公开(公告)号：CN114525266B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202210160732.1

申请日：2022-02-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王方华 ,  毛雪静 ,  王永华 ,  李力浪 ,  崔瑞国

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/6481 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种来源于南极细菌的磷脂酶D突变体及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所构建的突变体S148C‑T206C和D225C‑A328C相比于野生型酶蛋白，在保持其最适反应温度条件不变的情况下，将其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的1.4和2.0倍。S148C‑T206C和D225C‑A328C叠加突变后，其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的3.2倍，且酶活力提高到原来的1.4倍。本发明获得的MsPLD突变体可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、日化等领域。

公开(公告)号：CN113801862B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202110962378.X

申请日：2021-08-20

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王永华 ,  胡荣康 ,  王方华 ,  蓝东明 ,  崔瑞国 ,  杨博

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/6481 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体及其重组表达菌株的制备方法，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上发生如下突变：P343A；或Y383L；或P343A，Y383L；或P343A，Y383L，S380V，其对应的氨基酸序列为SEQIDNO:2，SEQID NO:3，SEQID NO:4，SEQID NO:5。相比于野生型，本发明突变体1的酶活力是野生型的1.3倍，突变体2的酶活是野生型的1.46倍，突变体3的酶活是野生型的3.9倍，突变体4的酶活是野生型的11.6倍。本发明获得的磷脂酶突变体活力得到显著提高。

公开(公告)号：CN114525266A

公开(公告)日：2022-05-24

申请号：CN202210160732.1

申请日：2022-02-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王方华 ,  毛雪静 ,  王永华 ,  李力浪 ,  崔瑞国

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/6481 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种来源于南极细菌的磷脂酶D突变体及其应用，其氨基酸序列为SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:8。本发明所构建的突变体S148C‑T206C和D225C‑A328C相比于野生型酶蛋白，在保持其最适反应温度条件不变的情况下，将其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的1.4和2.0倍。S148C‑T206C和D225C‑A328C叠加突变后，其在最适反应温度条件下的半衰期提高到原来的3.2倍，且酶活力提高到原来的1.4倍。本发明获得的MsPLD突变体可适用于磷脂改性，生产磷脂酸及各类天然稀有磷脂和非天然磷脂化合物，应用于生物、食品、医药、日化等领域。

公开(公告)号：CN113801862A

公开(公告)日：2021-12-17

申请号：CN202110962378.X

申请日：2021-08-20

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王永华 ,  胡荣康 ,  王方华 ,  蓝东明 ,  崔瑞国 ,  杨博

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/55 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/64 ,  C12P13/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种海洋链霉菌磷脂酶D突变体及其重组表达菌株的制备方法，所述的磷脂酶D突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上发生如下突变：P343A；或Y383L；或P343A，Y383L；或P343A，Y383L，S380V，其对应的氨基酸序列为SEQIDNO:2，SEQID NO:3，SEQID NO:4，SEQID NO:5。相比于野生型，本发明突变体1的酶活力是野生型的1.3倍，突变体2的酶活是野生型的1.46倍，突变体3的酶活是野生型的3.9倍，突变体4的酶活是野生型的11.6倍。本发明获得的磷脂酶突变体活力得到显著提高。