的载量。本发明方法具有成本低、杂质载量高、样品处理量大的特点。
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公开(公告)号：CN116768986B
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202211560091.5
申请日：2022-12-07
Applicant: 华北制药金坦生物技术股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒新型层析纯化方法。该方法包括如下步骤：首先确定样品中病毒样颗粒的等电点；之后对样品进行预处理；接着根据病毒样颗粒的等电点高低，将缓冲液及上样液pH调节至高于病毒样颗粒等电点0.5‑1个pH；再将阴离子层析柱与阳离子层析柱相互串联，使样品依次进行阴、阳离子层析；每次上样量不超过两种层析介质的最大上样量；最后对层析后收集的样品进行浓缩，将浓缩液进行分子筛层析。本发明所提供的层析纯化方法，实现了在高效便捷去除各种杂质的同时，减少了对病毒样颗粒的破坏。
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公开(公告)号：CN116768986A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202211560091.5
申请日：2022-12-07
Applicant: 华北制药金坦生物技术股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种病毒样颗粒新型层析纯化方法。该方法包括如下步骤：首先确定样品中病毒样颗粒的等电点；之后对样品进行预处理；接着根据病毒样颗粒的等电点高低，将缓冲液及上样液pH调节至高于病毒样颗粒等电点0.5‑1个pH；再将阴离子层析柱与阳离子层析柱相互串联，使样品依次进行阴、阳离子层析；每次上样量不超过两种层析介质的最大上样量；最后对层析后收集的样品进行浓缩，将浓缩液进行分子筛层析。本发明所提供的层析纯化方法，实现了在高效便捷去除各种杂质的同时，减少了对病毒样颗粒的破坏。
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公开(公告)号：CN116768985B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202211560087.9
申请日：2022-12-07
Applicant: 华北制药金坦生物技术股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种有效纯化病毒样颗粒的方法。本发明所提供的方法重点包括两步，其中一步是采用内部孔径比所需纯化的病毒样颗粒直径小的小孔阴离子层析介质进行层析，另一步是采用内部孔径为所需纯化的病毒样颗粒直径2‑8倍的大孔阴离子层析介质进行层析。通过本发明中方法可以有效去除常规吸附洗脱层析中难以去除干净的与目的蛋白等电点接近、携带电荷量相近的小分子宿主蛋白、酶、核酸、VP1单体、VP1截短蛋白，减少最终产品中杂质的含量。且本发明还可以去除带负电量强于目的蛋白病毒样颗粒的大部分杂质，明显提高后续层析对目的蛋白病毒样颗粒的载量。本发明方法具有成本低、杂质载量高、样品处理量大的特点。
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