公开(公告)号：CN102305859A

公开(公告)日：2012-01-04

申请号：CN201110212152.4

申请日：2011-07-27

Applicant: 吉林大学

Inventor： 丁壮 ,  黄志强 ,  母连志 ,  吴娟 ,  杨闽楠 ,  张泉鹏

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的活毒抗体试剂盒，其特征在于：将待检血清用样品稀释液2倍稀释后100μl加入ELISA板中37℃孵育1h，设置阳性对照、阴性对照和空白对照。用洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入结合单抗每孔100μl，37℃孵育1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入羊抗小鼠IgG-HRP结合物37℃作用1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入显色底物溶液，将底物A和底物B以1:1混合，100μl加入ELISA孔中，避光显色15min，加入50μl终止液，测其OD490值。判定结果是这样设定的：抑制率PI=(OD未抑制-OD样品)/OD未抑制*100%，PI>30%对应的样品为阳性，小于则为阴性。该试剂盒方法技术成熟，重复性强，能够有效区分猪繁殖与呼吸综合征病毒活毒和灭活毒抗体，一般研究人员即可完成。

公开(公告)号：CN102305859B

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201110212152.4

申请日：2011-07-27

Applicant: 吉林大学

Inventor： 丁壮 ,  黄志强 ,  母连志 ,  吴娟 ,  杨闽楠 ,  张泉鹏

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及一种检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的活毒抗体试剂盒，其特征在于：将待检血清用样品稀释液2倍稀释后100ul加入ELISA板中37℃孵育1h，设置阳性对照、阴性对照和空白对照。用洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入结合单抗每孔100ul，37℃孵育1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入羊抗小鼠IgG-HRP结合物37℃作用1h，洗涤液清洗5次，每次2min；然后加入显色底物溶液，将底物A和底物B以1:1混合，100ul加入ELISA孔中，避光显色15min，加入50ul终止液，测其OD490值。判定结果是这样设定的：抑制率PI=(OD未抑制-OD样品)/OD未抑制*100%，PI>30%对应的样品为阳性，小于则为阴性。该试剂盒方法技术成熟，重复性强，能够有效区分猪繁殖与呼吸综合征病毒活毒和灭活毒抗体，一般研究人员即可完成。