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公开(公告)号：CN111208242A
公开(公告)日：2020-05-29
申请号：CN202010214753.8
申请日：2020-03-24
Applicant: 东莞市东阳光生物药研发有限公司 , 广东东阳光药业有限公司
Abstract: 本发明属于GLP-1检测技术领域，涉及一种利用高效液相色谱法检测GLP-1或其类似物的方法。该方法使用流动相A和流动相B对含有GLP-1或GLP-1类似物的样品进行洗脱，所述流动相A为含有硫酸钠的乙腈水溶液，流动相B为乙腈水溶液。本发明提供的方法通过设置特定的流动相，可以减小基线波动，从而提高检测灵敏度，提高主峰和杂质的分离效果，更有效地控制GLP-1产品或GLP-1类似物产品的质量。
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公开(公告)号：CN111426843A
公开(公告)日：2020-07-17
申请号：CN202010176369.3
申请日：2020-03-13
Applicant: 东莞市东阳光生物药研发有限公司 , 广东东阳光药业有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明提出一种宿主蛋白残留的检测试剂盒。该试剂盒包括：多克隆抗体以及任选的生物标记的多克隆抗体，所述多克隆抗体特异性识别所述宿主蛋白，其中，所述多克隆抗体是通过如下方式获得的：利用抗原对第一待免疫动物进行主动免疫，以便获得第一含有抗体的血清；利用所述第一含有抗体的血清对第二待免疫动物进行被动免疫，以便获得第二含有抗体的血清；将含有第二抗体的血清进行纯化处理，以便获得第二抗体，所述多克隆抗体包括所述第二抗体。利用根据本发明实施例的试剂盒检测生物药产品中的宿主蛋白的残留，灵敏度和准确度均显著提高。
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公开(公告)号：CN110452952A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201810433076.1
申请日：2018-05-08
Applicant: 广东东阳光药业有限公司
IPC: C12Q1/02
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及GLP-1类似物生物活性的检测方法，尤其是利拉鲁肽和杜拉鲁肽生物活性的检测方法。本发明通过用细胞培养基稀释细胞HEK293/GLP1R，用含磷酸二酯酶抑制剂的溶液稀释对照品和供试品，再用试剂盒检测刺激后细胞内cAMP水平变化，用多功能酶标仪进行读数测定，最后用统计软件拟合实验数据，通过公式计算得供试品的生物活性。该方法较之前的试剂盒检测方法更为准确、快速，且重复性更高，故符合生物制品生物学活性测定方法的要求。
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公开(公告)号：CN110850105B
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN201910727274.3
申请日：2019-08-07
Applicant: 东莞市东阳光生物药研发有限公司 , 广东东阳光药业有限公司
Abstract: 本发明涉及生物化学领域，具体涉及一种胰岛素及其类似物O‑糖基化位点的鉴定方法。首先对胰岛素及其类似物进行弹性蛋白酶酶切，通过LC‑MS分析肽图谱，初步确定相应的糖基化肽段；然后对糖基化关键肽段进行Q‑TOF‑MS/MS分析，通过优化关键肽段的CID质谱碎裂能量，得到关键的带糖的碎片离子，从而更准确和简便的分析O糖基化位点。本发明在常规CID碎裂技术下即可实现复杂肽段的糖基化位点分析和确认，操作简单，准确度高，实用性强，经济，适用于所有带有CID碎裂技术的质谱仪，为糖基化类的翻译后修饰分析以及在蛋白质组学中的应用提供了一种新的思路。
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公开(公告)号：CN113466466A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110342714.0
申请日：2021-03-30
Applicant: 广东东阳光药业有限公司
Abstract: 本发明提出了一种细胞裂解液。该细胞裂解液包括：0.4％～5％Triton X‑100，100～200mM NaCl和25～75mM HEPES。该细胞裂解液利用Triton X‑100这种温和型的非离子表面活性剂作为裂解液的主要成分，可以破坏细胞膜，但对细胞核膜的作用较弱，既能达到细胞裂解的作用，又不会使基因组等复合物释放出来，避免透明胶状物的产生，从根源上解决液体粘稠及实验数据误差大的问题。该细胞裂解液特别适用于细胞蛋白磷酸化检测中对细胞样品的裂解处理。
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公开(公告)号：CN110850105A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201910727274.3
申请日：2019-08-07
Applicant: 广东东阳光药业有限公司 , 东莞东阳光药物研发有限公司
Abstract: 本发明涉及生物化学领域，具体涉及一种胰岛素及其类似物O-糖基化位点的鉴定方法。首先对胰岛素及其类似物进行弹性蛋白酶酶切，通过LC-MS分析肽图谱，初步确定相应的糖基化肽段；然后对糖基化关键肽段进行Q-TOF-MS/MS分析，通过优化关键肽段的CID质谱碎裂能量，得到关键的带糖的碎片离子，从而更准确和简便的分析O糖基化位点。本发明在常规CID碎裂技术下即可实现复杂肽段的糖基化位点分析和确认，操作简单，准确度高，实用性强，经济，适用于所有带有CID碎裂技术的质谱仪，为糖基化类的翻译后修饰分析以及在蛋白质组学中的应用提供了一种新的思路。
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