公开(公告)号：CN106520733B

公开(公告)日：2020-09-22

申请号：CN201610910450.3

申请日：2016-10-19

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 李爽 ,  徐天旺 ,  杨晓锋

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明公开了一种β‑木糖苷酶体内酶聚集体的制备方法，包括如下步骤：(1)将连接肽与双亲短肽拼接，构建得到表达载体；所述双亲短肽为ELK16；(2)将β‑木糖苷酶编码基因与上述表达载体连接，转化入受体菌，获得能表达β‑木糖苷酶–短肽融合蛋白的工程菌；(3)将上述工程菌诱导表达，并对细胞进行破壁处理，离心和/或过滤获得沉淀，即获得β‑木糖苷酶体内酶聚集体。相比于常规表达获得的ThXylC，本发明所得ThXylC‑ELK16活性酶聚集体，比酶活和催化效率得到了提高，且其热耐受性也明显提高。体现出该方法具有在生产中推广应用的巨大潜力。

公开(公告)号：CN106520733A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610910450.3

申请日：2016-10-19

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 李爽 ,  徐天旺 ,  杨晓锋

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N9/2434 ,  C12N15/70 ,  C12Y302/01037

Abstract: 本发明公开了一种β-木糖苷酶体内酶聚集体的制备方法，包括如下步骤：(1)将连接肽与双亲短肽拼接，构建得到表达载体；所述双亲短肽为ELK16；(2)将β-木糖苷酶编码基因与上述表达载体连接，转化入受体菌，获得能表达β-木糖苷酶–短肽融合蛋白的工程菌；(3)将上述工程菌诱导表达，并对细胞进行破壁处理，离心和/或过滤获得沉淀，即获得β-木糖苷酶体内酶聚集体。相比于常规表达获得的ThXylC，本发明所得ThXylC-ELK16活性酶聚集体，比酶活和催化效率得到了提高，且其热耐受性也明显提高。体现出该方法具有在生产中推广应用的巨大潜力。