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公开(公告)号：CN118805679A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202410975038.4
申请日：2024-07-19
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种‘凤丹’组培快繁及高效再生的方法，属于牡丹快速培植技术领域，解决了现有技术中‘凤丹’快繁及再生效率低、生根率、增殖率不佳、根系状态不佳、愈伤组织诱导及分化效果差等问题中的至少一个。本发明公开了一种‘凤丹’组培快繁及高效再生的方法，所述方法包括S1启动培养、S2增殖培养和S3生根培养；其中，步骤S1采用的启动用培养基包括NN69和IBA；步骤S2采用的增殖用培养基包括NN69、CPPU和IBA。本发明开创性地采用NN69基本培养基和CPPU+IBA生长调节剂组合用于牡丹培育，构建了牡丹组织愈伤再生体系并优选了组培扩繁中的培养条件，使得组培苗增殖系数高、成苗率高、成本低、收益大，实现了‘凤丹’种苗的工厂化生产。
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公开(公告)号：CN117305318B
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202311202071.5
申请日：2023-09-18
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了山新杨微管蛋白PdbTUBG基因及其敲除载体和应用，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的山新杨微管蛋白PdbTUBG基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；其敲除系统包含SEQ ID NO.3‑5所示的核苷酸序列。本发明以山新杨组培苗幼嫩叶片为材料，通过克隆得到山新杨微管蛋白PdbTUBG基因，在此基础上构建其敲除载体CRISPR/Cas9，转入山新杨中，得到抗性转基因植株。与山新杨野生型组培苗(WT)相比，山新杨抗性转基因植株组培苗(#104、#107、#111、#176)茎部生长发育延缓，植株出现矮化的现象，但根系中侧根生长得到显著的增强。
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公开(公告)号：CN112937867B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202110158895.1
申请日：2021-02-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种裂溅式种子飞播水囊及其投放装置，属于农林种植技术领域。该飞播水囊包括水囊袋和扎口飘带，扎口飘带扎紧水囊袋开口，水囊袋材质为可降解塑料薄膜，其中装填有内容物，内容物为含水包衣丸粒化种子，或者为种子与水的直接混合物。若干个飞播水囊装入防水大口袋，播种时在分级投放装置的引导下进行精准作业。该飞播水囊能同时有效解决种子飞播时面临的飘移问题、闪芽问题、杂草干扰问题和鼠鸟害问题，制备方法简单，原料成本低，适用范围广。该投放装置实现飞播水囊按需进行两侧或单侧投放，控制其投放速度，实现定点按需作业、线状持续作业、大面积作业，或者是点、线、面相结合的，兼顾景观和生态的复杂的空中精准作业。
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公开(公告)号：CN116218898A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310162653.9
申请日：2023-02-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/29 , C12N15/113 , A01H5/02 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种培育不飞絮无花粉美洲黑杨的方法及其采用的sgRNA，属于生物技术和植物基因工程技术领域。本发明对美洲黑杨雄株Y染色单体上特异序列进行分析，设计靶向Y特异序列(YHS)的保守sgRNAs，利用CRISPR技术，在杨树雄株中实现对Y特异序列进行有效编辑，促使杨树性别转换，同时对调控杨絮发育的基因进行编辑，创制不飞絮无花粉杨树新种质。本发明为利用基因编辑技术手段创制不飞絮无花粉杨树新品种，克服杨树飞絮及花粉污染提供了有效工具，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN110864997B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN201911169346.3
申请日：2019-11-25
Applicant: 南京林业大学
IPC: G01N5/02
Abstract: 本发明公开了一种测定种子不同部位吸水性的方法，包括以下步骤：1)采用水选法选出饱满的供试种子，剔除空粒、虫害粒，阴干后保存；2)称取50粒以上的种子的原始重量；3)凡士林融化成液体状态，平铺于器皿中；4)将种子需要密封的部位埋入装有凡士林的器皿中进行密封；5)向器皿中倒入清水，使没有埋入凡士林的种子的部位完全浸没于清水中，测定不同吸水时间种子重量的变化，绘制种子不同部位的吸水曲线；即可准确快速测定大量种子不同部位吸水性。该方法具有操作简单、快速和准确等特点，可以在短时间内准确密封种子的不同部位，通过测定各个部位的吸水曲线判断种子的吸水特性，提高了测定效率与准确性，特别适用于测定大量种子场合。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110073981B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201910522117.9
申请日：2019-06-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用胚拯救获得杨树杂交苗的方法，包括采集花枝、插条及培养、授粉和胚拯救等步骤，胚拯救方法：外植体消毒后，将种子置于胚拯救培养基上培养7‑14d，再按长出幼苗和没长出幼苗分两步进行：将长出的幼苗转移到生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植即得杂交苗；如没长出幼苗，将种子诱导出愈伤组织，用芽分化培养基诱导出芽，最后转生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植，得到杂交苗。本发明采用胚拯救的方法，对未发育完全的种子进行组织培养，可获得大量杂交苗，方法简单，节省了杨树的育种时间，避免了资源浪费，有效克服了杨树的传统水培法过程中存在的种子败育导致的杂交失败的问题，特别适合于美洲黑杨的水培。
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公开(公告)号：CN113416794A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202110760926.0
申请日：2021-07-06
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种簸箕柳雄花荧光定量的内参基因及其专用引物和应用。本发明选择簸箕柳雄花为实验材料，这些雄花涵盖4个不同发育阶段：雄花分化期、休眠期、初花期和盛花期。依次通过荧光定量PCR分析，扩增曲线和熔解曲线分析，LinRegPCR扩增效率分析，geNorm、NormFinder和BestKeeper基因表达稳定性分析，筛选出符合适用于簸箕柳雄花荧光定量PCR的2个内参基因(DnaJ和ACT)，其中，DnaJ基因的基因序列如SEQ ID NO.1所示，ACT基因的基因序列如SEQ ID NO.2所示。本申请填补了不同发育时期的簸箕柳雄花没有内参基因的现状，为簸箕柳雄花发育相关功能基因的精确定量提供有力支持，可提高研究的稳定性和准确性。
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公开(公告)号：CN111763654A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010777047.4
申请日：2020-08-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杨树落叶松杨珊锈菌单孢扩繁方法，属于微生物培养技术领域。本发明的方法包括种苗、采集感病叶片和菌种初繁、单孢系转接和扩繁等步骤，包括：使用90mm的一次性培养皿，在培养皿底部垫两张滤纸，加入3mL无菌水进行保湿。将病叶上的单孢子堆用移液枪离散至4μL的琼脂水溶液中，将混有夏孢子堆的溶液打在具有感病能力的NL895的嫩叶上，接种完成后置于温度为19℃，光周期为16h/24h的温室中进行培养，待其发病后在进一步扩繁至足量，保存至4℃冰箱待用。本发明采用室内接种的方法，对锈菌进行叶盘法培养，可获得分离的孢子堆，方法简单高效，为更好地研究杨树抗锈性提供纯化单一的菌株。
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公开(公告)号：CN110295191A
公开(公告)日：2019-10-01
申请号：CN201910636822.1
申请日：2019-07-15
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种二倍体毛白杨的遗传转化方法，首先采集雄性二倍体毛白杨幼嫩的含芽茎段作为外植体，清洗消毒后依次进行增殖继代培养、芽伸长培养和生根培养，得到毛白杨无菌苗，挑取携带pBI121载体质粒的根癌农杆菌，制备菌液作为侵染液；将毛白杨无菌苗的叶片切成叶盘，培养7d后转入侵染液中进行侵染，侵染后的叶盘先黑暗培养后光照恢复培养，最后进行抗性芽的筛选，得到候选植株，对候选植株进行GUS染色和PCR检测，将均为阳性的植株进行炼苗和移栽，得到二倍体毛白杨转基因植株。本发明方法具有转化效率高、培育周期短、可大规模投入生产等优点，二倍体毛白杨的遗传转化体系可为规模化培育新品种、定向改造优良性状提供帮助。
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公开(公告)号：CN110073981A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910522117.9
申请日：2019-06-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用胚拯救获得杨树杂交苗的方法，包括采集花枝、插条及培养、授粉和胚拯救等步骤，胚拯救方法：外植体消毒后，将种子置于胚拯救培养基上培养7-14d，再按长出幼苗和没长出幼苗分两步进行：将长出的幼苗转移到生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植即得杂交苗；如没长出幼苗，将种子诱导出愈伤组织，用芽分化培养基诱导出芽，最后转生根培养基上培养，得到无菌苗，长大后移植，得到杂交苗。本发明采用胚拯救的方法，对未发育完全的种子进行组织培养，可获得大量杂交苗，方法简单，节省了杨树的育种时间，避免了资源浪费，有效克服了杨树的传统水培法过程中存在的种子败育导致的杂交失败的问题，特别适合于美洲黑杨的水培。
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