山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN113736799A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202111092942.3

    申请日:2021-09-17

    Abstract: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。

    山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN113736799B

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202111092942.3

    申请日:2021-09-17

    Abstract: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。

    一种分泌抗绵羊肺炎支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用

    公开(公告)号:CN118064377A

    公开(公告)日:2024-05-24

    申请号:CN202410187842.6

    申请日:2024-02-20

    Abstract: 本发明公开了一种分泌抗绵羊肺炎支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗与应用,所述的杂交瘤细胞株为杂交瘤细胞株1A11,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202408。所述的杂交瘤细胞株1A11分泌的单克隆抗体为单克隆抗体1A11,本发明所提供的单克隆抗体1A11可用于检测绵羊肺炎支原体,特异性强,不与猪鼻支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体和牛支原体等常见动物支原体发生反应。本发明基于单克隆抗体1A11建立的双抗夹心ELISA方法的批间和批内变异系数均低于10%,特异性、重复性、敏感性良好,与CCU含量呈正相关,是一种快速、简易、准确的病原检测方法,对绵羊肺炎支原体的快速定量和疫苗研究具有重要意义。

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