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公开(公告)号：CN103060450A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310007487.1
申请日：2013-01-09
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用哌啶水溶液检测DNA中5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的方法。用哌啶特异性地与带荧光标记DNA中的5-醛基胞嘧啶反应，可以检测出5-醛基胞嘧啶；而通过高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5-醛基胞嘧啶后哌啶处理，通过比较DNA聚丙烯酰胺变性胶中两个反应的DNA带可以得到5-羟甲基胞嘧啶的位置和个数。本方法可以快速、有效和灵敏地实现5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的检测。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN105154558A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510605864.0
申请日：2015-09-22
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2531/107 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明公开了一种检测DNA中甲基化胞嘧啶的方法。具体检测方法如下：将DNA链用亚硫酸氢钠进行处理，将DNA上不含甲基的胞嘧啶变为尿嘧啶；然后以亚硫酸氢钠处理后的DNA链为模板链，利用不对称PCR扩增出与模板链互补的DNA链；与模板链互补的DNA链先用钨酸钾-过氧化氢混合液处理，将非双链区域的鸟嘌呤氧化损伤；再用哌啶进行热处理，使氧化损伤的鸟嘌呤的位置特异性断裂；将DNA链用冰乙醇沉淀旋干后上样至电泳槽，通过聚丙烯酰胺变性胶中DNA条带对应的鸟嘌呤的位置确定甲基化胞嘧啶的位置和个数；甲基化胞嘧啶为5-甲基胞嘧啶和/或5-羟甲基胞嘧啶。
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公开(公告)号：CN105087816A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510611999.8
申请日：2015-09-22
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: G01N27/447
Abstract: 本发明提供一种检测核酸中5-甲基胞嘧啶的方法，具体检测方法如下：将带荧光标记的核酸链先用亚硫酸氢钠处理，核酸链上的胞嘧啶将全部变为尿嘧啶，而5-甲基胞嘧啶则不受影响，再用化合物1可以特异性地与5-甲基胞嘧啶反应，而不与尿嘧啶、胸腺嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤反应；由于热哌啶可以将核酸中损伤后的碱基位置打断，故与化合物1反应后的核酸链用热哌啶处理后，通过聚丙烯酰胺变性胶的核酸条带可以清楚的看到5-甲基胞嘧啶的位置和个数；化合物1的结构式为。
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公开(公告)号：CN105154558B
公开(公告)日：2018-10-09
申请号：CN201510605864.0
申请日：2015-09-22
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种检测DNA中甲基化胞嘧啶的方法。具体检测方法如下：将DNA链用亚硫酸氢钠进行处理，将DNA上不含甲基的胞嘧啶变为尿嘧啶；然后以亚硫酸氢钠处理后的DNA链为模板链，利用不对称PCR扩增出与模板链互补的DNA链；与模板链互补的DNA链先用钨酸钾‑过氧化氢混合液处理，将非双链区域的鸟嘌呤氧化损伤；再用哌啶进行热处理，使氧化损伤的鸟嘌呤的位置特异性断裂；将DNA链用冰乙醇沉淀旋干后上样至电泳槽，通过聚丙烯酰胺变性胶中DNA条带对应的鸟嘌呤的位置确定甲基化胞嘧啶的位置和个数；甲基化胞嘧啶为5‑甲基胞嘧啶和/或5‑羟甲基胞嘧啶。
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公开(公告)号：CN103060450B
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201310007487.1
申请日：2013-01-09
Applicant: 武汉大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用哌啶水溶液检测DNA中5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的方法。用哌啶特异性地与带荧光标记DNA中的5-醛基胞嘧啶反应，可以检测出5-醛基胞嘧啶；而通过高钌酸钾将DNA中的5-羟甲基胞嘧啶氧化成5-醛基胞嘧啶后哌啶处理，通过比较DNA聚丙烯酰胺变性胶中两个反应的DNA带可以得到5-羟甲基胞嘧啶的位置和个数。本方法可以快速、有效和灵敏地实现5-醛基胞嘧啶和5-羟甲基胞嘧啶的检测。
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