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公开(公告)号：CN102051358A
公开(公告)日：2011-05-11
申请号：CN200910198575.8
申请日：2009-11-10
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体提供一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒。它包含肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、多克隆位点、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区；肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区依次连接，多克隆位点位于肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区和多聚腺苷酸信号区之间，与基因表达增强子相互独立。本发明通过有效调控肿瘤治疗基因的表达使之局限于肿瘤细胞内，显著提高了治疗基因表达的特异性，进而有效提高肿瘤基因治疗的安全性，降低其对正常组织和细胞的损害。
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公开(公告)号：CN102191224A
公开(公告)日：2011-09-21
申请号：CN201010124995.4
申请日：2010-03-12
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属医药生物技术领域，具体涉及一种单纯疱疹病毒的重靶向修饰方法，本发明使用外源靶向物质尤其通过聚乙二醇化叶酸化学改性或修饰单纯疱疹病毒HSV的表面糖蛋白，使其天然的细胞嗜性丧失，而是被特异性地转导入肿瘤细胞或组织，对其它正常细胞或组织不感染。应用本方法能有效提高单纯疱疹病毒特异性地感染肿瘤细胞的能力，规避免疫反应和体内中和抗体，降低毒副作用，提高安全性。
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公开(公告)号：CN103409464B
公开(公告)日：2018-08-24
申请号：CN201310338102.X
申请日：2013-08-06
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术领域，具体为一种质粒pCMV‑RBE‑TK1‑N2‑EF1α‑hFIXml及其构建方法和应用。该质粒含CMV启动子‑RBE元件‑TK1基因的筛选标记的人凝血因子IX表达框架。该质粒和rep表达质粒共转染哺乳动物细胞可用于构建定点整合于AAVS1位点表达人类凝血因子IX的稳定细胞。使用该表达质粒制备稳定表达人类凝血因子IX的稳定细胞一方面正负双重筛选可以防止细胞随机突变导致的非整合细胞耐药对转基因细胞群纯净度的影响，提高表达效率；另一方面可以有效预防插入突变导致的基因突变和癌蛋白表达风险。通过常规分子生物学方法取代人类凝血因子IX表达框架可以构建表达其它基因的具有定点整合以及正负筛选的质粒。
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公开(公告)号：CN102051358B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN200910198575.8
申请日：2009-11-10
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体提供一种嵌合的肿瘤特异性基因表达调控盒。它包含肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、多克隆位点、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区；肿瘤特异性基因启动子、肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区、基因表达增强子和多聚腺苷酸信号区依次连接，多克隆位点位于肿瘤特异性翻译调控元件5’端非翻译区和多聚腺苷酸信号区之间，与基因表达增强子相互独立。本发明通过有效调控肿瘤治疗基因的表达使之局限于肿瘤细胞内，显著提高了治疗基因表达的特异性，进而有效提高肿瘤基因治疗的安全性，降低其对正常组织和细胞的损害。
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公开(公告)号：CN1896230A
公开(公告)日：2007-01-17
申请号：CN200610028021.X
申请日：2006-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属转基因技术领域，具体为一种新的经TAT和NLS修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用。其中包括经TAT修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT－ΦC31，以及经TAT和NLS共同修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT－ΦC31－NLS，实验表明这些融合蛋白可作为有效的、安全的能在哺乳动物细胞染色体水平上进行基因操作工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1827781A
公开(公告)日：2006-09-06
申请号：CN200510112200.7
申请日：2005-12-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体涉及一种用于检测整合酶ΦC31功能的真核细胞系统及其制备方法。该检测系统由重组报告PB[EGFP]转染人胚胎肾细胞系293后用G418筛选，挑选出单克隆细胞而获得，其中，PB[EGFP]是利用pEGFP－N2载体，在增强型烟草花叶病毒启动子(CMVIE)之后，顺序插入特异序列attP和attB，然后在其间加上一段牛生长因子的多聚腺苷酸而构成。该细胞系统可以评估出转染、转导、转化等多种途径表达的ΦC31整合酶，及其突变体等的活性和功能。该检测系统操作简便，准确性高，重复性好，是整合酶ΦC31在哺乳动物细胞中应用的重要定量评估系统。
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公开(公告)号：CN100503833C
公开(公告)日：2009-06-24
申请号：CN200510112284.4
申请日：2005-12-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体为一种rep基因表达质粒，RBE顺式元件定点整合体系及其制备方法和在基因治疗中的应用。该定点整合体系为由携带有RBE顺式元件及EGFP报告基因的表达质粒与rep基因表达质粒共同作用构成，或者由携带有RBE顺式元件及人凝血因子IX的表达质粒与rep基因表达质粒共同作用构成。该定点整合系统可用于在人类细胞株中导入外源基因，制备程序简单，与其他治疗基因联合运用，可以适用于多种疾病的基因治疗。
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公开(公告)号：CN100410369C
公开(公告)日：2008-08-13
申请号：CN200610028021.X
申请日：2006-06-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属转基因技术领域，具体为一种新的经TAT和NLS修饰的ΦC31整合酶蛋白及其应用。其中包括经TAT修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT-ΦC31，以及经TAT和NLS共同修饰的ΦC31整合酶蛋白TAT-ΦC31-NLS，实验表明这些融合蛋白可作为有效的、安全的能在哺乳动物细胞染色体水平上进行基因操作工具。
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公开(公告)号：CN101157919A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710046169.0
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体为一种用于哺乳动物细胞内反式提供rep蛋白的表达质粒。该表达质粒具有负反馈调节机制，即在rep达到一定水平后反馈关闭rep蛋白的表达，并且该质粒有自身不整合到宿主基因组的特性。该质粒的特性源于对AAV病毒P5启动子的RBE的定向突变，使其在细胞内可以如野生P5启动子一样具有负反馈作用，但是不像野生P5一样具有整合到基因组的能力，一方面保证rep适度表达，避免rep短期细胞毒性，同时防止自身整合到基因组，提高长期遗传安全性。该质粒可以广泛用于需要适度反式提供rep蛋白的基因操作和基因治疗体系，如AAV病毒包装体系和依赖RBE介导的基因定点整合操作与基因治疗。
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公开(公告)号：CN101157906A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710046170.3
申请日：2007-09-20
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种用于定点整合的蛋白酶Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶及其制备方法，其多克隆抗体及其应用。首先表达纯化Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶蛋白质，该蛋白质保持PhiBT1整合酶的基本特性，但是其可以通过蛋白转导进入高等生物细胞，并增加蛋白向细胞核转移的能力，同时适用于细胞外体系以及活细胞体系中介导特异性附加在attP与attB上的DNA分子之间的交换与转移等基因操作。用Phi BT1－TAT－NLS－HIS6整合酶蛋白质直接与佐剂相混合，注射免疫动物，制得Phi BT1整合酶多克隆抗体。该抗体可以用于特异性识别Phi BT1整合酶蛋白质。
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