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公开(公告)号：CN112877352B
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202110171963.8
申请日：2021-02-08
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于谷氨酸棒状杆菌的cumate诱导系统及该诱导系统构建的质粒载体和应用。该系统包括：阻遏蛋白CymR基因、启动子、操纵基因CuO及强启动子；启动子控制阻遏蛋白CymR基因，强启动子控制操纵基因CuO。所述阻遏蛋白CymR基因的序列如SEQ ID NO:1所示；所述操纵基因CuO的如SEQ ID NO:2所示。本发明提供的质粒载体包含上述cumate诱导系统。本发明构建的诱导系统严格受诱导剂cumate(四‑异丙基苯甲酸)的调控，实现了cumate对目的基因表达的调控，并且可通过诱导剂cumate的浓度及诱导时间对目的蛋白的表达量进行控制。
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公开(公告)号：CN110423833A
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201910804288.0
申请日：2019-08-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种基于特异性靶标鉴定单增李斯特菌血清型的多重PCR方法。该方法包括：将待测单增李斯特菌菌株进行增菌培养，得到增菌培养液；提取增菌培养液的DNA，将DNA提取液、PCR引物与PCR反应物混合均匀，进行PCR反应，得到PCR反应产物；将PCR反应产物电泳，根据电泳结果判断待检测菌的血清型。本发明针对新挖掘到的单增李斯特菌血清型的特异性靶标lmo2644、LMOf2365_0118、lmo1119、lmo0733基因设计特异性引物，并建立单增李斯特菌血清型的PCR鉴定方法。这些靶标具有准确度高和特异性好的特点。该方法具有准确度高、特异性好、鉴定速度快、成本低廉及操作简单的特点。
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公开(公告)号：CN107857802A
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201710990142.0
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌能提高分泌效率的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明通过融合信号肽，可以使β-半乳糖苷酶分泌量增加，酶活得到进一步提高。本发明通过融合信号肽，实现了转谷氨酰胺酶酶原分泌表达。
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公开(公告)号：CN107698670A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710990133.1
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种可提高蛋白分泌效率的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明提供了一种可提高分泌效率的信号肽，使用后可显著提高菌株的分泌能力，为枯草芽孢杆菌对外源基因的表达提供了有效的元件，可将其应用于耐热β-半乳糖苷酶和转谷氨酰胺酶的表达。
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公开(公告)号：CN107698666A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201710990056.X
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: C07K14/32 , C07K2319/02 , C12N9/1044 , C12N9/2471 , C12Y203/02013 , C12Y302/01023
Abstract: 本发明公开了一种可有效提高分泌的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明提供了一种具有很强的分泌表达活性的信号肽，通过融合信号肽，可以使β-半乳糖苷酶分泌量增加，也可以实现转谷氨酰胺酶酶原分泌表达。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107674119A
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201710990132.7
申请日：2017-10-23
Applicant: 华南理工大学
CPC classification number: C07K14/32 , C07K2319/02 , C12N9/1044 , C12N9/2471 , C12Y203/02013 , C12Y302/01023
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌可有效提高分泌的信号肽及其应用。该信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该信号肽的核苷酸序列选自如下任一序列：(a)如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列或者其互补序列；(b)对SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的，具有与SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列相同的作为信号肽功能的核苷酸序列或者其互补序列。本发明提供了一种可提高分泌效率的信号肽，使用后可显著提高菌株的分泌能力，为枯草芽孢杆菌表达外源基因提供了有效的元件。
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公开(公告)号：CN102260332B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201110215813.9
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw49为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw49在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高8倍和19倍。
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公开(公告)号：CN102260330B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201110215804.X
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw42为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw42在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高9倍和19倍。
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公开(公告)号：CN102260333B
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201110215840.6
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白GCW12为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白GCW12在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高11倍和24倍。
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公开(公告)号：CN102276703A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201110215811.X
申请日：2011-07-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母壁蛋白及其构建的表面展示系统和构建方法。所述巴斯德毕赤酵母壁蛋白的氨基酸序列为SEQNO：1；所述巴斯德毕赤酵母细胞表面展示系统是以所述的巴斯德毕赤酵母壁蛋白Gcw51为锚定蛋白，将靶蛋白固定在巴斯德毕赤酵母细胞表面构成的。本发明的壁蛋白Gcw51在毕赤酵母中表达量十分高，与现已用于巴斯德毕赤酵母表面展示系统的内源锚定蛋白Pir1蛋白和Pir2蛋白相比，分别高9倍和21倍。
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