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公开(公告)号：CN115806982B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202211041458.2
申请日：2022-08-29
Applicant: 吉林大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开一种抑制牛CD44基因表达的shRNA序列及应用，涉及一种有效的抑制牛CD44基因的表达的shRNA，即CD44 LV‑shRNA 592；通过慢病毒载体构建和慢病毒包装技术，进一步提高载体转入细胞和活体动物的效率以及shRNA载体表达和发挥作用的周期，提高了shRNA抑制基因表达的效果。
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公开(公告)号：CN110982912A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN202010097319.6
申请日：2020-02-18
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种利用RRAD基因遗传标记检测牛胴体肉质性状的方法，尤其涉及一种通过RRAD基因3’非翻译区（3’UTR）序列的SNPs作为牛肉质和胴体性状分子标记的检测方法，通过对牛的基因组DNA混池或个体DNA为模板进行PCR扩增，采用DNA测序的方法检测，公开了1个SNP1位点，并基于对每个个体的SNP1进行了基因分型与牛胴体和肉质性状的关联分析结果，提供了一种能够在DNA水平上早期筛查和预测牛胴体和肉质性状的分子标记，应用于牛的分子育种及早期选育；本发明利用RRAD基因的SNP1即3’UTR 198 G>A，作为检测肉牛胴体和肉质性状遗传标记的方法，为遗传育种研究和生产饲养早期选育优质牛个体及改善牛肉质和胴体性状奠定基础。
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公开(公告)号：CN104745716B
公开(公告)日：2017-03-01
申请号：CN201510195275.X
申请日：2015-04-23
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种牛AGPAT6基因单核苷酸多态性的检测方法，其方法为：第一步、用牛的全血进行全基因组DNA提取；第二步、以提取的全基因组DNA为模板，分别以引物对A、B为引物，PCR扩增牛AGPAT6基因；第三步、用PCR混合产物测序，找出SNP位点；第四步、用限制性内切酶对PCR产物进行酶切；第五步、将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳条带判定其多态性。有益效果：本发明利用PCR-RFLP技术对牛AGPAT6基因第1外显子的303bp处的T>C单核苷酸多态性和第12外显子的299bp处的G>A单核苷酸多态性进行检测。提供了一种低成本、简单、精准、便于推广应用的在DNA水平上筛查和检测与牛肉质性状和胴体性状密切相关的遗传标记，可用于牛的辅助选择和分子育种。
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公开(公告)号：CN101864428B
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201010102855.7
申请日：2010-01-29
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域，研究两个影响肉质性状的候选基因即钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)基因和肥胖(OB)基因在松辽黑猪标记辅助选择中的应用。在CAST基因内含子6存在一个A→G的碱基突变，导致了Hinf I限制性酶切位点的改变，产生多态性片段；OB基因第3469位碱基处存在一个T→C的碱基突变，导致限制性片段长度多态性的产生。将两个候选基因两个突变位点作为一个分子标记，通过聚合PCR-RFLP的方法，用限制性内切酶Hinf I检测两个突变位点，并将检测结果与松辽黑猪的肉质性状进行关联分析，以期为松辽黑猪的选种、早期选育、杂种优势的利用等提供基础参数，为松辽黑猪改良育种和新品系的培育提供理论依据和实验基础。本发明的特点在于建立CAST基因和OB基因聚合PCR，同时建立两个候选基因同一个限制性内切酶Hinf I聚合酶切方法，为松辽黑猪的标记辅助选择提供实验依据。
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公开(公告)号：CN110257532B
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN201910669414.6
申请日：2019-07-24
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858
Abstract: 本发明公开了ANGPTL5基因作为牛背膘厚分子标记及检测方法，通过对牛的全基因组DNA进行PCR扩增后，并通过直接测序的方法检测PCR产物序列存在的SNPs，发现了ANGPTL5基因序列内含子1和内含子2上的4个SNPs位点与牛背膘厚性状的相关性。提供了在DNA水平上，一种简单、快速和有效的筛查和检测与牛背膘厚性状密切相关的遗传标记，可应用于肉牛的分子育种，在牛饲养初期，以功能SNPs作为中国西门塔尔牛背膘厚性状改良的分子育种和辅助选择的标记，能够快速预测和评估牛的背膘厚，从而在降低成本的前提下，进一步提高牛肉质，加快良种选育速度和提高种群品质。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111893176A
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN202010814817.8
申请日：2020-08-13
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6883 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12N5/071
Abstract: 本发明公开了一种预示荷斯坦奶牛乳房炎乳源外泌体miRNA诊断标志物，是以乳源外泌体miR-223和miR-200b做为荷斯坦奶牛乳房炎的诊断标志物；成功分离和鉴定荷斯坦奶牛乳源外泌体；荷斯坦奶牛乳房炎个体外泌体中miR-223的水平较对照组显著增加(P＜0.001)；miR-200b的水平较对照组显著降低(P＜0.001)。由于在外泌体的提取过程中，绝大部分蛋白成分被去除，泌体miRNA较牛奶miRNA可以更为准确地反映奶牛个体是否患乳房炎。
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公开(公告)号：CN105063232B
公开(公告)日：2019-04-05
申请号：CN201510593430.3
申请日：2015-09-17
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种牛乳脂代谢相关基因C4BPA定量PCR检测方法，其方法为：第一步、设计特异性的定量引物；第二步、乳腺组织RNA的提取；第三步、将乳腺组织RNA反转录为cDNA；第四步、进行荧光定量PCR反应。有益效果：提供了一种简单、快速、低成本、精确度高、便于在基因组水平上筛查和检测C4BPA基因与奶牛乳脂代谢的相关性的定量PCR方法。为进一步研究该基因及探讨可能影响奶牛乳脂的基因提供了依据及可靠的研究方法。本发明筛查获得C4BPA基因与奶牛乳脂代谢相关，可用于奶牛的育种工作，以便满足不同人群对牛奶中乳脂含量的要求。
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公开(公告)号：CN105200148B
公开(公告)日：2017-12-22
申请号：CN201510717111.9
申请日：2015-10-30
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种辅助检测肉乳兼用牛胴体组成性状的方法及试剂盒，可用于种用肉牛早期选择，进行针对乳肉兼用牛胴体性状的遗传标记筛选。只需要采集少量牛血液或组织（尾部亦可），进行基因组DNA提取，使用该分子检测试剂盒检测，测序后可鉴定肉牛样本群体中胴体和肉质性状的SNPs遗传标记，进行单倍型分析后，PSAP基因功能作用区域的6个SNPs位点及其单倍型组合可以作为一种辅助检测肉乳兼用牛胴体性状的有效分子遗传标记。PSAP基因引物片段及SNPs位点单倍型组合Hap2和Hap6能够作为检测和预示乳肉兼用牛胴体组成性状的专用试剂盒。可以作为肉乳兼用牛种质资源创制中优良个体的早期选择和产业化生产中入栏前育肥牛的筛查和生产。
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公开(公告)号：CN105200083A
公开(公告)日：2015-12-30
申请号：CN201510701573.1
申请日：2015-10-23
Applicant: 吉林大学
Abstract: 本发明公开了一种小鼠腮腺特异性表达真核转基因载体及其构建方法，基因载体包含小鼠分泌蛋白的启动子1098bp，优化或未优化的cbh2基因的完整片段，其构建方法为：(1)、以小鼠DNA为模板，SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2为引物进行第一次PCR扩增，获得小鼠的腮腺分泌蛋白启动子；(2)、对目的片段进行纯化；(3)、小鼠腮腺特异性表达真核转基因载体，优化的；(4)、得到未优化载体；(5)、对目的片段未优化cbh2进行纯化；(6)、小鼠腮腺特异性表达真核转基因载体，未优化的。有益效果：该转基因载体可以实现目的蛋白在特定组织中表达，具有在小鼠，牛等动物腮腺特异表达的能力，且该载体还具有便于筛选的绿色荧光标记。
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公开(公告)号：CN104745716A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510195275.X
申请日：2015-04-23
Applicant: 吉林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种牛AGPAT6基因单核苷酸多态性的检测方法，其方法为：第一步、用牛的全血进行全基因组DNA提取；第二步、以提取的全基因组DNA为模板，分别以引物对A、B为引物，PCR扩增牛AGPAT6基因；第三步、用PCR混合产物测序，找出SNP位点；第四步、用限制性内切酶对PCR产物进行酶切；第五步、将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳条带判定其多态性。有益效果：本发明利用PCR-RFLP技术对牛AGPAT6基因第1外显子的303bp处的T>C单核苷酸多态性和第12外显子的299bp处的G>A单核苷酸多态性进行检测。提供了一种低成本、简单、精准、便于推广应用的在DNA水平上筛查和检测与牛肉质性状和胴体性状密切相关的遗传标记，可用于牛的辅助选择和分子育种。
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