一种从含尿苷的催化液中分离提取尿苷的方法

    公开(公告)号:CN114736257B

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202210546132.9

    申请日:2022-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种从含尿苷的催化液中分离提取尿苷的方法,包括以下步骤:(1)将含尿苷的催化液与聚乙二醇混合后分液,下层为尿苷催化液;(2)所得尿苷催化液经纳滤,收集纳滤透过液;(3)所得纳滤透过液经蒸发浓缩,得到尿苷浓缩液;(4)所得尿苷浓缩液调节pH后,加入晶种,搅拌析晶。本发明中的结晶体系为水体系,不必增加任何试剂,降低结晶成本。本发明的结晶过程在12h以内完成获得亮白色晶体,一次结晶收率大于60%,经多次结晶或嵌套结晶后总结晶收率在90%以上,同时晶体的纯度大于98%,产品质量、收率、成本高于现有技术。

    一种UMP钠盐的分离提取方法

    公开(公告)号:CN114805459A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210553619.X

    申请日:2022-05-20

    Abstract: 本发明公开了一种UMP钠盐的分离提取方法,包括以下步骤:(1)向含有UMP钠盐的催化液加入磷酸酯酶溶液和催化剂进行酯化反应,得到含UMP酯的酶催化液;(2)将所得含UMP酯的酶催化液加入乙酸乙酯进行萃取,得到含UMP酯的乙酸乙酯溶液;真空浓缩去除乙酸乙酯,得到UMP酯浓缩液;调节pH后进行去酯化反应;(3)将所得反应液调节pH后经纳滤膜纳滤,得到纳滤截留液;(4)将所得纳滤截留液经蒸发浓缩后,加入反溶剂析晶,离心,干燥,即得UMP钠盐。本发明采用酯化后萃取的方式进行,省去了色谱和固液分离过程,且UMP钠盐摩尔收率92%以上,纯度可以达到98%以上。

    一种从含尿苷的催化液中分离提取尿苷的方法

    公开(公告)号:CN114736257A

    公开(公告)日:2022-07-12

    申请号:CN202210546132.9

    申请日:2022-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种从含尿苷的催化液中分离提取尿苷的方法,包括以下步骤:(1)将含尿苷的催化液与聚乙二醇混合后分液,下层为尿苷催化液;(2)所得尿苷催化液经纳滤,收集纳滤透过液;(3)所得纳滤透过液经蒸发浓缩,得到尿苷浓缩液;(4)所得尿苷浓缩液调节pH后,加入晶种,搅拌析晶。本发明中的结晶体系为水体系,不必增加任何试剂,降低结晶成本。本发明的结晶过程在12h以内完成获得亮白色晶体,一次结晶收率大于60%,经多次结晶或嵌套结晶后总结晶收率在90%以上,同时晶体的纯度大于98%,产品质量、收率、成本高于现有技术。

    一种谷氨酰半胱氨酸合成酶突变体及其在谷胱甘肽合成中的应用

    公开(公告)号:CN116769738A

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202310693442.8

    申请日:2023-06-13

    Abstract: 本发明公开了一种谷氨酰半胱氨酸合成酶的突变体及其在谷胱甘肽合成中的应用。通过对柠檬酸杆菌Citrobacter koseri(strain ATCC BAA‑895)来源的野生型谷氨酰半胱氨酸合成酶(Glutamate‑cysteine ligase[EC:6.3.2.2])的第150位、第188位、第235位、第236位、第241位、第300位、第301位、第302位和第330位氨基酸残基进行单一位点的突变,筛选得到了第150位、第236位、第302位和第330位突变位点,通过对上述筛选得到的突变位点组合突变获得突变体M1‑M6,其中活性最高的突变体M4的酶活力相比较野生型谷氨酰半胱氨酸合成酶提高了477%,用突变体M4催化合成谷胱甘肽,最高浓度达到23g/L,比野生型提高4.2倍,大幅度降低了生产成本,具有重要的应用价值。

    一种谷氨酰半胱氨酸合成酶及其应用

    公开(公告)号:CN117757760A

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202311826011.0

    申请日:2023-12-27

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种谷氨酰半胱氨酸合成酶及其应用。本发明基于Citrobacter koseri来源的野生型谷氨酰半胱氨酸合成酶GshA(Glutamate‑cysteine ligase[EC:6.3.2.2])的氨基酸进行改造,通过改变野生型蛋白结构表面的氨基酸序列,筛选得到一种稳定性和活性提高的谷氨酰半胱氨酸合成酶。所述谷氨酰半胱氨酸合成酶将野生型谷氨酰半胱氨酸合成酶的第262位甘氨酸突变为丙氨酸,第456位异亮氨酸突变为亮氨酸,第470位丙氨酸突变为谷氨酰胺,第496位苏氨酸突变为色氨酸得到的。在本发明中利用该高活性和高稳定性的谷氨酰半胱氨酸合成酶催化生产谷胱甘肽的同时,引入了ATP能量循环系统,提高了产物浓度,又降低了生产成本,极大的提高了催化应用的潜力,具有重要的工业应用前景。

Patent Agency Ranking