公开(公告)号：CN106701795A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201510794643.2

申请日：2015-11-13

Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司

Inventor： 唐志玲 ,  齐冬梅 ,  林旭埜 ,  林德锐 ,  胡美容 ,  周燕芬 ,  谢少霞 ,  陈丹

IPC: C12N15/34 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12Q1/70

Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型双拷贝感染性克隆的病毒拯救方法及其在PCV2高免血清制备中的应用。通过采用适当的基因工程技术方法，基于临床分离得到的PCV2基因组DNA，设计特异性引物，经聚合酶链式反应(PCR)获得全长基因，将两个拷贝的PCV2全长基因以首尾相连的方式串联连到pEGFP-N1载体上，形成PCV2双拷贝全基因重组质粒，转染ST细胞后连续盲传60代，借助PCR检测方法以及间接免疫荧光实验技术(IFA)对其在ST细胞上的感染性以及病毒增殖稳定性进行鉴定，为进一步研究圆环病毒的致病机理及诊断技术奠定基础。

公开(公告)号：CN106701794A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201510794641.3

申请日：2015-11-13

Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司

Inventor： 唐志玲 ,  林旭埜 ,  林德锐 ,  齐冬梅 ,  胡美容 ,  周燕芬 ,  谢少霞 ,  陈丹

IPC: C12N15/34 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型(PCV2)双拷贝感染性克隆的病毒拯救方法，通过采用适当的基因工程技术方法，基于临床分离得到的PCV2基因组DNA，设计特异性引物，经聚合酶链式反应(PCR)获得全长基因，将两个拷贝的PCV2全长基因以首尾相连的方式串联连到pEGFP-N1载体上，形成PCV2双拷贝全基因重组质粒，转染ST细胞后连续盲传60代，借助PCR检测方法以及间接免疫荧光实验技术(IFA)对其在ST细胞上的感染性以及病毒增殖稳定性进行鉴定，为进一步研究圆环病毒的致病机理及诊断技术等研究打下基础。

公开(公告)号：CN106701793A

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201510794434.8

申请日：2015-11-13

Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司

Inventor： 唐志玲 ,  林旭埜 ,  林德锐 ,  齐冬梅 ,  胡美容 ,  周燕芬 ,  谢少霞 ,  陈丹

IPC: C12N15/34 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型(PCV2)双拷贝感染性克隆的病毒拯救方法及其在间接ELISA检测方法中的应用，通过采用适当的基因工程技术方法，基于临床分离得到的PCV2基因组DNA，设计特异性引物，经聚合酶链式反应(PCR)获得全长基因，将两个拷贝的PCV2全长基因以首尾相连的方式串联连到pEGFP-N1载体上，形成PCV2双拷贝全基因重组质粒，转染ST细胞后连续盲传60代，借助PCR检测方法以及间接免疫荧光实验技术(IFA)对其在ST细胞上的感染性以及病毒增殖稳定性进行鉴定，为进一步开展圆环病毒的致病机理及诊断技术研究打下基础。