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公开(公告)号:CN118731201A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410703947.2
申请日:2024-06-03
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本申请属于日化新材料领域,公开了一种对猪伪狂犬病病毒gD或gB蛋白的HPLC定量检测方法,以添加有3~10vol%的异丙醇的磷酸盐缓冲液为流动相,采用分子尺寸排阻高效液相色谱柱,在流速为0.5~1.0ml/min;柱温为18~26℃的条件下,检测样品中的gD和/或gB蛋白的含量。该方法选择分子尺寸排阻高效液相色谱柱,以加入有异丙醇的磷酸盐缓冲液为流动相,可以有效的分离和检测猪伪狂犬病病毒gD蛋白和gB蛋白,本发明的方法具有有效排除杂质干扰,出峰时间稳定,峰形两侧对称,定量准确,重复性好的优势。
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公开(公告)号:CN118086021A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410135101.3
申请日:2024-01-31
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种用于细胞培养的转瓶,包括瓶体;所述瓶体的内壁设有多条沿内壁凸起的凸条,相邻两条凸条构成一条沿瓶体轴向延伸的凹槽;在垂直于瓶体的轴线方向上,所述瓶体的内壁的截面展开后构成一条连续起伏的曲线。该转瓶在瓶身的内壁有多条交替布置的凸条和凹槽,其构成了一个环状的连续起伏的波浪形的面,该转瓶在转动的过程中,会带动内部的细胞培养液搅动,根据转速的不同,可形成轻微的搅动效果、半悬浮和轻微悬浮的搅动效果或悬浮培养的搅动效果。此外,本发明还提供了该瓶体的应用。
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公开(公告)号:CN112898419B
公开(公告)日:2022-11-08
申请号:CN202110152893.1
申请日:2021-02-03
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/558 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明制备得到了一株具有高特异性、高灵敏度的单克隆抗体杂交瘤细胞株3E8,杂交瘤细胞株3E8分泌的单克隆抗体与PRRSV‑NVDC‑JXA1株及经过传代得到的PRRSV‑JXA1‑R疫苗弱毒株均具有良好的反应活性,对于美洲型PRRSV和欧洲型PRRSV均具有广谱反应活性,可以用于美洲型PRRSV和欧洲型PRRSV的检测,同时,本发明的单克隆抗体其能抑制和减少PRRSV‑NVDC‑JXA1株接种后导致的CPE,对于PRRSV病毒具有一定的中和活性。
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公开(公告)号:CN112898419A
公开(公告)日:2021-06-04
申请号:CN202110152893.1
申请日:2021-02-03
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/558 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明制备得到了一株具有高特异性、高灵敏度的单克隆抗体杂交瘤细胞株3E8,杂交瘤细胞株3E8分泌的单克隆抗体与PRRSV‑NVDC‑JXA1株及经过传代得到的PRRSV‑JXA1‑R疫苗弱毒株均具有良好的反应活性,对于美洲型PRRSV和欧洲型PRRSV均具有广谱反应活性,可以用于美洲型PRRSV和欧洲型PRRSV的检测,同时,本发明的单克隆抗体其能抑制和减少PRRSV‑NVDC‑JXA1株接种后导致的CPE,对于PRRSV病毒具有一定的中和活性。
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公开(公告)号:CN108815517A
公开(公告)日:2018-11-16
申请号:CN201810768007.6
申请日:2018-07-13
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种鸭瘟活疫苗及其制备方法,属于生物制品制备技术领域。本发明利用鸡胚成纤维细胞系DF-1作为鸭瘟病毒宿主生产鸭瘟病毒液,再向制得的病毒液中加入耐热保护剂制备成鸭瘟病毒活疫苗。本发明采用DF-1来培养鸭瘟病毒,避免了CEF细胞培养病毒存在外源病毒污染的安全隐患,由于DF-1细胞随用随取,省时省力,极大地降低了鸭瘟病毒培养过程中的生产成本,制得的鸭瘟活疫苗安全性好、免疫效力高、对鸭瘟的强毒攻击具有完全的免疫保护作用,疫苗中添加了改良耐热保护剂,使得鸭瘟活疫苗可在2-8℃保存24个月,病毒含量和效价不降低,从而降低了保存要求,便于鸭瘟活疫苗的储存和运输,降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN112946285A
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN202110152296.9
申请日:2021-02-03
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/543 , C07K16/10 , C07K16/06 , C07K1/22
Abstract: 一种检测高致病性PRRSV感染的ELISA试剂盒,所述试剂盒包括:包被抗PRRSV的多克隆抗体的酶标板、抗PRRSV单克隆抗体、HRP标记的羊抗鼠IgG、洗涤液、显色液、终止液、样品裂解液、阳性对照和阴性对照,其特征在于:所述抗PRRSV单克隆抗体是由杂交瘤细胞株3E8分泌获得。所述试剂盒既可以检测目前主要流行的美洲型的PRRSV病毒,适合用于国内PRRS疫情的防控,也能检测在欧洲地区流行的欧洲型PRRSV病毒,适合作为进出口检疫部门的主要检测手段,最低检出纯化PRRSV‑NVDC‑JXA1的浓度为0.05μg/mL,PRRSV‑DV株的浓度为0.1μg/mL,与RT‑PCR检测的一致性为100%。
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公开(公告)号:CN106701821A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201510794435.2
申请日:2015-11-13
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N7/08 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型(PCV2)双拷贝感染性克隆的病毒拯救方法及其在间接免疫荧光实验中的应用,通过采用适当的基因工程技术方法,基于临床分离得到的PCV2基因组DNA,设计特异性引物,经聚合酶链式反应(PCR)获得全长基因,将两个拷贝的PCV2全长基因以首尾相连的方式串联连到pEGFP-N1载体上,形成PCV2双拷贝全基因重组质粒,转染ST细胞后连续盲传60代,借助PCR检测方法以及间接免疫荧光实验技术(IFA)对其在ST细胞上的感染性以及病毒增殖稳定性进行鉴定,为进一步开展圆环病毒的致病机理及诊断技术研究打下基础。
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公开(公告)号:CN106701795A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201510794643.2
申请日:2015-11-13
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种猪圆环病毒2型双拷贝感染性克隆的病毒拯救方法及其在PCV2高免血清制备中的应用。通过采用适当的基因工程技术方法,基于临床分离得到的PCV2基因组DNA,设计特异性引物,经聚合酶链式反应(PCR)获得全长基因,将两个拷贝的PCV2全长基因以首尾相连的方式串联连到pEGFP-N1载体上,形成PCV2双拷贝全基因重组质粒,转染ST细胞后连续盲传60代,借助PCR检测方法以及间接免疫荧光实验技术(IFA)对其在ST细胞上的感染性以及病毒增殖稳定性进行鉴定,为进一步研究圆环病毒的致病机理及诊断技术奠定基础。
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公开(公告)号:CN118126928A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410135283.4
申请日:2024-01-31
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种贴壁细胞的微载体培养方法,将贴壁细胞、微载体混合后在转瓶中进行流动贴壁培养、半流动半悬浮培养或流动悬浮培养;采用转瓶进行流动贴壁培养的转速小于采用转瓶进行半流动半悬浮培养的转速;采用转瓶进行半流动半悬浮培养的转速小于采用转瓶进行流动悬浮培养。该方法利用本发明的微载体培养方法进行微载体流动贴壁培养、半悬浮半流动培养或流动悬浮培养,培养方式异于目前通用的悬浮培养和半悬浮半停歇培养,是微载体培养工艺上的一个创新发明,培养时剪切力低,对细胞损伤小,培养的效果佳。且使用的转瓶和转瓶机成本较其它方式的培养成本低。
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公开(公告)号:CN117683735B
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202410134905.1
申请日:2024-01-31
Applicant: 广东永顺生物制药股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域,公开了一种提高猪瘟疫苗产能的生产工艺,将细胞、微载体混合后在转瓶中进行流动悬浮培养,培养成微载体单层细胞后接种猪瘟病毒毒种;所述转瓶包括瓶体;所述瓶体的内壁设有多条沿内壁凸起的凸条,相邻两条凸条构成一条沿瓶体轴向延伸的凹槽;在垂直于瓶体的轴线方向上,所述瓶体的内壁的截面展开后构成一条连续起伏的曲线。该工艺采用微载体培养扩繁病毒所用的细胞,而实施该工艺的容器为适配此工艺的单独开发的转瓶,该转瓶具有多条轴向延伸的凹槽,相比传统的皱壁细胞培养转瓶、直壁细胞转瓶,由此扩繁的病毒滴度更高。
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