公开(公告)号：CN115851468A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202210842628.0

申请日：2022-07-18

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  吕雪芹 ,  邓梦婷

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及一种生产人酪蛋白巨肽的重组毕赤酵母及其应用，在毕赤酵母菌株中高拷贝表达人酪蛋白巨肽基因，实现人酪蛋白巨肽的分泌表达。本发明通过构建的重组毕赤酵母生产的产物中，杂蛋白含量低，便于后续纯化，摇瓶产量即高达234mg/L，该过程无需融合表达，且发酵上清液杂蛋白少，目的蛋白的分泌表达量占毕赤酵母总分泌蛋白的93％，这为毕赤酵母代谢工程高效生产母乳蛋白奠定了基础。

公开(公告)号：CN114292324B

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202111670064.9

申请日：2021-12-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  刘龙 ,  邓梦婷 ,  吕雪芹 ,  李江华 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C07K14/76 ,  C12N9/02 ,  C12N9/90 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及一种共表达分子伴侣蛋白生产α‑乳白蛋白的菌株及其应用，该菌株表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的人α‑乳白蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的α‑factor信号肽和分子伴侣蛋白，分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ERO1、Atf/CREB1同源蛋白HAC1、重连结合蛋白BIP、内质网到高尔基体的转运因子ERV29、毕赤酵母二硫键异构酶PpPDI、人二硫键异构酶A1hPDIA1、人二硫键异构酶A3hPDIA3、人二硫键异构酶A4hPDIA4、人二硫键异构酶A5hPDIA5和人二硫键异构酶A6hPDIA6中的一种，优选分子伴侣人二硫键异构酶A3hPDIA3。本发明的菌株实现了α‑乳白蛋白产量的提高，摇瓶发

公开(公告)号：CN114292324A

公开(公告)日：2022-04-08

申请号：CN202111670064.9

申请日：2021-12-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  刘龙 ,  邓梦婷 ,  吕雪芹 ,  李江华 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C07K14/76 ,  C12N9/02 ,  C12N9/90 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及一种共表达分子伴侣蛋白生产α‑乳白蛋白的菌株及其应用，该菌株表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的人α‑乳白蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的α‑factor信号肽和分子伴侣蛋白，分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ERO1、Atf/CREB1同源蛋白HAC1、重连结合蛋白BIP、内质网到高尔基体的转运因子ERV29、毕赤酵母二硫键异构酶PpPDI、人二硫键异构酶A1hPDIA1、人二硫键异构酶A3hPDIA3、人二硫键异构酶A4hPDIA4、人二硫键异构酶A5hPDIA5和人二硫键异构酶A6hPDIA6中的一种，优选分子伴侣人二硫键异构酶A3hPDIA3。本发明的菌株实现了α‑乳白蛋白产量的提高，摇瓶发酵产量达到6.0mg/L，在3L发酵罐发酵后，α‑乳白蛋白最高产量为56.3mg/L。

公开(公告)号：CN113481115A

公开(公告)日：2021-10-08

申请号：CN202110764084.6

申请日：2021-07-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  刘龙 ,  邓梦婷 ,  吕雪芹 ,  李江华 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C07K14/76 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种表达人α‑乳白蛋白的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用，本发明的重组毕赤酵母菌在毕赤酵母宿主菌中，异源表达了人α‑乳白蛋白，并在人α‑乳白蛋白基因前插入α‑factor信号肽。本发明的重组毕赤酵母菌以α‑factor信号肽在毕赤酵母中成功外泌表达人α‑乳白蛋白，人α‑乳白蛋白的胞外产量达到5mg/L。