-
公开(公告)号:CN112746061A
公开(公告)日:2021-05-04
申请号:CN202110203953.8
申请日:2021-02-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过组合突变设计出最佳突变体,对PvDAPDH的蛋白质进行改造,克服了之前野生型的酶因为活性低而导致的转化率低的局限,最终得到最佳突变体L7(PvDAPDHW121A/H227I/R180S),其酶活为野生型的85倍;将该突变体L7进一步与L‑氨基酸脱氨酶(PmLAAD)和葡萄糖脱氢酶(BmGDH)级联,以L‑苯丙氨酸为底物,D‑苯丙氨酸产量达到48.5g/L,因此大大降低了之前的高菌体量以及昂贵的底物成本,为D‑苯丙氨酸的工业化生产奠定了基础。