公开(公告)号：CN1285407A

公开(公告)日：2001-02-28

申请号：CN00124699.2

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  徐虹 ,  秦燕 ,  楼士林 ,  黄澜 ,  李根

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/67 ,  C12N15/31 ,  C12N15/12 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种基因工程,构建了包含蓝藻热休克基因groESL强启动区、目的基因UBTα1、rbcS终止区和Km标记基因的完整的可高效表达的蓝藻基因表达系统,并运用基因整合平台系统和穿梭质粒系统进行转基因表达胸腺素α1,由于利用热休克基因groESL的强启动子,易调控,经热诱导后能几十上百倍地加快转录,同时利用泛素融合技术,使目的基因Tα1得到高效表达,本发明工艺简单,可举一反三,具有很大的开发前景,为产业化开发转基因蓝藻开辟一条新途径。

公开(公告)号：CN1285408A

公开(公告)日：2001-02-28

申请号：CN00124700.X

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  楼士林 ,  徐虹 ,  罗田

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/31 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种基因工程,从蓝藻Calothrix7601染色体DNA上PCR扩增出cpc2启动区、整合平台同源片段L和R,组装了含cpc2启动区、UBTα1目的基因、rbcS终止子、Kmr报告基因和基因整合平台同源序列等元件的供体质粒pUTK,建立了Calothrix7601新的基因整合平台系统,获得转UBTα1基因的藻株,并从中检测到Tα1基因的表达产物。本发明以蓝藻作为新型基因工程受体和生物反应器,使人的Tα1基因在其中高效表达,以大量生产Tα1,具有很大的开发前景。

公开(公告)号：CN1188523C

公开(公告)日：2005-02-09

申请号：CN00129601.9

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  徐虹 ,  楼士林 ,  欧阳青

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种基因工程，以从织线藻Plectonema boryanum中提取的内源小质粒pPBS1构建蓝藻穿梭表达载体pPKE2，其有大肠杆菌源和蓝藻源质粒的复制起始位点，有选择标记、启动子、多克隆位点及终止区，可作为外源基因在蓝藻中表达的受体菌，本发明将目的基因胸腺素α1(Tα1)基因和泛素基因融合后插入表达载体pPKE2的多克隆位点，获得含目的基因Tα1的重组质粒，并转化进单胞蓝藻Synechococcus sp.PCC7942中，Southern杂交证实和Western印迹法检测到了Tα1表达产物。

公开(公告)号：CN1285409A

公开(公告)日：2001-02-28

申请号：CN00129601.9

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  徐虹 ,  楼士林 ,  欧阳青

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种基因工程,以从织线藻Plectonemaboryanum中提取的内源小质粒pPBS1构建蓝藻穿梭表达载体pPKE2, 其有大肠杆菌源和蓝藻源质粒的复制起始位点,有选择标记、启动子、多克隆位点及终止区,可作为外源基因在蓝藻中表达的受体菌,本发明将目的基因胸腺素α1(Tα1)基因和泛素基因融合后插入表达载体pPKE2的多克隆位点,获得含目的基因Tα1的重组质粒,并转化进单胞蓝藻Synechococcussp.PCC7942中,Southern杂交证实和Western印迹法检测到了Tα1表达产物。

公开(公告)号：CN1128880C

公开(公告)日：2003-11-26

申请号：CN00124699.2

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  徐虹 ,  秦燕 ,  楼士林 ,  黄澜 ,  李根

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/67 ,  C12N15/31 ,  C12N15/12 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种蓝藻转基因表达系统及表达外源基因的方法，构建了包含蓝藻热休克基因groESL强启动区、目的基因UBTα1、rbcS终止区和Km标记基因的完整的可高效表达的蓝藻基因表达系统，并运用基因整合平台系统和穿梭质粒系统进行转基因表达胸腺素α1，由于利用热休克基因groESL的强启动子，易调控，经热诱导后能几十上百倍地加快转录，同时利用泛素融合技术，使目的基因Tα1得到高效表达，转化藻的藻株中UBTα1的表达量分别达到17.6%和10%，且工艺简单、成本低。

公开(公告)号：CN1116416C

公开(公告)日：2003-07-30

申请号：CN00124700.X

申请日：2000-09-29

Applicant: 厦门大学

Inventor： 章军 ,  楼士林 ,  徐虹 ,  罗田

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/31 ,  C12N1/13 ,  A61K38/16

Abstract: 涉及一种基因工程，从蓝藻Calothrix 7601染色体DNA上PCR扩增出cpc2启动区、整合平台同源片段L和R，组装了含cpc2启动区、UBTα1目的基因、rbcS终止子、Kmr报告基因和基因整合平台同源序列等元件的供体质粒pUTK，建立了Calothrix 7601新的基因整合平台系统，获得转UBTα1基因的藻株，并从中检测到Tα1基因的表达产物。本发明以蓝藻作为新型基因工程受体和生物反应器，使人的Tα1基因在其中高效表达，以大量生产Tα1，具有很大的开发前景。