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公开(公告)号:CN108410897A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810106927.1
申请日:2018-02-02
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C12N2710/16122
Abstract: 本发明公开了一种含有人巨细胞病毒UL148基因的重组质粒、基因工程菌及其应用。该含有人巨细胞病毒UL148基因的重组质粒通过将人巨细胞病毒的包膜蛋白UL148插入大肠杆菌克隆表达载体pET32a(+)中获得;然后将该其转化入原核表达工程菌BL21(DE3)中,获得重组质粒表达菌,菌株可以表达带有组氨酸标签的融合蛋白。该人巨细胞病毒UL148基因重组质粒的工程菌可为其他HCMV的基因重组质粒的工程菌的构建提供相关实验经验,为人巨细胞病毒UL148蛋白多克隆抗体和单克隆抗体制备提供原材料,同时也为开发HCMV快速诊断试剂盒提供了研发方向,为研发亚单位疫苗打下了基础。
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公开(公告)号:CN108300729A
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201810107622.2
申请日:2018-02-02
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C07K14/005 , C07K16/088 , C12N2710/16122
Abstract: 本发明公开了一种含有人巨细胞病毒UL124基因的重组质粒、基因工程菌及其应用。该含有人巨细胞病毒UL124基因的重组质粒通过将人巨细胞病毒UL124基因插入表达质粒pET32a中获得。然后将其通过热转进入大肠杆菌中构建能表达带有组氨酸标签的融合蛋白的原核表达工程菌,该菌株可表达相应的融合蛋白。该含有人巨细胞病毒UL124基因重组质粒的基因工程菌为人巨细胞病毒UL124多克隆抗体和单克隆抗体制备提供原材料,同时也为进一步研究UL124基因的具体功能打下了基础,从而为揭示HCMV的感染和致病机制及治疗提供方向。
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公开(公告)号:CN109576342A
公开(公告)日:2019-04-05
申请号:CN201811390869.6
申请日:2018-11-21
Applicant: 暨南大学
IPC: C12Q1/44
CPC classification number: C12Q1/44 , G01N2333/916
Abstract: 本发明公开了一种用于检测碱性磷酸酶的荧光化学方法与应用。该方法包括如下步骤:首先,设计一条3'端被磷酸化的单链DNA作为DNA探针,在ALP存在时,DNA探针的3'末端去磷酸化暴露出3'-OH末端;然后,TdT在DNA探针的3'-OH末端催化加成dTTPs使其延伸生成富含poly-T序列的单链探针DNA,其与汞离子形成T-HgII-T结构介导的双链DNA,加入核酸染料后根据检测到的荧光强度信号与ALP的浓度绘制出检测曲线;最后将待测样品替换ALP,重复上述步骤,并将检测结果与检测曲线对照,即可计算出样品中ALP的含量。本发明方法简单方便,灵敏度高,可用于检测碱性磷酸酶或筛选碱性磷酸酶抑制剂。
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公开(公告)号:CN108359680A
公开(公告)日:2018-08-03
申请号:CN201810108127.3
申请日:2018-02-02
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种含有人巨细胞病毒UL146基因的重组质粒、基因工程菌及其应用。该重组质粒通过将人巨细胞病毒的UL146基因插入大肠杆菌克隆表达载体pET32a(+)中,获得重组载体pET32a(+)-UL146,然后将其转化入原核表达工程菌BL21(DE3)中,获得含有人巨细胞病毒UL146基因重组质粒的基因工程菌。利用该工程菌表达获得对应的UL146重组蛋白,该融合蛋白可用于制备针对HCMV UL146基因的抗体,且可以用于研究UL146基因的功能,为进一步研究UL146的功能及其分子机制提供了基础。
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公开(公告)号:CN108299558A
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201810108118.4
申请日:2018-02-02
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: C07K16/088 , C07K16/065 , G01N33/56983 , G01N2333/045
Abstract: 本发明公开了一种人巨细胞病毒anti-pUL146多克隆抗体及其制备方法与应用。该人巨细胞病毒anti-pUL146多克隆抗体以UL146重组蛋白为抗原对兔子进行免疫得到血清,然后将血清经过纯化处理后获得。本发明中制备的anti-pUL146多克隆抗体纯度高、产量大,特异性强且经济实惠,为研究HCMV感染机制打下了坚实的基础。本发明中通过硫酸铵沉淀法初步提纯和亲和层析法的进一步提纯,得到高纯度的多克隆抗体,经ELISA测效价,其效价>105。本发明中的人巨细胞病毒anti-pUL146多克隆抗体对于HCMV诊断试剂盒、HCMV相关蛋白检测试剂盒等的开发及探索UL146蛋白生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN109536577A
公开(公告)日:2019-03-29
申请号:CN201811391599.0
申请日:2018-11-21
Applicant: 暨南大学
IPC: C12Q1/48
CPC classification number: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种末端脱氧核酸酶活力的测定方法与应用。该方法包括如下步骤:(1)设计一条单链DNA作为DNA探针;(2)将不同终浓度的TdT分别与DNA探针、CoCl2、dTTPs以及缓冲溶液进行孵育,得到富含poly-T序列的单链探针DNA溶液;然后加入汞盐进行孵育,得到T-HgII-T结构介导的双链DNA溶液;再加入核酸染料,得到混合溶液;最后检测混合溶液的荧光强度信号,并根据荧光强度信号与TdT的终浓度绘制检测曲线;(5)将待测样品替换TdT,重复上述步骤,然后将检测结果与检测曲线对照,计算出待测样品中TdT的含量。该方法具有高灵敏度和良好的选择性,为医学检测和生物学研究提供了新的手段。
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