iPSC衍生的iNK细胞中杂质细胞的检测方法

    公开(公告)号:CN119064226A

    公开(公告)日:2024-12-03

    申请号:CN202411563991.4

    申请日:2024-11-05

    Abstract: 本发明涉及iPSC衍生的iNK细胞中杂质细胞的检测方法。具体地,本发明提供了一种定量分析iPSC衍生的NK产品中杂质细胞的方法,根据单细胞测序法获得的iNK细胞分化过程中的杂质细胞种类,通过特定的荧光抗体组合建立多色流式分析方法,在一次检测中同时鉴定所有的杂质细胞类型,并能定量分析其占比。本发明的流式分析法能一次性检测出iNK细胞中的所有杂质细胞,包括肥大细胞、NKT细胞、T细胞、单核细胞和巨噬细胞,检验方法简单、成本低,检验灵敏度高,在iNK细胞的质量检测领域有应用前景。

    一种活化和扩增自然杀伤细胞的方法及其用途

    公开(公告)号:CN118703438A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202411204692.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明涉及一种活化和扩增自然杀伤细胞的方法及其用途。具体地,本发明提供了一种NK细胞激活培养的方法,采用重组蛋白MICA和MICB的组合作为激活试剂,在包被状态下对NK细胞进行激活培养。本发明的方法无血清、无滋养层细胞的加入,即可实现高效地扩增NK细胞,扩增倍数可高达800倍。本发明的培养工艺流程简单,规避高风险物料,安全性高,尤其适用于iPSC‑NK等来源的细胞。最终获得的NK细胞纯度高、杀伤活性强,可用于生产高质量的NK细胞产品。

    一种测量拟胚体的尺寸和数量的方法

    公开(公告)号:CN117538223A

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202210918261.6

    申请日:2022-08-01

    Abstract: 本发明涉及一种拟胚体的尺寸和数量的质控方法,所述方法包括如下步骤:通过iPSC/ESC获得拟胚体,早期(24‑96h内)直径大多分布在30‑300μm;取500μL不同培养时间的拟胚体悬液使用微流成像颗粒分析系统检测,生成关于拟胚体的数量、尺寸、透明度、形态等方面的数据,以便对下一步干细胞分化时间进行控制。本发明的方法可以在短时间内准确统计少量样品中拟胚体的数量、尺寸等信息,有效节省样品量和检测时间。

    一种拟胚体消化液及其在分离造血干细胞中的应用

    公开(公告)号:CN118853569B

    公开(公告)日:2025-03-04

    申请号:CN202411365082.X

    申请日:2024-09-29

    Abstract: 本发明涉及一种拟胚体消化液及其在分离造血干细胞中的应用。具体地,本发明提供了一种适用于拟胚体解离的消化液,包含胶原酶和分散酶两种成分,对拟胚体的解离或消化具有协同的效果,可在短时间内高效地将拟胚体解离成单细胞,且获得的单细胞可以保持较高的细胞活率、良好的细胞表型以及细胞类群的多样性,可用于后续研究或对目标细胞进行分选,例如得到造血干细胞。本发明还提供了消化拟胚体的方法和应用,具有广阔的应用前景。

    iPSC衍生的iNK细胞中杂质细胞的检测方法

    公开(公告)号:CN119064226B

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202411563991.4

    申请日:2024-11-05

    Abstract: 本发明涉及iPSC衍生的iNK细胞中杂质细胞的检测方法。具体地,本发明提供了一种定量分析iPSC衍生的NK产品中杂质细胞的方法,根据单细胞测序法获得的iNK细胞分化过程中的杂质细胞种类,通过特定的荧光抗体组合建立多色流式分析方法,在一次检测中同时鉴定所有的杂质细胞类型,并能定量分析其占比。本发明的流式分析法能一次性检测出iNK细胞中的所有杂质细胞,包括肥大细胞、NKT细胞、T细胞、单核细胞和巨噬细胞,检验方法简单、成本低,检验灵敏度高,在iNK细胞的质量检测领域有应用前景。

    一种高密度培养条件下提高NK细胞活率的方法

    公开(公告)号:CN119060951B

    公开(公告)日:2025-02-14

    申请号:CN202411563202.7

    申请日:2024-11-05

    Abstract: 本发明涉及一种高密度培养条件下提高NK细胞活率的方法。具体地,本发明通过在NK细胞培养体系内添加达沙替尼,可显著提高NK细胞活率,不影响细胞扩增,且细胞的冻存复苏后杀伤活性更佳。本发明的方法在不改变工艺路线情况下,解决了细胞在高密度扩增过程中NK细胞活率活性下降、冻存复苏后对肿瘤细胞杀伤活性降低等普遍存在的问题,具有操作简单、成本低,且不依赖于工艺方式等特点,在生产NK产品领域具有广泛的应用前景。

    评估工程化自然杀伤细胞的特异性杀伤能力的方法

    公开(公告)号:CN119177271A

    公开(公告)日:2024-12-24

    申请号:CN202411486277.X

    申请日:2024-10-23

    Abstract: 本发明涉及一种评估工程化自然杀伤细胞的特异性杀伤能力的方法。具体地,本发明提供了实时动态地检测免疫效应细胞杀伤能力的方法,构建了稳定表达荧光蛋白的靶细胞,通过靶细胞荧光信号消失的情况准确地反映免疫效应细胞对靶细胞实时杀伤。在本发明的体系中,可再次加入靶细胞进行连续挑战,模拟肿瘤侵袭,综合评价嵌合抗原受体的自然杀伤细胞在体外的杀伤功能。本发明的方法为免疫效应细胞尤其是工程化改造的NK细胞产品的工艺开发提供有效准确的评估,为研究NK细胞等的免疫疗效提供有效的分析支持。

    iNK细胞中iPSC的标志物及其应用

    公开(公告)号:CN118326058A

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202410773875.9

    申请日:2024-06-17

    Abstract: 本发明提供了用于在iNK细胞中筛查iPSC的标志物及其应用。具体地,本发明提供了iPSC的标志物的mRNA、cDNA或其检测试剂的用途,用于制备判断iNK产品中筛查iPSC的诊断剂或试剂盒,其中,所述iPSC的标志物选自下组:CNMD、COL4A2、NLGN4X、SLC7A3、或其组合。实验表明,使用所述iPSC的标志物作为iNK产品中存在iPSC的标记物的方法,具有高灵敏度和特异性。

    一种活化和扩增自然杀伤细胞的方法及其用途

    公开(公告)号:CN118703438B

    公开(公告)日:2025-01-14

    申请号:CN202411204692.1

    申请日:2024-08-30

    Abstract: 本发明涉及一种活化和扩增自然杀伤细胞的方法及其用途。具体地,本发明提供了一种NK细胞激活培养的方法,采用重组蛋白MICA和MICB的组合作为激活试剂,在包被状态下对NK细胞进行激活培养。本发明的方法无血清、无滋养层细胞的加入,即可实现高效地扩增NK细胞,扩增倍数可高达800倍。本发明的培养工艺流程简单,规避高风险物料,安全性高,尤其适用于iPSC‑NK等来源的细胞。最终获得的NK细胞纯度高、杀伤活性强,可用于生产高质量的NK细胞产品。

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