公开(公告)号：CN119372073A

公开(公告)日：2025-01-28

申请号：CN202411668547.9

申请日：2024-11-21

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈勇 ,  周超伟 ,  牛欢青 ,  孙文俊 ,  朱盈盈 ,  夏璇 ,  冷静 ,  陈天鹏 ,  应汉杰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/12 ,  C12N15/31 ,  C12N15/56 ,  C12N15/62 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12P19/04 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种基于粘附蛋白的酶高效表面展示的毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和固定化连续催化的应用，在出发菌株毕赤酵母中异源表达粘附蛋白基因、β‑半乳糖苷酶基因LacA和细胞壁锚定蛋白基因Pir1p。所述毕赤酵母基因工程菌是在毕赤酵母GS115基因组中整合表达了细胞壁粘附蛋白基因，显著增强了毕赤酵母细胞成膜能力；然后多拷贝整合β‑半乳糖苷酶表面展示基因，并以组成型启动子控制目标蛋白β‑半乳糖苷酶展示于酵母表面。基于粘附蛋白的酶高效表面展示的毕赤酵母基因工程菌能进行多批次连续催化且效果优于未整合生物膜基因的酶表面展示基因工程菌，经6批次后相对转化率仍保持78％，在固定化连续催化上具有良好的工业化应用前景。