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公开(公告)号:CN112592844B
公开(公告)日:2023-08-18
申请号:CN202110029601.5
申请日:2021-01-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与在产木聚糖酶中的应用。所述重组毕赤酵母基因工程菌是在所述毕赤酵母菌中过表达凝集素蛋白基因LMAN2。上述重组菌加强了毕赤酵母菌的生物成膜能力,解决现有技术中毕赤酵母菌成膜能力弱,不能用于连续固定化发酵的问题。具体地,在游离发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了48.9%;在单次固定化发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了38.8%,且重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶。
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公开(公告)号:CN111254151A
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN202010249275.4
申请日:2020-04-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物技术及基因工程领域,具体公开了一种邻苯二酚1,2-双加氧酶基因及其在在合成4位取代顺,顺-粘康酸中的应用。所述的苯二酚1,2-双加氧酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因表达的产物邻苯二酚1,2-双加氧酶,能高效催化4位取代儿茶酚生成相应的4位取代顺,顺-粘康酸。本发明还提供了一种利用分批补料策略进行全细胞催化制备4位取代顺,顺-粘康酸的方法,该方法过程简单、反应条件温和以及对环境友好,符合绿色发展经济的道路的概念,为安全大批量生产提供了简单便捷的途径。
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公开(公告)号:CN111254151B
公开(公告)日:2021-10-29
申请号:CN202010249275.4
申请日:2020-04-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明属于生物技术及基因工程领域,具体公开了一种邻苯二酚1,2‑双加氧酶基因及其在合成4位取代顺,顺‑粘康酸中的应用。所述的苯二酚1,2‑双加氧酶编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因表达的产物邻苯二酚1,2‑双加氧酶,能高效催化4位取代儿茶酚生成相应的4位取代顺,顺‑粘康酸。本发明还提供了一种利用分批补料策略进行全细胞催化制备4位取代顺,顺‑粘康酸的方法,该方法过程简单、反应条件温和以及对环境友好,符合绿色发展经济的道路的概念,为安全大批量生产提供了简单便捷的途径。
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公开(公告)号:CN113046256A
公开(公告)日:2021-06-29
申请号:CN202110294510.4
申请日:2021-03-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和应用,该毕赤酵母基因工程菌是通过在毕赤酵母菌中过表达转录抑制因子和激活因子HSF1构建得到的。所述构建方法包括如下步骤:(1)对毕赤酵母菌基因组进行PCR扩增得到HSF1基因片段;(2)将HSF1基因片段克隆到表达质粒上,得到重组质粒;(3)将线性化的重组质粒导入毕赤酵母菌中,筛选得到毕赤酵母基因工程菌。毕赤酵母基因工程菌能够有效提高自身生物膜成膜能力,使得重组毕赤酵母在单次固定化发酵条件下产酶的酶活力比游离发酵的出发菌提高了28.3%,发酵周期缩短了36.6%。重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶,经过七批次固定化发酵后,重组菌发酵产酶的酶活比出发菌高出约7倍。
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公开(公告)号:CN113046256B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202110294510.4
申请日:2021-03-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法和应用,该毕赤酵母基因工程菌是通过在毕赤酵母菌中过表达转录抑制因子和激活因子HSF1构建得到的。所述构建方法包括如下步骤:(1)对毕赤酵母菌基因组进行PCR扩增得到HSF1基因片段;(2)将HSF1基因片段克隆到表达质粒上,得到重组质粒;(3)将线性化的重组质粒导入毕赤酵母菌中,筛选得到毕赤酵母基因工程菌。毕赤酵母基因工程菌能够有效提高自身生物膜成膜能力,使得重组毕赤酵母在单次固定化发酵条件下产酶的酶活力比游离发酵的出发菌提高了28.3%,发酵周期缩短了36.6%。重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶,经过七批次固定化发酵后,重组菌发酵产酶的酶活比出发菌高出约7倍。
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公开(公告)号:CN112592844A
公开(公告)日:2021-04-02
申请号:CN202110029601.5
申请日:2021-01-11
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与在产木聚糖酶中的应用。所述重组毕赤酵母基因工程菌是在所述毕赤酵母菌中过表达凝集素蛋白基因LMAN2。上述重组菌加强了毕赤酵母菌的生物成膜能力,解决现有技术中毕赤酵母菌成膜能力弱,不能用于连续固定化发酵的问题。具体地,在游离发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了48.9%;在单次固定化发酵条件下毕赤酵母基因工程菌产木聚糖酶酶活比原始菌提高了38.8%,且重组菌能够稳定连续进行至少七批次的固定化发酵产酶。
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