公开(公告)号：CN110144421B

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN201910428121.9

申请日：2019-05-16

Applicant: 安徽省农业科学院棉花研究所

Inventor： 李常凤 ,  韩文兵 ,  秦文强 ,  闫晓明 ,  周克海 ,  宋云

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的RPA引物、探针、试剂盒和检测方法，属于生物安全技术领域。所述的RPA引物如下，RPA上游引物序列Vd‑RPA‑F如SEQ ID No.1所示，其下游引物序列Vd‑RPA‑R如SEQ ID No.2所示；所述的RPA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，其序列大小为49bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3‑Sp acer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端33bp处进行THF修饰。本发明还提供基于所述RPA引物和探针形成的试剂盒和检测方法。本发明首次将RPA技术应用到棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为棉花黄萎病的早期诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。

公开(公告)号：CN110144421A

公开(公告)日：2019-08-20

申请号：CN201910428121.9

申请日：2019-05-16

Applicant: 安徽省农业科学院棉花研究所

Inventor： 李常凤 ,  韩文兵 ,  秦文强 ,  闫晓明 ,  周克海 ,  宋云

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的RPA引物、探针、试剂盒和检测方法，属于生物安全技术领域。所述的RPA引物如下，RPA上游引物序列Vd-RPA-F如SEQ ID No.1所示，其下游引物序列Vd-RPA-R如SEQ ID No.2所示；所述的RPA探针根据所述的RPA引物扩增区域设计，其序列大小为49bp，其5’端用FAM标记，3’端用C3-Sp acer修饰，且在RPA探针的序列中间距5’端33bp处进行THF修饰。本发明还提供基于所述RPA引物和探针形成的试剂盒和检测方法。本发明首次将RPA技术应用到棉花黄萎病病原大丽轮枝菌的分子检测，其兼具特异性强、灵敏度高、实用性好、对仪器设备要求较低的特点，为棉花黄萎病的早期诊断、病害防治和农药减量使用提供新方法。