公开(公告)号：CN109576342B

公开(公告)日：2022-03-29

申请号：CN201811390869.6

申请日：2018-11-21

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邢曦雯 ,  王媛媛 ,  姚盛中

IPC: C12Q1/44

Abstract: 本发明公开了一种用于检测碱性磷酸酶的荧光化学方法与应用。该方法包括如下步骤：首先，设计一条3'端被磷酸化的单链DNA作为DNA探针，在ALP存在时，DNA探针的3'末端去磷酸化暴露出3'‑OH末端；然后，TdT在DNA探针的3'‑OH末端催化加成dTTPs使其延伸生成富含poly‑T序列的单链探针DNA，其与汞离子形成T‑HgII‑T结构介导的双链DNA，加入核酸染料后根据检测到的荧光强度信号与ALP的浓度绘制出检测曲线；最后将待测样品替换ALP，重复上述步骤，并将检测结果与检测曲线对照，即可计算出样品中ALP的含量。本发明方法简单方便，灵敏度高，可用于检测碱性磷酸酶或筛选碱性磷酸酶抑制剂。

公开(公告)号：CN109576342A

公开(公告)日：2019-04-05

申请号：CN201811390869.6

申请日：2018-11-21

Applicant: 暨南大学

Inventor： 邢曦雯 ,  王媛媛 ,  姚盛中 ,  刘奋勇

IPC: C12Q1/44

CPC classification number: C12Q1/44 ,  G01N2333/916

Abstract: 本发明公开了一种用于检测碱性磷酸酶的荧光化学方法与应用。该方法包括如下步骤：首先，设计一条3'端被磷酸化的单链DNA作为DNA探针，在ALP存在时，DNA探针的3'末端去磷酸化暴露出3'-OH末端；然后，TdT在DNA探针的3'-OH末端催化加成dTTPs使其延伸生成富含poly-T序列的单链探针DNA，其与汞离子形成T-HgII-T结构介导的双链DNA，加入核酸染料后根据检测到的荧光强度信号与ALP的浓度绘制出检测曲线；最后将待测样品替换ALP，重复上述步骤，并将检测结果与检测曲线对照，即可计算出样品中ALP的含量。本发明方法简单方便，灵敏度高，可用于检测碱性磷酸酶或筛选碱性磷酸酶抑制剂。