公开(公告)号：CN106591274B

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201710012814.0

申请日：2017-01-09

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  黄金莎 ,  庄伟 ,  吴菁岚 ,  周精卫 ,  陈勇 ,  陈晓春 ,  朱晨杰 ,  柳东 ,  牛欢青

IPC: C12N11/08 ,  C12N9/22 ,  C12P19/30

Abstract: 本发明公开了一种固定化核酸酶P1的制备方法，包括如下步骤：(1)改性树脂：以表面修饰剂改性介孔树脂，得到表面改性的介孔树脂载体，所述的表面改性剂为伴刀豆蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚多巴胺中的一种或几种的混合物；所述的介孔树脂为环氧基树脂、氨基树脂、磺酸基树脂或者羧基化树脂；(2)核酸酶P1固定化：将步骤(1)得到的介孔树脂载体加入到0.5~6g/L核酸酶P1酶液中，核酸酶P1与树脂的质量比为10~250mg：1g，混合，在25℃振荡反应时间2~12h，抽滤得到树脂固定化核酸酶P1。本发明提供的表面改性介孔树脂微球固定化方法，核酸酶P1的催化性能高，可使RNA水解率达到95%以上。

公开(公告)号：CN106929500A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710285921.0

申请日：2017-04-27

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  庄伟 ,  黄金莎 ,  殷航 ,  吴菁岚 ,  周精卫 ,  陈勇 ,  陈晓春 ,  朱晨杰 ,  柳东 ,  牛欢青

IPC: C12N11/00 ,  C12P7/58

CPC classification number: C12N11/00 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/0065 ,  C12P7/58 ,  C12Y101/03004 ,  C12Y111/01006

Abstract: 本发明公开了一种无载体共交联葡萄糖氧化酶/过氧化氢酶聚体的制备方法及其在生产葡萄糖酸或盐的应用，所述的共交联酶聚体Combi‑CLEAs(CAT/GOx)添加了伴刀豆蛋白A(ConA)、聚赖氨酸(EPL)、PEG‑NH2、牛血清蛋白(BSA)、海藻糖或PEG10000为保护剂。本发明制备的共交联酶聚体不但提高了固定化酶的酶活回收率(大于100％)，而且有效的改善了交联酶聚体操作稳定性差的问题，延长了共交联酶聚体的使用寿命。本发明的无载体共交联葡萄糖氧化酶/过氧化氢酶聚体在生产葡萄糖酸或盐的过程中，重复使用20批次后葡萄糖转化率仍保持在90％以上。

公开(公告)号：CN106591274A

公开(公告)日：2017-04-26

申请号：CN201710012814.0

申请日：2017-01-09

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 应汉杰 ,  黄金莎 ,  庄伟 ,  吴菁岚 ,  周精卫 ,  陈勇 ,  陈晓春 ,  朱晨杰 ,  柳东 ,  牛欢青

IPC: C12N11/08 ,  C12N9/22 ,  C12P19/30

CPC classification number: C12N11/08 ,  C12N9/22 ,  C12P19/30 ,  C12Y301/30001

Abstract: 本发明公开了一种固定化核酸酶P1的制备方法，包括如下步骤：(1)改性树脂：以表面修饰剂改性介孔树脂，得到表面改性的介孔树脂载体，所述的表面改性剂为伴刀豆蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚多巴胺中的一种或几种的混合物；所述的介孔树脂为环氧基树脂、氨基树脂、磺酸基树脂或者羧基化树脂；(2)核酸酶P1固定化：将步骤(1)得到的介孔树脂载体加入到0.5～6g/L核酸酶P1酶液中，核酸酶P1与树脂的质量比为10～250mg：1g，混合，在25℃振荡反应时间2～12h，抽滤得到树脂固定化核酸酶P1。本发明提供的表面改性介孔树脂微球固定化方法，核酸酶P1的催化性能高，可使RNA水解率达到95％以上。