公开(公告)号：CN115786320A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211651602.4

申请日：2022-12-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  胥睿睿 ,  汪培林 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C12N11/02 ,  C12N9/14 ,  C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12P19/32

Abstract: 本发明公开了一种基于自组装策略构建固定化酶合成磺酸基供体PAPS的方法，属于生物技术领域。本发明提供一种利用聚集蛋白自组装PAPS合成双功能酶和ADP磷酸化酶，实现酶的固定化用以合成PAPS。通过进一步对linker进行理性设计和改造，大大提高了转化效率。本发明通过自组装肽同时实现PAPS合成双功能酶和ADP磷酸化酶的共固定化，直接破壁添加离心沉淀，实现一步法合成PAPS。固定化PAPS合成双功能酶在循环利用十次后仍具有45％的ATP转化率，约为第一次使用的50％。该方法简化了酶的分离纯化步骤，提高了酶的利用效率，大幅降低了工业化PAPS生产的成本。