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公开(公告)号:CN108424909B
公开(公告)日:2021-11-30
申请号:CN201810210290.0
申请日:2018-03-14
Applicant: 江汉大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/10 , C07K14/405 , C12N15/79
Abstract: 本发明提供了一种纤毛组装调控基因及其编码蛋白、获取方法和应用,所述基因来源于莱茵衣藻,所述基因名称为XAP5,所述基因包含如SEQ ID NO:1所示的cDNA序列;或者包含SEQ ID NO:2所示的编码蛋白质序列的多核苷酸;又或者包含与SEQ ID NO:1所限定的cDNA序列具有90%以上的同源性并且编码相同功能蛋白的核苷酸序列。本发明通过电击转化法将aphⅧ片段随机插入到衣藻中,获得了纤毛组装缺陷型突变藻株af1‑x,通过鉴定得到纤毛组装调控关键基因XAP5,构建衣藻表达载体,并导入af1‑x衣藻中,研究发现突变藻株的功能得到了互补,纤毛能够正常地进行组装。本发明XAP5基因及其编码蛋白可进一步用于纤毛的组装调控机制的研究以及纤毛相关疾病的研究和治疗等方面。
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公开(公告)号:CN107805660B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN201711296885.4
申请日:2017-12-08
Applicant: 江汉大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/14 , C12N1/02 , C12R1/46
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌小种分离鉴定方法,属于小种鉴定技术领域。提取样品中的微生物的总核酸并构建高通量测序文库;寻找基因组上的变异位点;通过滑动平移筛选高多态性位点,并在在候选位点两侧设计多重扩增引物;利用固体培养基分离样品中的单菌落并做进一步纯化,以获得单克隆菌落;提取菌落的基因组DNA后利用上述步骤设计的引物进行扩增并测序;基于测序结果单克隆菌落进行分型,具有不同基因型的菌落作为不同的小种进行后续研究。本方法不需要预先知道样品中的小种数量以及丰度等信息,也无需传统的筛选过程中所需要生理生化鉴定试验,只需通过高通量测序和扩增即可分离培养出样品中的全部小种,过程简单、快速且流程规范。
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公开(公告)号:CN105603082B
公开(公告)日:2019-08-23
申请号:CN201610063949.5
申请日:2016-01-29
Applicant: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 , 江汉大学
IPC: C12Q1/6869 , C12Q1/06 , C12Q1/04 , C12Q1/70
Abstract: 本发明公开了一种水稻微生物定性与定量的检测方法,属于生物技术领域。所述方法包括以下步骤:确定待测样品中的目标微生物类群、目标微生物和非目标生物、以及不存在于所述待测样品中的参考微生物;设计目标微生物类群与目标微生物的特征区域;设计特征区域的多重扩增引物;在待测样品中加入参考微生物与外源核酸后,提取待测样品中的微生物的核酸;利用设计的多重引物扩增微生物核酸,扩增获得特征测序片段;利用特征测序片段定性、定量分析待测样品中微生物。本发明不需要对微生物进行预培养与增殖,可以一次性地对待测样品中的多种已知微生物进行高通量、高准确度、高分辨率的检测,检测过程简单、快速且流程规范。
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公开(公告)号:CN108004335A
公开(公告)日:2018-05-08
申请号:CN201711294441.7
申请日:2017-12-08
Applicant: 江汉大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种白叶枯菌小种分离鉴定方法,属于小种鉴定技术领域。提取样品中的微生物的总核酸并构建高通量测序文库;寻找基因组上的变异位点;通过滑动平移筛选高多态性位点,并在候选位点两侧设计多重扩增引物;利用固体培养基分离样品中的单菌落并做进一步纯化,以获得单克隆菌落;提取菌落的基因组DNA后利用上述步骤设计的引物进行扩增并测序;基于测序结果单克隆菌落进行分型,具有不同基因型的菌落作为不同的小种进行后续研究。本方法不需要预先知道样品中的小种数量以及丰度等信息,也无需传统的筛选过程中所需要生理生化鉴定试验,只需通过高通量测序和扩增即可分离培养出样品中的全部小种,过程简单、快速且流程规范。
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公开(公告)号:CN107904249A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201711228430.9
申请日:2017-11-29
Applicant: 江汉大学
IPC: C12N15/31 , C12N1/13 , C07K14/405 , C12Q1/02 , C02F3/32 , C12R1/89 , C02F101/20
Abstract: 本发明公开了莱茵衣藻g3148.t1基因在调控莱茵衣藻镉耐受性中的应用,属于生物技术领域和环境污染治理领域。本发明通过将含巴龙霉素抗性基因的aphⅧ片段(SEQ ID NO:3)随机插入衣藻中得到了对镉显著敏感的莱茵衣藻突变藻株,进一步鉴定发现突变藻株的镉敏感性是由于aphⅧ片段插入到g3148.t1基因(CDS序列如SEQ ID NO:1所示)中造成的。通过降低莱茵衣藻g3148.t1基因的表达、使g3148.t1基因失活或缺失该基因能够降低莱茵衣藻的镉耐受性;通过基因工程手段获得的镉敏感型莱茵衣藻藻株可应用到水体环境中通过生物手段进行镉污染的监控和检测当中,进而为污水检测提供新的生物材料。
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公开(公告)号:CN107828904A
公开(公告)日:2018-03-23
申请号:CN201711295741.7
申请日:2017-12-08
Applicant: 江汉大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种小麦条斑病菌小种分离鉴定方法,属于小种鉴定技术领域。提取样品中的微生物的总核酸并构建高通量测序文库;寻找基因组上的变异位点;通过滑动平移筛选高多态性位点,并在候选位点两侧设计多重扩增引物;利用固体培养基分离样品中的单菌落并做进一步纯化,以获得单克隆菌落;提取菌落的基因组DNA后利用上述步骤设计的引物进行扩增并测序;基于测序结果单克隆菌落进行分型,具有不同基因型的菌落作为不同的小种进行后续研究。本方法不需要预先知道样品中的小种数量以及丰度等信息,也无需传统的筛选过程中所需要生理生化鉴定试验,只需通过高通量测序和扩增即可分离培养出样品中的全部小种,过程简单、快速且流程规范。
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公开(公告)号:CN107760695A
公开(公告)日:2018-03-06
申请号:CN201711230079.7
申请日:2017-11-29
Applicant: 江汉大学
IPC: C12N15/31 , C12N1/13 , C07K14/405 , C12R1/89
Abstract: 本发明公开了莱茵衣藻Cre03.g157400.t1.2基因在调控莱茵衣藻镉耐受性中的应用。本发明通过将含巴龙霉素抗性基因的aphⅧ片段(SEQ ID NO:3)随机插入衣藻中得到了对镉显著敏感的莱茵衣藻突变藻株,进一步鉴定发现突变藻株的镉敏感性是由于aphⅧ片段插入到Cre03.g157400.t1.2基因(CDS序列如SEQ ID NO:1所示)中造成的。通过降低莱茵衣藻Cre03.g157400.t1.2基因的表达、使该基因失活或缺失该基因能够降低莱茵衣藻的镉耐受性;通过基因工程手段获得的镉敏感型莱茵衣藻藻株可应用于镉污染水域的监控与检测中。本发明为污水的监控与检测提供了新的方向。
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公开(公告)号:CN105624298A
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201610061083.4
申请日:2016-01-29
Applicant: 江汉大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q1/6895 , C12Q2600/16 , C12Q2600/166 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2535/122 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明公开了一种油菜转基因成分的检测方法,属于生物技术领域。所述方法包括:确定转基因成分、内源标准基因和外源标准基因;制备多重扩增引物;进行抽样并混合,得到混合样品;提取混合样品的基因组并加入外源标准基因,得到混合核酸;构建高通量测序文库;对高通量测序文库进行高通量测序,得到测序片段组;获得待测样品中转基因成分的测序片段的数量、内源标准基因的测序片段的数量和外源标准基因的测序片段的数量;根据外源标准基因的测序片段的数量,判断实验是否成功并计算待测样品种中转基因成分的含量;根据转基因成分的含量判断待测样品中是否含有转基因成分。该方法能够同时定量检测待测样品中的任意多种转基因成分。
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公开(公告)号:CN107236731B
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201710251810.8
申请日:2017-04-18
Applicant: 江汉大学
Abstract: 本发明公开了一种受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子、其制备方法和重组表达载体,属于植物基因工程技术领域。所述启动子包含如序列表中SEQ ID NO.1所示序列。所述制备启动子的方法包括:提取水稻的基因组DNA;将所述基因组DNA通过如序列表中SEQ ID NO:2所示的上游引物和SEQ ID NO:3所示的下游引物进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,即所述受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子。所述启动子所用的诱导系统为植物内源激素诱导系统,该诱导系统毒性小、对环境影响小,适合大田的长期应用。
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公开(公告)号:CN107881172A
公开(公告)日:2018-04-06
申请号:CN201610868854.0
申请日:2016-09-30
Applicant: 江汉大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8222
Abstract: 本发明涉及一种逆境诱导型启动子序列,包含SEQ ID NO:1的1388bp的 DNA核苷酸序列,属于植物基因工程技术领域。本发明还提供了一种逆境诱导型启动子植物表达载体及使植物在低温、干旱和盐诱导下表达目标基因的方法,可将目标基因替换GUS基因插入到含有本发明启动子的植物表达载体中,将该重组载体导入目标植物;SEQ ID NO:2和 SEQ ID NO:3为 PCR引物,分别包含EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,所述引物适用于扩增含SEQ ID NO:1的DNA序列;本发明可用于启动冷、干旱和盐胁迫下外源基因的高效表达,适用于植物遗传育种改良研究。
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