公开(公告)号：CN119351224A

公开(公告)日：2025-01-24

申请号：CN202411418442.8

申请日：2024-10-11

Applicant: 江苏师范大学 ,  徐州市第一人民医院

Inventor： 潘超 ,  田俊 ,  朱奕学 ,  褚燕子 ,  杨坤龙 ,  王珊 ,  李永新 ,  申令 ,  叶焰 ,  薛雅徽

IPC: C12N1/14 ,  C12N15/80 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明公开了一种用于腐皮镰刀菌原生质体制备的裂解液及其应用，属于生物技术领域。本发明利用正交实验设计获得了腐皮镰刀菌原生质体制备用的裂解液最佳配方为质量比1:3:3的崩溃酶、藤黄节杆菌的溶壁酶、纤维素酶，并进一步通过聚乙二醇介导的原生质体转化方法获得腐皮镰刀菌的基因敲除株。本发明使用藤黄节杆菌的溶壁酶替换哈茨木霉菌的溶菌酶，所得的细胞壁裂解液能有效获得原生质体。本发明的裂解液有利于腐皮镰刀菌的原生质体制备以及基因功能等研究，对腐皮镰刀菌所致病害的防控研究提供了遗传转化的方法参考。