公开(公告)号：CN114790434A

公开(公告)日：2022-07-26

申请号：CN202110096075.4

申请日：2021-01-25

Applicant: 山东大学

Inventor： 生举正 ,  王钰佳 ,  侯进 ,  于婕

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及合成可点击反应肝素骨架的大肠埃希菌工程菌株及其构建方法与应用。本发明的大肠埃希菌工程菌株不具备内源合成UDP‑单糖和肝素骨架的能力，引入异源组成型UDP‑叠氮单糖合成途径及诱导型叠氮修饰肝素骨架合成途径，在培养基中添加叠氮单糖和诱导剂时，合成可点击反应的叠氮修饰的肝素骨架。本发明基于对糖胺聚糖合成相关酶分子的研究基础和巧妙设计，利用代谢工程手段，构建了具备叠氮基团修饰的肝素骨架多糖合成能力的大肠埃希菌工程菌株。这些肝素骨架多糖以游离的形式进入发酵培养基，或者以荚膜多糖的形式锚定在工程菌株细胞表面。通过点击化学等生物正交反应的手段，可以实现工程菌株本身及这些多糖骨架的可视化标记。

公开(公告)号：CN114790434B

公开(公告)日：2023-10-27

申请号：CN202110096075.4

申请日：2021-01-25

Applicant: 山东大学

Inventor： 生举正 ,  王钰佳 ,  侯进 ,  于婕

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及合成可点击反应肝素骨架的大肠埃希菌工程菌株及其构建方法与应用。本发明的大肠埃希菌工程菌株不具备内源合成UDP‑单糖和肝素骨架的能力，引入异源组成型UDP‑叠氮单糖合成途径及诱导型叠氮修饰肝素骨架合成途径，在培养基中添加叠氮单糖和诱导剂时，合成可点击反应的叠氮修饰的肝素骨架。本发明基于对糖胺聚糖合成相关酶分子的研究基础和巧妙设计，利用代谢工程手段，构建了具备叠氮基团修饰的肝素骨架多糖合成能力的大肠埃希菌工程菌株。这些肝素骨架多糖以游离的形式进入发酵培养基，或者以荚膜多糖的形式锚定在工程菌株细胞表面。通过点击化学等生物正交反应的手段，可以实现工程菌株本身及这些多糖骨架的可视化标记。