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公开(公告)号:CN114540523B
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202210315056.0
申请日:2022-03-29
Abstract: 本发明提供检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒,属于生物技术和分子生物学领域。该检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物,包括引物对A、引物对B和引物对C,所述引物对A包括引物1和引物2,所述引物对B包括引物3和引物4,所述引物对C包括引物5和引物6,所述引物1‑6的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1‑6所示。本发明试剂盒操作简单、特异性强、敏感性高、能同时检测O8、O9及O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒。
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公开(公告)号:CN118852369A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410885092.X
申请日:2024-07-03
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明涉及绵羊肺炎支原体检测领域,具体涉及绵羊肺炎支原体免疫相关蛋白、表达载体、重组菌株、试剂盒、检测绵羊肺炎支原体ELISA抗体的方法及其用途。本发明公开了一种绵羊肺炎支原体免疫相关蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,或如SEQ ID NO:2所示。本发明通过对UlaD、T4SS基因进行PCR扩增、克隆、构建表达载体,然后通过原核表达系统获得了两种具有良好的免疫反应性的重组蛋白,并基于这两种蛋白通过优化间接ELISA检测方法中的条件和参数,分别建立了敏感性高、特异性强、重复性好、符合率好的绵羊肺炎支原体抗体的间接ELISA检测方法,为绵羊肺炎支原体抗体检测试剂盒的开发奠定了坚实基础,同时可作为亚单位疫苗的候选蛋白和药物,制备成抗绵羊肺炎支原体感染制剂。
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公开(公告)号:CN116004549A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202211630235.X
申请日:2022-12-19
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , A61K39/42 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供分泌抗牛病毒性腹泻病毒E2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用,属于生物技术领域。杂交瘤细胞株1E2B3,保藏编号为CCTCC NO:C2022348。本发明还提供该杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体及其在制备检测牛病毒性腹泻病毒E2蛋白抗体的试剂盒、制备BVDV‑1特异性治疗剂和抗原检测试剂等方面的应用。本发明杂交瘤细胞株能够产生针对BVDV‑1 E2蛋白的单克隆抗体。该单克隆抗体的阻断ELISA方法可用于病毒感染与灭活疫苗免疫抗体的检测;该单克隆抗体具有中和病毒的活性,可用于BVDV相关疾病治疗制剂的研发;该单克隆抗体具有良好的反应性可用于Western blot检测和免疫荧光检测。
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公开(公告)号:CN114540523A
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202210315056.0
申请日:2022-03-29
Abstract: 本发明提供检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒,属于生物技术和分子生物学领域。该检测O8、O9、O89血清型大肠杆菌的引物组合物,包括引物对A、引物对B和引物对C,所述引物对A包括引物1和引物2,所述引物对B包括引物3和引物4,所述引物对C包括引物5和引物6,所述引物1‑6的核苷酸序列依次如SEQ ID NO:1‑6所示。本发明试剂盒操作简单、特异性强、敏感性高、能同时检测O8、O9及O89血清型大肠杆菌的引物组合物及试剂盒。
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公开(公告)号:CN113736799A
公开(公告)日:2021-12-03
申请号:CN202111092942.3
申请日:2021-09-17
Abstract: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。
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公开(公告)号:CN113736799B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202111092942.3
申请日:2021-09-17
Abstract: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。
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公开(公告)号:CN113025531A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN202110341915.9
申请日:2021-03-30
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用,所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株,已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020907,保藏日期为2020年12月14日。本发明所提供的菌株NJ01培养生长速度快、滴度高,可达1010CCU/mL,在特定培养基中经复苏传代培养后,只需要10‑72h即可变色,这为抗绵羊肺炎支原体制剂的测定节约了时间,提高了效率,可用于抗支原体制剂的快速筛选等。
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公开(公告)号:CN118064377A
公开(公告)日:2024-05-24
申请号:CN202410187842.6
申请日:2024-02-20
Applicant: 江苏省农业科学院
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌抗绵羊肺炎支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用,所述的杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株1A11,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202408。所述的杂交瘤细胞株1A11分泌的单克隆抗体为单克隆抗体1A11,本发明所提供的单克隆抗体1A11可用于检测绵羊肺炎支原体,特异性强,不与猪鼻支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体和牛支原体等常见动物支原体发生反应。本发明基于单克隆抗体1A11建立的双抗夹心ELISA方法的批间和批内变异系数均低于10%,特异性、重复性、敏感性良好,与CCU含量呈正相关,是一种快速、简易、准确的病原检测方法,对绵羊肺炎支原体的快速定量和疫苗研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113025531B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202110341915.9
申请日:2021-03-30
Applicant: 江苏省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一株绵羊肺炎支原体及其在抗绵羊肺炎支原体制剂筛选中的应用,所述绵羊肺炎支原体的分类命名为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)NJ01株,已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2020907,保藏日期为2020年12月14日。本发明所提供的菌株NJ01培养生长速度快、滴度高,可达1010CCU/mL,在特定培养基中经复苏传代培养后,只需要10‑72h即可变色,这为抗绵羊肺炎支原体制剂的测定节约了时间,提高了效率,可用于抗支原体制剂的快速筛选等。
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