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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103173429A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310076338.0
申请日：2013-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的重组胰蛋白酶，属于酶工程领域。本发明通过融合PCR技术，在胰蛋白酶上融合有前导肽序列，其中优选YVEF。获得了在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶。解决了胰蛋白酶热稳定性差的问题。该重组胰蛋白酶生产工艺简单、便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN103173367A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310076829.5
申请日：2013-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产热稳定性重组胰蛋白酶的酵母工程菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明通过将体外扩增所得的胰蛋白酶基因融合前导短肽YVEF，并将其整合连接到毕赤酵母GS115（Pichia pastoris）染色体上，构建了一株高效分泌表达重组胰蛋白酶的价目工程菌，纯化后得到热稳定提高的重组胰蛋白酶，在40℃、50℃和60℃下，热稳定性分别比野生胰蛋白酶提高了1.77,2.6和31倍的重组胰蛋白酶，解决了胰蛋白酶热稳定性低的问题。应用该菌种生产胰蛋白酶，产量相对较高、工艺相对简单、所使用工程菌株遗传及应用背景清晰，便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN102851270A
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201210275348.2
申请日：2012-08-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种获得杂交链霉菌胰蛋白酶酶原及其及其在产活性链霉菌胰蛋白酶中的应用，通过将体外所得的胰蛋白酶酶原基因连接到毕赤酵母GS115（Pichia pastoris）染色体上，构建了一株高效分泌表达杂交胰蛋白酶酶原的基因工程菌，发酵3～4天后，可得到杂交胰蛋白酶酶原的表达(图3(A)，解决了基础研究中获得杂交灰色链霉菌胰蛋白酶酶原的问题。并且通过肠激酶切割活化得到具有活性的链霉菌胰蛋白酶，活化后酰胺酶活力可达到1.4U/ml(图3(B))。应用该菌种生产杂交胰蛋白酶酶原，产量高、工艺简单、便于基础研究中胰蛋白酶酶原晶体结构的研究和应用，并且提供了一种通过活化杂交胰蛋白酶酶原获得活性链霉菌胰蛋白酶的方法。
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公开(公告)号：CN104328103A
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201410614186.X
申请日：2014-11-04
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/6427 , C12Y304/21004
Abstract: 本发明公开了一种高产胰蛋白酶的酵母工程菌及其构建方法，属于基因工程领域。本发明构建的酵母工程菌，表达前端融合了硫氧还蛋白的胰蛋白酶，且在硫氧还蛋白与胰蛋白酶之间插入四个天冬氨酸和赖氨酸(D4K)。本发明的酵母工程菌，其胰蛋白酶酰胺酶酶活(BAPNA)47.4U/mL、酯酶酶活(BAEE)2667U/mL，解决了胰蛋白酶原活化、产量低的问题。应用该菌种生产胰蛋白酶，具有产量高、工艺简化、便于工业化应用的优点。
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公开(公告)号：CN102094040A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201010580906.7
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产类胰蛋白酶的基因工程菌及其构建方法与应用，属于遗传工程领域。本发明通过将体外扩增所得的类胰蛋白酶基因连接到毕赤酵母GS115（Pichiapastoris）染色体上，构建了一株高效分泌表达类胰蛋白酶的基因工程菌，发酵3～4天后，得到0.5U/mL的酶活，解决了类胰蛋白酶产量低的问题。应用该菌种生产类胰蛋白酶，产量高、工艺简单、便于工业化应用。
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