公开(公告)号：CN114196782B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202210014338.7

申请日：2022-01-04

Applicant: 江汉大学

Inventor： 张静 ,  彭海 ,  肖华锋 ,  李论 ,  方治伟 ,  陈利红 ,  李甜甜 ,  高利芬 ,  万人静 ,  周俊飞

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种检测番茄转基因元件和品系的引物对组合、试剂盒及检测方法。所述的检测番茄常用的转基因元件及转基因品系的引物对组合包括以扩增11种常用番茄转基因元件、1种转基因品系特异性序列以及1种番茄内参基因Sl_LAT52的引物组。本发明还涉及检测番茄转基因元件和品系的试剂盒与检测方法。本发明技术方案操作简单，检测效率高，检验对象全面，具有较高的检测特异性、准确度和灵敏性等特点；可用于转基因番茄及其制品的大规模检测，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN105624297B

公开(公告)日：2020-03-10

申请号：CN201610060794.X

申请日：2016-01-29

Applicant: 江汉大学

Inventor： 张静 ,  彭海 ,  高利芬

IPC: C12Q1/6895

Abstract: 本发明公开了一种植物微生物耐药性基因的检测方法。所述方法包括：确定耐药性基因、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；向待测样品中加入外源核酸，得到混合样品并提取基因组；向基因组中加入外源标准基因，获得混合核酸；扩增混合核酸，利用扩增产物构建高通量测序文库并进行高通量测序，得到测序片段组；分析所述测序片段组，并根据获得的外源标准基因和内源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功；若实验成功，则计算耐药性基因的含量；根据耐药性基因的含量判定待测样品是否含有耐药性基因。所述方法可以一次性定量检测任意微生物中的任意多种希望检测的耐药性基因，且检测不需要培养与纯化微生物，速度快，结果准确可靠。

公开(公告)号：CN105603081B

公开(公告)日：2019-12-06

申请号：CN201610061101.9

申请日：2016-01-29

Applicant: 北京工商大学 ,  江汉大学

Inventor： 肖俊松 ,  曹雁平 ,  李秀婷 ,  吴华 ,  卢龙 ,  彭海 ,  许朵霞 ,  袁英髦 ,  王少甲 ,  赵晓丹 ,  章伟雄 ,  任圣 ,  张静

IPC: C12Q1/689

Abstract: 本发明公开了一种非诊断目的的肠道微生物定性与定量的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物；设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域；设计特征区域的多重扩增引物；在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后，提取待测样品中的微生物的核酸；利用设计的多重引物扩增微生物核酸，扩增获得特征测序片段；利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖，可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测，检测过程简单、快速且流程规范。

公开(公告)号：CN104846077B

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201510148702.9

申请日：2015-03-31

Applicant: 江汉大学 ,  中国农业科学院作物科学研究所

Inventor： 张静 ,  彭海 ,  陈斌 ,  陈红霖 ,  王沁

IPC: C12Q1/6869 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明公开了一种测试纯系油菜新品种的特异性、一致性与稳定性的方法。所述方法包括：获得变异位点；确定待测油菜品种的测试区域；构建数据库；确定抽样量后，随机抽样混合并提取混合样本的DNA；制备引物；利用引物对混合样本的DNA进行扩增，扩增产物用于构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；分析测序片段组，获得待测油菜品种基因型和杂株基因型；比较获得近似品种、变异位点和变异位点率；将杂株基因型与数据库中的基因型比较，获得杂株品种后，计算杂株率；利用变异位点、变异位点率和杂株率，判断待测油菜品种特异性、一致性和稳定性。该方法能够准确、完整地判断待测油菜品种的特异性、稳定性与一致性。

公开(公告)号：CN104805184B

公开(公告)日：2018-03-20

申请号：CN201510148635.0

申请日：2015-03-31

Applicant: 江汉大学 ,  农业部科技发展中心

Inventor： 彭海 ,  张静 ,  陈红 ,  方治伟 ,  冯涛

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种测试纯系水稻新品种的特异性、一致性与稳定性的方法，具体包括：获得变异位点；确定待测水稻品种的测试区域；构建数据库；确定抽样量后，随机抽样混合并提取混合样本的DNA；制备引物；利用引物对混合样本的DNA进行扩增，扩增产物用于构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；分析测序片段组，获得待测水稻品种基因型和杂株基因型；比较获得近似品种、变异位点和变异位点率；将杂株基因型与数据库中的基因型比较，获得杂株品种后，计算杂株率；利用变异位点、变异位点率和杂株率，判断待测水稻品种特异性、一致性和稳定性。该方法能够准确、完整地判断待测水稻品种的特异性、稳定性与一致性。

公开(公告)号：CN104805186B

公开(公告)日：2018-01-05

申请号：CN201510148683.X

申请日：2015-03-31

Applicant: 江汉大学 ,  农业部科技发展中心

Inventor： 张静 ,  彭海 ,  陈红 ,  章伟雄

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种测试玉米品种实质性派生关系的方法。该方法包括：获得变异位点；确定测试区域；抽样提取并获得抽样样本的DNA；制备引物；利用所述引物分别对两个抽样样本的DNA进行扩增，分别得到两个待测玉米品种在测试区域的扩增产物用于构建两个待测玉米品种的高通量测序文库；对两个高通量测序文库分别进行高通量测序，分别得到两个所述待测玉米品种的测序片段组；分析两个测序片段组，分别获得两个待测玉米品种基因型；比较两个待测玉米品种基因型，获得待测玉米品种间差异基因型的比例；根据待测玉米品种间差异基因型的比例，判断两个待测玉米品种的实质性派生关系。该方法能够准确、快速且简单地判断待测玉米品种间的实质性派生关系。

公开(公告)号：CN104141007B

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201410309782.7

申请日：2014-06-30

Applicant: 江汉大学

Inventor： 张静 ,  李甜甜

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了miRNA393a基因预报水稻白叶枯病的方法，属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤：选取待测水稻和对照水稻，选取的所述对照水稻为未感染白叶枯病但与待测水稻在相同条件下栽培的水稻；分别分离所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因；分别检测所述待测水稻和所述对照水稻中的总miRNA基因中的miRNA393a基因的表达量，所述miRNA393a基因的序列如序列表中SEQ ID NO:1所示；根据所述待测水稻和所述对照水稻中的miRNA393a基因的表达量，判断实验是否成功，若成功，进一步判定所述待测植株是否感染白叶枯病。本发明提供的预测方法获得了成功，可以在水稻白叶枯病症出现前数天实现准确预报，为早防早治赢得了时间，减少了白叶枯病对水稻造成的损失。

公开(公告)号：CN105624297A

公开(公告)日：2016-06-01

申请号：CN201610060794.X

申请日：2016-01-29

Applicant: 江汉大学

Inventor： 张静 ,  彭海 ,  高利芬

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种植物微生物耐药性基因的检测方法。所述方法包括：确定耐药性基因、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；向待测样品中加入外源核酸，得到混合样品并提取基因组；向基因组中加入外源标准基因，获得混合核酸；扩增混合核酸，利用扩增产物构建高通量测序文库并进行高通量测序，得到测序片段组；分析所述测序片段组，并根据获得的外源标准基因和内源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功；若实验成功，则计算耐药性基因的含量；根据耐药性基因的含量判定待测样品是否含有耐药性基因。所述方法可以一次性定量检测任意微生物中的任意多种希望检测的耐药性基因，且检测不需要培养与纯化微生物，速度快，结果准确可靠。

公开(公告)号：CN105586419A

公开(公告)日：2016-05-18

申请号：CN201610061099.5

申请日：2016-01-29

Applicant: 江汉大学

Inventor： 李丽丽 ,  彭海 ,  张静 ,  章伟雄

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6869 ,  C12Q2545/101 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2535/122

Abstract: 本发明公开了一种小麦加工产品转基因成分的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括：确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；进行抽样并混合，得到混合样品；提取混合样品的基因组并加入外源标准基因，得到混合核酸；构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量；根据外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量；根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的多种转基因成分。

公开(公告)号：CN105586416A

公开(公告)日：2016-05-18

申请号：CN201610060995.X

申请日：2016-01-29

Applicant: 江汉大学

Inventor： 周俊飞 ,  彭海 ,  陈利红 ,  张静

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6869 ,  C12Q2545/101 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2537/143 ,  C12Q2535/122

Abstract: 本发明公开了一种玉米转基因成分的检测方法，属于生物技术领域。所述方法包括：确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因；制备多重扩增引物；进行抽样并混合，得到混合样品；提取混合样品的基因组并加入外源标准基因，得到混合核酸；构建高通量测序文库；对高通量测序文库进行高通量测序，得到测序片段组；获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量；根据外源标准基因的测序片段的数量，判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量；根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的多种转基因成分。