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公开(公告)号：CN119101660A
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202410802456.3
申请日：2024-06-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/075 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种识别高致病性血清4型禽腺病毒Hexon蛋白第188位氨基酸的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用，该细胞株2C5的保藏编号为CGMCC NO.45829，并分泌一种特异性识别高致病性血清4型禽腺病毒六邻体Hexon蛋白单克隆抗体2C5，其识别的抗原表位的氨基酸序列为Hexon蛋白GPGRNP，其中Hexon蛋白中R188氨基酸是其识别的关键氨基酸。本发明制备的单抗2C5具有高致病性FAdV‑4的特异性，能够特异性识别高致病性FAdV‑4，而与非致病性FAdV‑4和其他血清型的FAdV没有交叉反应，可作为诊断试剂应用于区分高致病性FAdV‑4和非致病性FAdV‑4。
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公开(公告)号：CN118185885A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410361207.5
申请日：2024-03-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术构建的表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其构建方法，H3N8禽流感病毒HA蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示；重组血清4型禽腺病毒，其中使用H3N8禽流感病毒HA基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因，替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸。本发明利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入H3N8禽流感病毒HA基因，成功获得了表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒，此重组病毒可作为免疫防控H3N8以及血清4型腺病毒的二联疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN113354717B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202110631147.0
申请日：2021-06-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K19/00 , C12N15/50 , C12N15/70 , C07K16/10 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原及其特异性中和抗体和应用，属于病毒免疫检测技术领域。一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，与SARS‑CoV‑2人阳性血清的反应，能够特异性与新冠病毒抗体结合。基于本发明的多肽序列，利用PCR、原核表达及蛋白纯化技术，制备了三重SARS‑CoV‑2广谱多肽串联融合蛋白，模拟SARS‑CoV‑2S蛋白自然状态下三聚体模式，以该融合蛋白作为抗原免疫小鼠，可以产生抗SARS‑CoV‑2特异性中和抗体，所述中和抗体在SARS‑CoV‑2抗感染治疗、疫苗研发和检测试剂盒研制中将具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113201561A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110497755.7
申请日：2021-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及到一种精确敲除鸡NHE1基因W38位氨基酸的细胞系构建方法，本发明的原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向鸡NHE1基因W38位氨基酸的sgRNA，之后转染带有sgRNA和Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒，利用CRISPR‑Cas9系统达到基因位点的精确敲除，通过药物筛选及亚克隆的方法获得单克隆细胞株，从而获得鸡源NHE1基因W38位敲除的细胞系。
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公开(公告)号：CN110615839A
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201910987165.5
申请日：2019-10-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物医学技术领域，具体涉及一种鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体及其制备方法和应用。通过PCR方法小鼠特异性的Fab与鸡Fc片段拼接并克隆入哺乳动物表达载体中，获得表达重组重链的质粒。两质粒共转染哺乳动物细胞，即可获得分泌表达的鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体。本发明可广泛用于抗病毒、细菌单克隆抗体的鸡源化表达，获得的鸡源化抗禽流感神经氨酸酶单克隆抗体既能够保持Fab识别、中和抗原的能力，又具备在体内呈递抗原的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105973854B
公开(公告)日：2018-10-23
申请号：CN201610327763.6
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号：CN106018780B
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201610327488.8
申请日：2016-05-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞，FITC标记的羊抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性；该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查，而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平，用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号：CN104450695B
公开(公告)日：2017-08-25
申请号：CN201410704520.0
申请日：2014-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法，具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法，用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体，然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆，并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程，解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。
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公开(公告)号：CN106399347A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610838066.7
申请日：2016-09-21
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明涉及一种GyV5新型环形病毒VP3蛋白的制备方法。该方法以pGEX-6p-1质粒以及GyV5病毒VP3基因为模板，PCR分别扩增出含pGEX-6p-1线性化载体以及GyV5病毒VP3基因片段，并利用重组酶ExnaseTM II进行快速重组克隆；阳性克隆转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达。本发明可直接提供VP3蛋白作为GyV5诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV5血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白。
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公开(公告)号：CN106318963A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201610837858.2
申请日：2016-09-21
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明涉及一种GyV6新型环形病毒VP3蛋白的制备方法。该方法是以pGEX-6p-1质粒以及GyV6病毒VP3基因为模板，PCR分别扩增出含pGEX-6p-1线性化载体以及GyV6病毒VP3基因片段，并利用重组酶进行快速重组克隆；阳性克隆转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达。本发明可直接提供VP3蛋白作为GyV6诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV6血清学流行病学调查及VP3功能研究提供有效免疫学试剂，填补国内外空白。
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