公开(公告)号：CN116042559B

公开(公告)日：2024-08-20

申请号：CN202310168149.X

申请日：2023-02-27

Applicant: 厦门大学

Inventor： 敬科举 ,  胡敏 ,  黄晓婷

IPC: C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  C12P13/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种热稳定亮氨酸脱氢酶的应用及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中公开了的三种亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列如：SEQ ID NO.1～3所示。这三种亮氨酸脱氢酶具有优异的温度适应范围、较广的pH的适应范围，在最适温度70℃下的半衰期高达30h左右，这三种酶可应用于高温条件下的氧化脱氨反应或还原胺化反应中。而且利用原核表达的这三种酶具有较高的纯度与生物学活性可以用于制备L‑叔亮氨酸。

公开(公告)号：CN116042559A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202310168149.X

申请日：2023-02-27

Applicant: 厦门大学

Inventor： 敬科举 ,  胡敏 ,  黄晓婷

IPC: C12N9/06 ,  C12N15/70 ,  C12P13/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种热稳定亮氨酸脱氢酶的应用及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中公开了的三种亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列如：SEQ ID NO.1～3所示。这三种亮氨酸脱氢酶具有优异的温度适应范围、较广的pH的适应范围，在最适温度70℃下的半衰期高达30h左右，这三种酶可应用于高温条件下的氧化脱氨反应或还原胺化反应中。而且利用原核表达的这三种酶具有较高的纯度与生物学活性可以用于制备L‑叔亮氨酸。

公开(公告)号：CN113913317A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111225985.4

申请日：2021-10-21

Applicant: 厦门大学

Inventor： 敬科举 ,  邓健樑 ,  胡敏

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种重组酿酒酵母及提高重组酿酒酵母表面展示葡萄糖脱氢酶的酶活性的方法，属于基因工程技术领域，本发明以酿酒酵母EBY100作为载体，包含表达葡萄糖脱氢酶的重组质粒；所述重组质粒以pYD1作为原始质粒。本发明的重组酿酒酵母为表面展示系统，通过锚定蛋白Aga1与Aga2，将葡萄糖脱氢酶携带到重组酿酒酵母的细胞表面上，可不经纯化直接进行全细胞催化。基于构建的重组酿酒酵母表面展示的系统，本发明提出通过优化诱导表达的温度、pH和半乳糖浓度，提高表面展示葡萄糖脱氢酶的表达量以及提高酶催化效率(Kcat/Km)的方法。