公开(公告)号：CN106282256B

公开(公告)日：2019-08-20

申请号：CN201610895213.4

申请日：2016-10-14

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  张博文 ,  王昕 ,  钱娟 ,  蔡沛沛 ,  欧阳平凯

IPC: C12P13/24 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生产顺式‑4‑羟脯氨酸的生物转化法。本发明方法通过在大肠杆菌BL21(DE3)胞内共表达了脯氨酸羟化酶和脯氨酸转运蛋白，实现了高产顺式‑4‑羟脯氨酸在重组菌中的高效合成。与现有的顺式‑4‑羟脯氨酸发酵法相比，该方法操作简便、可持续、性价比高，具有良好的工业化前景。

公开(公告)号：CN106282256A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610895213.4

申请日：2016-10-14

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  张博文 ,  王昕 ,  钱娟 ,  蔡沛沛 ,  欧阳平凯

IPC: C12P13/24 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种生产顺式-4-羟脯氨酸的生物转化法。本发明方法通过在大肠杆菌BL21(DE3)胞内共表达了脯氨酸羟化酶和脯氨酸转运蛋白，实现了高产顺式-4-羟脯氨酸在重组菌中的高效合成。与现有的顺式-4-羟脯氨酸发酵法相比，该方法操作简便、可持续、性价比高，具有良好的工业化前景。

公开(公告)号：CN106434782A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610895160.6

申请日：2016-10-14

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  张博文 ,  王昕 ,  钱娟 ,  蔡沛沛 ,  欧阳平凯

IPC: C12P13/24 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产顺式-4-羟脯氨酸的方法，该方法通过在宿主菌细胞内构建过表达脯氨酸羟化酶基因Ecp4H，利用CRISPR-Cas9技术抑制脯氨酸降解途径中脯氨酸羟化酶基因putA以及α-酮戊二酸降解途径中琥珀酸脱氢酶基因sucA、sucB，异柠檬酸裂解酶基因aceA和异柠檬酸激酶基因aceK的表达得到重组菌株，并将重组菌株发酵培养后，全细胞转化生产顺式-4-羟脯氨酸。本方法培养方式简单，并且菌株活力较高，产物转化率较高。

公开(公告)号：CN104803909A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201510268919.3

申请日：2015-05-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  何珣 ,  叶峰 ,  黄慧 ,  钱娟 ,  欧阳平凯

IPC: C07D211/60

Abstract: 本发明公开了一种L-哌啶甲酸的分离方法，将含L-哌啶甲酸的待分离液通过催化树脂，树脂吸附饱和后，以碱性溶液作为洗脱剂对树脂进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液结晶、干燥得到L-哌啶甲酸。含L-哌啶甲酸的待分离液通过催化树脂的流速为0.4~3mL/min。所述催化树脂为D103-MTBE或者WS-3催化树脂。催化树脂填充量为每克湿树脂吸附0.1-0.2gL-哌啶甲酸。所述碱性溶液为0.05-0.1%（v/v）的氨水。该方法简单、方便，节约生产成本。

公开(公告)号：CN104803909B

公开(公告)日：2017-08-29

申请号：CN201510268919.3

申请日：2015-05-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  何珣 ,  叶峰 ,  黄慧 ,  钱娟 ,  欧阳平凯

IPC: C07D211/60

Abstract: 本发明公开了一种L‑哌啶甲酸的分离方法，将含L‑哌啶甲酸的待分离液通过催化树脂，树脂吸附饱和后，以碱性溶液作为洗脱剂对树脂进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液结晶、干燥得到L‑哌啶甲酸。含L‑哌啶甲酸的待分离液通过催化树脂的流速为0.4~3 mL/min。所述催化树脂为D103‑MTBE或者WS‑3催化树脂。催化树脂填充量为每克湿树脂吸附0.1‑0.2 g L‑哌啶甲酸。所述碱性溶液为0.05‑0.1%（v/v）的氨水。该方法简单、方便，节约生产成本。

公开(公告)号：CN106479993A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201610849843.8

申请日：2016-09-26

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  钱娟 ,  王昕

IPC: C12N9/16 ,  C12P13/00

CPC classification number: C12N9/16 ,  C12P13/00 ,  C12Y301/04004

Abstract: 本发明公开一种磷脂酶D催化磷脂酰胆碱PC）合成磷脂酰乙醇胺（PE）的方法。本发明包括磷脂酶D的制备及产酶条件优化，催化体系的建立，本发明可以实现磷脂酰乙醇胺（PE）的高效合成。添加底物磷脂酰胆碱（PC）和乙醇胺，通过两相催化得到磷脂酰乙醇胺和胆碱。本发明使用易得的底物卵磷脂，工艺简单，反应条件温和，磷脂酰乙醇胺（PE）的转化率可达到69.7%。

公开(公告)号：CN106434782B

公开(公告)日：2020-01-10

申请号：CN201610895160.6

申请日：2016-10-14

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  张博文 ,  王昕 ,  钱娟 ,  蔡沛沛 ,  欧阳平凯

IPC: C12P13/24 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种产顺式‑4‑羟脯氨酸的方法，该方法通过在宿主菌细胞内构建过表达脯氨酸羟化酶基因Ecp4H，利用CRISPR‑Cas9技术抑制脯氨酸降解途径中脯氨酸羟化酶基因putA以及α‑酮戊二酸降解途径中琥珀酸脱氢酶基因sucA、sucB，异柠檬酸裂解酶基因aceA和异柠檬酸激酶基因aceK的表达得到重组菌株，并将重组菌株发酵培养后，全细胞转化生产顺式‑4‑羟脯氨酸。本方法培养方式简单，并且菌株活力较高，产物转化率较高。