完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104186460B

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201410387213.4

    申请日:2014-08-07

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法是在正常生长的细胞培养液中加入翻译延伸抑制剂,待翻译延伸抑制剂有效作用于RNC,抑制翻译延伸的进行后,将细胞冷却至0~4℃,再用预冷至0~4℃的PBS溶液清洗细胞以及加入细胞中,液氮中快速冷冻,超低温保存,于冰上解冻,再抽提RNC。本发明通过采用翻译延伸抑制剂有效固定核糖体,使之不易解离,将细胞内的翻译状况固定下来;再通过液氮急冻方法有效地冷冻保存RNC长期储存和运输,并且解冻后所提取的RNC与新鲜细胞提取的RNC无异,因此本发明突破了时间和空间的限制,为研究RNC及开展RNC商业服务提供了便利。

    完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104262478A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410452522.5

    申请日:2014-09-05

    Applicant: 暨南大学

    CPC classification number: C07K14/47

    Abstract: 本发明公开一种完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法为:使用0~4℃的含翻译延伸抑制剂和镁离子的等渗盐溶液清洗新鲜的组织;将清洗干净的组织中的多余液体去除,然后用液氮进行快速冷冻处理,冷冻至组织的温度稳定;将快速冷冻处理好的组织置于不高于-80℃的环境下保存,在该条件下,能进行储存和运输;对保存的组织样品提取RNC,得到组织内核糖体新生肽链复合物。本发明能够进行组织内RNC长期储存和运输,有效地获取组织样品的RNC;而且突破了时间和空间的限制,为进一步研究RNC以及RNC的商业化服务提供了便利。

    一种基于尺寸排阻层析与超滤结合的细胞外囊泡分离方法

    公开(公告)号:CN111961637A

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN202010649797.3

    申请日:2020-07-08

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种小细胞外囊泡分离方法,优化了尺寸排阻层析使用的固定相填料,并与超滤法结合作为sEVs的分离方法,克服了现有小细胞外囊泡分离方法中分离过程耗时长、需要专有设备、存在高丰度蛋白质污染、引入其他杂质、产物(sEVs)浓度较低的技术不足。本发明方法不需要采用复杂的仪器设备,大大降低了实验成本,具有更好的普及推广的意义。

    CA2在鼻咽癌中的检测、治疗的应用

    公开(公告)号:CN106546740B

    公开(公告)日:2019-04-09

    申请号:CN201610968723.X

    申请日:2016-10-27

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 王通 罗彦彰 张涛

    Abstract: 本发明公开了一种CA2定量试剂在制备鼻咽癌诊断试剂中的应用。并且公开了CA2在鼻咽癌中的表达量有明显的上升的特点,这说明CA2具有成为鼻咽癌辅助诊断标记物的潜能。同时也说明了,CA2抑制剂在制备治疗鼻咽癌的药物组合物上极具临床应用价值,为鼻咽癌的有效治疗提供了新的思路。

    完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104262478B

    公开(公告)日:2017-04-12

    申请号:CN201410452522.5

    申请日:2014-09-05

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法为:使用0~4℃的含翻译延伸抑制剂和镁离子的等渗盐溶液清洗新鲜的组织;将清洗干净的组织中的多余液体去除,然后用液氮进行快速冷冻处理,冷冻至组织的温度稳定;将快速冷冻处理好的组织置于不高于‑80℃的环境下保存,在该条件下,能进行储存和运输;对保存的组织样品提取RNC,得到组织内核糖体新生肽链复合物。本发明能够进行组织内RNC长期储存和运输,有效地获取组织样品的RNC;而且突破了时间和空间的限制,为进一步研究RNC以及RNC的商业化服务提供了便利。

    抗IgM抗体偶联琼脂糖微球在纯化细胞外囊泡中的应用

    公开(公告)号:CN117660291A

    公开(公告)日:2024-03-08

    申请号:CN202311548695.2

    申请日:2023-11-17

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了抗IgM抗体偶联琼脂糖微球在纯化细胞外囊泡中的应用;抗IgM微球可特异性地结合并去除EV产物中残留的高丰度IgM颗粒污染物,可降低产物总蛋白量的44.7%,且对其中的EV不产生负面影响,有效提高EV纯度;添加抗IgM微球的SEC柱同步实现EV的分离与纯化,将体液标本内包括IgM在内的游离蛋白质截留,通过一步洗脱即可获得高纯度EV。本发明是一种简便的EV纯化/分离技术,作为纯化手段时,可与各种常规EV分离技术兼容,有效缓解血清等标本内丰度极高的IgM颗粒对样品的污染;作为分离技术时,可摆脱专用大型设备的限制,在常规检验实验室等场所从各种生物体液样本中获取高纯度EV。

    用于HBV miR-3荧光定量PCR检测的材料及方法

    公开(公告)号:CN108300804A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201810014502.8

    申请日:2018-01-08

    Inventor: 王通

    Abstract: 本发明公开了一种用于HBV miR-3荧光定量PCR检测的材料及方法,材料中包括逆转录引物、qPCR前引物、qPCR后引物和特异性荧光探针,其中逆转录引物序列为:GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAACGC;qPCR前引物序列为:TACAACCTGGATGTGTCTGCG;qPCR后引物序列为:CCAGTGCAGGGTCCGAGGTA;特异性荧光探针序列为:荧光基团-CGTTTGTCGTATCCAGT-淬灭基团。经验证表明使用本发明中的引物和特异性荧光探针结合本发明中提供的方法,可以实现HBV miR-3的高特异性的定量检测。

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