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公开(公告)号：CN117165535A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202310983643.1
申请日：2023-08-07
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种基于悬浮型ST细胞培养猪乙型脑炎病毒的工艺方法，该方法的核心是利用生物反应器大规模悬浮培养ST细胞并接种猪乙型脑炎病毒，通过控制ST细胞培养和病毒接毒培养工艺条件，从而获得高滴度的猪乙型脑炎病毒液，经澄清处理后冻干制备猪乙型脑炎病毒活疫苗。纯悬浮工艺克服了目前地鼠肾转瓶生产工艺繁琐、抗原含量低、效力低、批间差大、成本高等难题。
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公开(公告)号：CN107365362A
公开(公告)日：2017-11-21
申请号：CN201710537620.2
申请日：2017-07-04
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
CPC classification number: C07K14/005 , C12N2750/10051
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种大规模生产高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的方法。所述方法包括：取猪圆环病毒ORF2蛋白培养液，加入少量壳聚糖摇匀后自然沉降，吸取上清利用中空纤维柱澄清过滤，再利用离子交换柱进行离子交换，洗脱液经G25层析柱脱盐、除菌过滤后，即得高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白液。本发明通过化学试剂沉降，澄清过滤，离子交换，层析柱脱盐等工艺，实现了大规模(500L～1000L)高效生产制备高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白，高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的回收率可达99.46％，杂蛋白去除率高达98.04％，有效抗原含量高达93.2％。
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公开(公告)号：CN110628730B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201910880084.5
申请日：2019-09-16
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP蛋白的重组猪伪狂犬病病毒及应用。本发明利用Crispr/Cas9基因编辑技术和Cre/lox重组系统快速编辑PRV病毒株基因组，将其毒力基因gE、gI和TK定点缺失，并在gG位置定点插入NADC30‑like株的抗原基因。本发明首次选用流行PRRSV毒株PRRSV NADC30‑like的GP3、GP4、GP5和GP6蛋白的非跨膜区域编码序列作为抗原基因，抗原种类更加全面，对当前PRRSV疫情有更强的针对性，且免疫保护效果更强。本发明提供的活疫苗能够更有针对性地保护靶动物不受PRV和PRRSV的侵害，为我国猪伪狂犬病和蓝耳病的疫情防控提供有力工具。
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公开(公告)号：CN111471658A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010301122.X
申请日：2020-04-16
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
IPC: C12N7/02 , A61K39/215 , A61K39/225 , A61K39/295 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种病毒纯化方法及经由该方法制备得到的二联灭活疫苗，所述病毒纯化方法为将所述病毒的病毒液进行离心、过滤得到上清液作为待浓缩样品；将所述待浓缩样品通过100KD膜包进行浓缩，获得病毒浓缩液；将所述病毒浓缩液利用4FF凝胶层析柱进行纯化得到纯化后的病毒液。本申请通过膜包超滤浓缩纯化处理联合4FF凝胶层析对病毒液进行纯化，得到高纯度的猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒，杂蛋白去除率达到91％，有效抗原含量达到95％。将纯化后的病毒配以201佐剂制备得到的二联疫苗接种仔猪后体温波动显著降低，同时，免疫28天后抗体效价相较于纯化前分别提升69.5％和139％，有效提高安全性和免疫效果。
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公开(公告)号：CN110628730A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910880084.5
申请日：2019-09-16
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP蛋白的重组猪伪狂犬病病毒及应用。本发明利用Crispr/Cas9基因编辑技术和Cre/lox重组系统快速编辑PRV病毒株基因组，将其毒力基因gE、gI和TK定点缺失，并在gG位置定点插入NADC30-like株的抗原基因。本发明首次选用流行PRRSV毒株PRRSV NADC30-like的GP3、GP4、GP5和GP6蛋白的非跨膜区域编码序列作为抗原基因，抗原种类更加全面，对当前PRRSV疫情有更强的针对性，且免疫保护效果更强。本发明提供的活疫苗能够更有针对性地保护靶动物不受PRV和PRRSV的侵害，为我国猪伪狂犬病和蓝耳病的疫情防控提供有力工具。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110339351B
公开(公告)日：2023-02-14
申请号：CN201910778860.0
申请日：2019-08-22
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明提供一种兽用狂犬病灭活疫苗的制备方法及该疫苗包含的稳定剂，制备方法中病毒浓缩流程为：(1)病毒上清液经以0.8～1L/min流速持续透过300KD膜包，体积浓缩至原体积的1/50～1/40得粗浓缩液；(2)向粗浓缩液中加入10～15倍体积的PBS溶液，在浓缩压力为0.5～1.0bar，流速为1.8～2L/min的条件下透过300KD膜包，体积浓缩至透过前的1/4～2/5时调整流速为0.8～1L/min，持续浓缩至所述粗浓缩液原体积。本发明通过优化病毒浓缩流程，针对不同抗原浓度采用不同的膜透过流速，在浓缩过程即可去除30～50％杂蛋白，同时毒价维持在90％以上，制成的疫苗更加稳定、高效。
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公开(公告)号：CN109010814B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN201811015221.0
申请日：2018-08-31
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
IPC: A61K39/102 , A61K39/02 , A61P31/04 , C12N1/20 , C12R1/35
Abstract: 本发明属于疫苗生产技术领域，具体公开了副猪嗜血杆菌和猪肺炎支原体二联灭活疫苗的生产方法。本发明利用生物反应器进行猪肺炎支原体的发酵培养，利用发酵罐进行血清4型副猪嗜血杆菌和血清5型副猪嗜血杆菌的发酵培养；将发酵培养后的菌液灭活、浓缩、纯化，再按一定比例混合，并加入免疫增强剂和疫苗佐剂，得到副猪嗜血杆菌和猪肺炎支原体二联灭活疫苗。本发明生产的疫苗组合物具有特异性强、免疫性好的特点，可起到一针防二种疾病的目的，该技术方案更加经济实用，避免多次接种，节约了疫苗成本和人工成本，特别适用于预防和治疗混合感染病症的养殖场。
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公开(公告)号：CN107254449A
公开(公告)日：2017-10-17
申请号：CN201710537281.8
申请日：2017-07-04
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
IPC: C12N7/00
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2710/16751
Abstract: 本发明属于疫苗技术领域，具体涉及一种大规模生产高纯度猪伪狂犬病毒的方法。所述方法采用了连续流离心、中空纤维澄清过滤、超滤浓缩、分子筛纯化工艺，最大限度的增加了病毒的回收率，降低了杂蛋白的含量。本发明制备的猪伪狂犬病毒浓缩液、纯化抗原尤其适用于制备疫苗，相较于现有技术生产的猪伪狂犬病灭活疫苗而言，安全性更高，均一性更好，免疫效果更好，从根本上减少了疫苗的副反应。
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公开(公告)号：CN112795530A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110190109.6
申请日：2021-02-18
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明涉及兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种培养犬瘟热病毒和犬细小病毒的方法。所述方法包括以Vero细胞作为犬瘟热病毒的宿主，以F81细胞作为犬细小病毒的宿主，通过生物反应器进行培养；所述生物反应器中载体为片状载体。本发明通过生物反应器进行犬瘟热病毒和犬细小病毒的培养，以Vero细胞作为犬瘟热病毒的宿主，以F81细胞作为犬细小病毒的宿主在片状载体上进行培养，生产得到的犬瘟热病毒和犬细小病毒滴度高，批间差异小，产品质量稳定。
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公开(公告)号：CN107365362B
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN201710537620.2
申请日：2017-07-04
Applicant: 武汉科前生物股份有限公司
Abstract: 本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种大规模生产高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的方法。所述方法包括：取猪圆环病毒ORF2蛋白培养液，加入少量壳聚糖摇匀后自然沉降，吸取上清利用中空纤维柱澄清过滤，再利用离子交换柱进行离子交换，洗脱液经G25层析柱脱盐、除菌过滤后，即得高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白液。本发明通过化学试剂沉降，澄清过滤，离子交换，层析柱脱盐等工艺，实现了大规模(500L～1000L)高效生产制备高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白，高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的回收率可达99.46％，杂蛋白去除率高达98.04％，有效抗原含量高达93.2％。
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