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公开(公告)号：CN114752667A
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202210438091.1
申请日：2022-04-25
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种定量检测MT‑ATP6m.9185位点异质性的引物组、探针和试剂盒，涉及生物技术领域。所述引物组包括如SEQ ID NO:1所示的上游引物和如SEQ ID NO:2所示的下游引物；所述探针包括如SEQ ID NO:3所示的野生型探针和如SEQ ID NO:4所示的突变型探针。所述试剂盒包括上述的引物组和探针。本发明提供了一种定量检测MT‑ATP6m.9185位点异质性的引物组、探针和试剂盒，可以实现对人单细胞样本MT‑ATP6m.9185位点异质性的高准确性、高灵敏性和高重复性检测。
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公开(公告)号：CN113151356A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110492685.6
申请日：2021-04-29
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达人源不同ApoE的CHO细胞系及其制备方法。利用Lipofectamine 2000转染试剂将不同的人源ApoE质粒(ApoE2‑EGFP，ApoE3‑EGFP，ApoE4‑EGFP)和对照组质粒(N‑EGFP)转染到中国仓鼠卵巢细胞(chinese hamster ovary，CHO)中，随后用分选流式细胞仪将转染阳性的不同ApoE阳性细胞筛选出来，并用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和Western Blot进行ApoE的表达鉴定。本发明利用转染和细胞分选方法制备了能够稳定表达人源不同ApoE的CHO细胞株，该细胞株为研究不同ApoE的生物学功能提供了一个很好的工具。
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公开(公告)号：CN118291647A
公开(公告)日：2024-07-05
申请号：CN202410603554.4
申请日：2024-05-15
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6883 , C12Q1/6858 , C12Q1/6806 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种检测mtDNA突变的96个SNP位点检测的引物探针试剂盒，包括用于扩增mtDNA突变的96个SNP位点的引物探针、ddPCR预混液和无菌水，所述96个SNP位点的引物探针序列号如SEQ ID No:1‑SEQ ID No:390所示，所述ddPCR预混液中包含PCR缓冲液、Taq DNA聚合酶、MgCl2和dNTPs；本发明通过设计针对mtDNA突变的96个SNP位点检测的试剂盒，可以实现mtDNA突变的精确、快速、定量检测，检测成本低，同时试剂盒检测所需样本量较少，仅需采集单个细胞即可实现检测，且可以实现胚胎囊胚活检滋养层细胞的单细胞mtDNA突变检测。
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公开(公告)号：CN114023382A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111293327.9
申请日：2021-11-03
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开预测线粒体DNA突变阈值、生育风险和取卵数的方法，包括以下步骤：先建立线粒体突变发病概率预测模型并估算突变阈值s，再建立生育风险预测模型并预测突变携带者的生育风险p，然后利用二项分布建立卵母细胞提取预测模型并计算突变携带者的PGT取卵数；本发明使用发病概率预测模型估算常见mtDNA突变的阈值，并预测母亲的生育风险和PGT取卵数，在建立的生育风险预测模型和取卵预测模型的基础上，只需要知道突变携带者的线粒体DNA突变比例就可以计算其生育风险与生育一个健康子代所需的最小PGT取卵数，有助于临床医生对携带mtDNA异质突变的家庭进行遗传管理并提供遗传咨询，并提供PGT的标准指南。
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公开(公告)号：CN111621556A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201911420591.7
申请日：2019-12-31
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院 , 合肥海关技术中心
IPC: C12Q1/6883
Abstract: 一种检测人线粒体ATP6基因8993位点基因型的试剂盒，包括用于扩增线粒体ATP6基因8993位点的PCR引物和Taqman-MGB探针。荧光定量PCR法是分子诊断领域应用最广泛的一种检测手段，该方法灵敏度高、操作简便，适合大规模的临床应用，特别是ABI公司的MGB探针技术在单核苷酸分型方面更是具有广阔的市场。MGB探针上的小沟结合物能够提高探针的Tm值，设计的比普通Taqman探针短，无背景荧光，而且具有能分辨一个碱基差异的能力，非常适合用于SNP分型检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116218967A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310325053.X
申请日：2023-03-30
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于ddPCR区分并定量线性和环形mtDNA的方法及试剂盒，属于基因检测领域。上述方法包括以下步骤：利用核酸外切酶消化法去除待测样品中线性mtDNA，并用ddPCR法定量所述待测样品中水解前和水解后的mtDNA，进而实现区分所述待测样品中线性和环形mtDNA。本发明首次在使用核酸外切酶去除先前存在的线性mtDNA片段后，选择使用微滴式数字PCR对核酸外切酶消化前后的样本进行mtDNA的定量，并在人的胚胎样本和外周血液样本中实现成功应用，突破性地实现了灵敏区分线性和环形mtDNA的同时进行mtDNA的准确定量，并且操作简单、成本低，本发明有望大规模在临床样本中推广使用。
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公开(公告)号：CN114023382B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111293327.9
申请日：2021-11-03
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
Abstract: 本发明公开预测线粒体DNA突变阈值、生育风险和取卵数的方法，包括以下步骤：先建立线粒体突变发病概率预测模型并估算突变阈值s，再建立生育风险预测模型并预测突变携带者的生育风险p，然后利用二项分布建立卵母细胞提取预测模型并计算突变携带者的PGT取卵数；本发明使用发病概率预测模型估算常见mtDNA突变的阈值，并预测母亲的生育风险和PGT取卵数，在建立的生育风险预测模型和取卵预测模型的基础上，只需要知道突变携带者的线粒体DNA突变比例就可以计算其生育风险与生育一个健康子代所需的最小PGT取卵数，有助于临床医生对携带mtDNA异质突变的家庭进行遗传管理并提供遗传咨询，并提供PGT的标准指南。
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公开(公告)号：CN112111568A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201911420718.5
申请日：2019-12-31
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院 , 合肥海关技术中心
IPC: C12Q1/6883
Abstract: 一种检测线粒体3243位点基因型的试剂盒，包括用于扩增线粒体ATP6基因3243位点的PCR引物和Taqman‑MGB探针。荧光定量PCR法是分子诊断领域应用最广泛的一种检测手段，该方法灵敏度高、操作简便，适合大规模的临床应用。MGB探针上的小沟结合物能够提高探针的Tm值，设计的比普通Taqman探针短，无背景荧光，而且具有能分辨一个碱基差异的能力，非常适合用于SNP分型检测。
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公开(公告)号：CN111676281A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN201911412188.X
申请日：2019-12-31
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院 , 合肥海关技术中心
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6858
Abstract: 一种基于HRM法检测人线粒体ND3基因10191位点基因型的试剂盒，包括扩增线粒体ND3基因10191位点的PCR引物；所述PCR引物包括：上游引物F：5′-AACTCAACGGCTACATAG-3′；下游引物R：5′-TTTATGGAGAAAGGGACG-3′。本发明的HRM技术不会受到碱基的位点或者碱基的类型限制，也不需要合成价格较高的探针，只需要在反应结束后对反应产物进行一步溶解，再用仪器对溶解曲线进行分析，完成基因分型和突变位点的扫描。
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公开(公告)号：CN215856067U
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202122487707.8
申请日：2021-10-15
Applicant: 安徽医科大学第一附属医院
Abstract: 本实用新型公开一种改良核基因组移植显微操作皿，包括皿体和顶盖，皿体与顶盖之间设置有限位部，皿体与顶盖通过限位部可拆卸连接，皿体侧壁安装有装夹部；皿体底部开设有通孔，通孔与皿体同轴设置，通孔内固定连接有窥视片；装夹部包括对称固定连接在皿体侧壁的第一连接杆，第一连接杆远离皿体的一端转动连接有螺纹套筒，螺纹套筒内螺纹连接有第二连接杆一端，第二连接杆另一端固定连接有夹块，皿体通过夹块与显微镜的载物台限位配合；皿体为塑料材质，窥视片的材质为玻璃。本实用新型将皿体设置为塑料材质，降低皿体的透光性，同时在皿体底部开设通孔，在通孔内设置材质为玻璃的窥视片，便于对皿体内的纺锤体进行观察。
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