完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104186460B

    公开(公告)日:2016-05-25

    申请号:CN201410387213.4

    申请日:2014-08-07

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种完整冷冻保存及解冻细胞内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法是在正常生长的细胞培养液中加入翻译延伸抑制剂,待翻译延伸抑制剂有效作用于RNC,抑制翻译延伸的进行后,将细胞冷却至0~4℃,再用预冷至0~4℃的PBS溶液清洗细胞以及加入细胞中,液氮中快速冷冻,超低温保存,于冰上解冻,再抽提RNC。本发明通过采用翻译延伸抑制剂有效固定核糖体,使之不易解离,将细胞内的翻译状况固定下来;再通过液氮急冻方法有效地冷冻保存RNC长期储存和运输,并且解冻后所提取的RNC与新鲜细胞提取的RNC无异,因此本发明突破了时间和空间的限制,为研究RNC及开展RNC商业服务提供了便利。

    通过翻译暂停序列理性重设计改善蛋白质可溶性表达的方法

    公开(公告)号:CN103266105B

    公开(公告)日:2015-02-11

    申请号:CN201310164454.8

    申请日:2013-05-07

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种通过翻译暂停序列理性重设计改善蛋白质可溶性表达的方法。该方法包括如下步骤:根据蛋白质结构,确定翻译暂停位点应存在的位置;将翻译暂停范围外的缓慢翻译密码子突变为氨基酸相同的高频密码子;在翻译暂停范围内按照选择2~6个密码子进行同义突变,产生翻译暂停位点。该方法是在不改变蛋白质氨基酸序列的前提下,重新设计编码蛋白质的核苷酸序列,增强其可溶性表达的效率。适用性广,前景潜力大。

    完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104262478A

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201410452522.5

    申请日:2014-09-05

    Applicant: 暨南大学

    CPC classification number: C07K14/47

    Abstract: 本发明公开一种完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法为:使用0~4℃的含翻译延伸抑制剂和镁离子的等渗盐溶液清洗新鲜的组织;将清洗干净的组织中的多余液体去除,然后用液氮进行快速冷冻处理,冷冻至组织的温度稳定;将快速冷冻处理好的组织置于不高于-80℃的环境下保存,在该条件下,能进行储存和运输;对保存的组织样品提取RNC,得到组织内核糖体新生肽链复合物。本发明能够进行组织内RNC长期储存和运输,有效地获取组织样品的RNC;而且突破了时间和空间的限制,为进一步研究RNC以及RNC的商业化服务提供了便利。

    完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用

    公开(公告)号:CN104961813B

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201510332732.5

    申请日:2015-06-16

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 赵晶 张弓

    Abstract: 本发明公开一种完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用。该方法的步骤为:用水将新鲜的植物组织清洗干净,用液氮速冻处理至植物组织的温度低于‑80℃,后提取RNC;或是将液氮速冻的植物组织存储于不高于‑80℃的环境,在该条件下进行稳定的储存、运输后再提取RNC;提取RNC的步骤为:加液氮对植物组织进行研磨,得到粉末;保持在液氮环境下往粉末中加入预冷的细胞裂解液,研磨混匀;置于冰上等待融化后进行裂解反应;离心,取上清进行RNC的提取,得到RNC。该方法可方便有效地获取植物组织样品的RNC;且满足RNC样品的长期储存与运输的需要,便于分析基因功能。

    完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法

    公开(公告)号:CN104262478B

    公开(公告)日:2017-04-12

    申请号:CN201410452522.5

    申请日:2014-09-05

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法。该方法为:使用0~4℃的含翻译延伸抑制剂和镁离子的等渗盐溶液清洗新鲜的组织;将清洗干净的组织中的多余液体去除,然后用液氮进行快速冷冻处理,冷冻至组织的温度稳定;将快速冷冻处理好的组织置于不高于‑80℃的环境下保存,在该条件下,能进行储存和运输;对保存的组织样品提取RNC,得到组织内核糖体新生肽链复合物。本发明能够进行组织内RNC长期储存和运输,有效地获取组织样品的RNC;而且突破了时间和空间的限制,为进一步研究RNC以及RNC的商业化服务提供了便利。

    完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用

    公开(公告)号:CN104961813A

    公开(公告)日:2015-10-07

    申请号:CN201510332732.5

    申请日:2015-06-16

    Applicant: 暨南大学

    Inventor: 赵晶 张弓

    CPC classification number: C07K14/415

    Abstract: 本发明公开一种完整获取植物组织中核糖体新生肽链复合物的方法与应用。该方法的步骤为:用水将新鲜的植物组织清洗干净,用液氮速冻处理至植物组织的温度低于-80℃,后提取RNC;或是将液氮速冻的植物组织存储于不高于-80℃的环境,在该条件下进行稳定的储存、运输后再提取RNC;提取RNC的步骤为:加液氮对植物组织进行研磨,得到粉末;保持在液氮环境下往粉末中加入预冷的细胞裂解液,研磨混匀;置于冰上等待融化后进行裂解反应;离心,取上清进行RNC的提取,得到RNC。该方法可方便有效地获取植物组织样品的RNC;且满足RNC样品的长期储存与运输的需要,便于分析基因功能。

    一种抑制人USP46基因表达的siRNA和脂质体及其应用

    公开(公告)号:CN116855497A

    公开(公告)日:2023-10-10

    申请号:CN202310837371.4

    申请日:2023-07-10

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明提供了一种抑制人USP46基因表达的siRNA和脂质体及其应用。本发明合成的siRNA具有比较高的稳定性,能很好地抑制USP46基因的表达,可特异作用于USP46基因,通过纳米脂质体包封递送系统,将合成的siRNA递送进入细胞,使其能与细胞质中USP46基因的mRNA序列,通过碱基互补配对方式相互结合,抑制USP46蛋白的表达,进而抑制细胞的生长。该siRNA可以被纳米脂质体包封递送进入乳腺癌细胞,并抑制其生长,可应用于乳腺癌的治疗。

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