公开(公告)号：CN114720680B

公开(公告)日：2024-10-22

申请号：CN202210453217.2

申请日：2022-04-27

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 杨怀霞 ,  郭亮 ,  刘增辉 ,  周世瑾 ,  王贺森 ,  刘艳菊

IPC: G01N33/53 ,  C12N15/115 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明公开了基于ROMP信号放大策略超灵敏检测黄曲霉毒素B1的电化学检测试剂盒及其应用，该试剂盒包括金电极、Aptamer、MCH、Antibody、AA、EDC、NHS、AquaMet、CFc、LiClO4。本发明将开环易位聚合(ROMP)用于检测AFB1的试剂盒中，将一端修饰巯基的适配体与金电极通过Au‑S键相连接，然后加入黄曲霉毒素B1(AFB1)使其与适配体结合，之后加入抗体‑丙烯酸生物共轭物(Ab*)，与AFB1特异性识别，接着加入催化剂AquaMet，最后激活ROMP反应，形成大量电活性探针CFc标记的聚合物。本发明方法具有选择性好、稳定性高、高灵敏度、绿色环保等优点，在生物分析检测领域具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN118483415A

公开(公告)日：2024-08-13

申请号：CN202410552474.0

申请日：2024-05-07

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 柯圆梦 ,  李一帆 ,  王剑锋 ,  杨怀霞 ,  刘智翔 ,  王贺森 ,  李晓飞

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了一种基于NCA ROP聚合信号放大的烟草花叶病毒RNA荧光检测试剂盒及应用，该试剂盒主要包括羧基磁珠、probe 1、EDC、NHS、BSA、probe 2‑NCA‑FAs预制溶液。本发明将probe 1固定在羧基磁珠上，通过BSA封闭磁珠的活性位点。加入tRNA后，probe 1可特异性捕获目标物tRNA，然后加入probe 2嵌段的荧光多肽，其中的probe 2可与tRNA连接，从而将荧光多肽聚合物连接在磁珠表面，使磁珠具有明显的荧光信号。本发明成功构建了一种能够快速、精确、灵敏、特异性检测tRNA的荧光检测试剂盒。通过聚合放大策略，有效提高荧光信号强度。

公开(公告)号：CN114460159B

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202210147379.3

申请日：2022-02-17

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 杨怀霞 ,  郭亮 ,  张亚萍 ,  陈璐瑶 ,  张雨婷 ,  卢静 ,  郭文锋 ,  司富春

IPC: G01N27/48 ,  C12Q1/42

Abstract: 本发明公开了基于photo‑ATRP信号放大策略的ALP活性检测试剂盒及其使用方法，该试剂盒包括以下原料：电极、MPA、EDC、NHS、O‑磷酸乙醇胺、BIBB、DMSO、EY、Me6TREN、FMMA、LiClO4。本发明利用photo‑ATRP反应作为聚合反应信号放大策略显著提高了ALP活性检测的灵敏度，同时避免过渡金属催化剂的使用，具有高效、操作方便、环境友好的优点。在最佳实验条件下，该方法用于ALP活性检测的线性范围为10～150mU/mL，检测限(LOD)为2.12mU/mL，说明本发明方法具有良好的灵敏度。且本发明方法具有令人满意的选择性、抗干扰性、重现性及稳定性，该方法在临床血清样本及抑制率实验中均获得良好的实验结果。

公开(公告)号：CN116539703A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202310040066.2

申请日：2023-01-13

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 张亚萍 ,  郭亮 ,  张淑玲 ,  王梦丽 ,  杨怀霞 ,  刘艳菊

IPC: G01N27/48 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明公开了基于AuNPs‑SWCNT和HKUST‑1高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒，该试剂盒包括玻碳电极、PEI、HAuCl4·3H2O、SWCNT‑COOH、H2SO4、H3BTC、hemin、Cu(NO3)2·3H2O、EDC、NHS、Apt、Ab、MCH。本发明基于AuNPs‑SWCNT复合材料和hemin@HKUST‑1成功构建了一种高灵敏检测ERα的电化学检测试剂盒。本发明将hemin@HKUST‑1通过酰胺键与抗体连接，然后大的比表面积和稳定的多孔结构使HKUST‑1能够在捕获血红素和Ab后进行信号放大。之后固定在HKUST‑1上的hemin与过氧化氢发生氧化还原反应，产生电化学信号。该试剂盒可以实现对ERα的宽范围和高灵敏度检测，检测限低至27.8fg·mL‑1。该试剂盒具有优异的选择性、稳定性、重现性和抗干扰性，可以用于真实样品中ERα的检测。

公开(公告)号：CN116046760A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202310041328.7

申请日：2023-01-13

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 马乐乐 ,  康乐 ,  程迪 ,  孙宇植 ,  杨怀霞

IPC: G01N21/76 ,  G01N21/63 ,  G01N21/33 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/6825

Abstract: 本发明公开了一种基于GO‑CDTPA‑AuNPs和PET‑RAFT的电致化学发光检测试剂盒，包括金电极、hDNA、MCH、MPA‑NHS酯、GO‑CDTPA‑AuNPs、Me6TREN、EY、NAS、鲁米诺。本发明采用GO‑CDTPA‑AuNPs复合材料和PET‑RAFT多信号放大策略，避免了目前常用信号放大策略中生物酶的使用，信号得到成倍的放大，提高检测的灵敏度，稳定性和重现性。而且避免了鲁米诺通过π‑π共轭与GO结合的不稳定性，提高了GO的表面利用率，这将进一步提高鲁米诺的电化学发光效率。将GO和AuNPs相结合避免了传统纳米材料结合不稳定，易于聚集的缺点，光引发的RAFT聚合反应避免了传统RAFT反应中对热引发的需求，反应条件温和，反应时间更快，在室温下即可实现“活性”/可控聚合；且不会产生生物毒性，更加环保。

公开(公告)号：CN114894760A

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202210505125.4

申请日：2022-05-10

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 杨怀霞 ,  郭亮 ,  崔真真 ,  潘九五 ,  靳一凡 ,  刘艳菊

IPC: G01N21/64 ,  G01N33/543 ,  G01N33/533 ,  C08F292/00 ,  C08F220/30

Abstract: 本发明公开了基于ARGET‑ATRP信号放大策略的猝灭竞争型荧光生物传感器及检测方法，该传感器主要由以下原料制备而成：羧基化Fe3O4磁珠、EDC、NHS、PBS缓冲液、Apt、BPAA、cDNA、Me6TREN、CuBr2、FA、AA。本发明通过酰胺反应将Apt序列固定在羧基化磁珠表面。同时，BPAA通过酰胺反应与cDNA连接。然后，通过碱基互补配对使Apt与cDNA进行结合。随后，发生ARGET‑ATRP反应，使大量的FA单体接枝在BPAA活性位点上聚合，从而显著放大了荧光信号。最后，目标物OTA与cDNA竞争Apt，使带荧光信号的cDNA脱落。本发明传感器具有灵敏度高、选择性好、操作简便、成本低、环境友好等优点，检测限可低至7.6fg/mL。

公开(公告)号：CN114720697A

公开(公告)日：2022-07-08

申请号：CN202210403459.0

申请日：2022-04-18

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 程迪 ,  周振波 ,  关怀敏 ,  刘艳菊 ,  尚莎莎 ,  李晓飞 ,  杨怀霞

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/543 ,  G01N27/327 ,  G01N27/49

Abstract: 本发明公开了基于FFAPO所引发的ROP信号放大策略的高灵敏cTnI检测试剂盒及应用，该试剂盒包括电极、MPA、EDC、NHS、Ab1、BSA、Ab2、GA、甲醇钾、FFAPO、LiClO4。本发明采用三明治夹心结构引入cTnI，通过酯化反应在Ab2连接上ROP反应的引发剂乙醇酸，从而通过ROP反应将大量二茂铁电活性聚合物接枝到电极表面，成功建立了一种灵敏度高、特异性强的检测cTnI的试剂盒。实验证明，本发明检测的线性范围为1pg/mL～1μg/mL，相关系数为0.997，检出限为57.14fg/mL，连续存放两周后稳定性达到初始值的94.8％，抗干扰性达到96.2％～103.1％，同时具有良好的选择性和重现性，为后期应用于医学领域cTnI的检测及急性心肌梗死的早期诊断奠定了基础。

公开(公告)号：CN114660282A

公开(公告)日：2022-06-24

申请号：CN202210423731.1

申请日：2022-04-21

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 马乐乐 ,  王梦丽 ,  郭晓玉 ,  崔真真 ,  刘增辉 ,  杨怀霞

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  G01N21/64 ,  G01N30/02

Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素B1检测试剂盒及检测方法和应用，该试剂盒包括：MBs、Apt、EDC、NHS、BSA、BMP、Ab、CuBr2、ME6TREN、AM、AA、TPP*。本发明采用ARGETATRP信号放大策略。抗原与适配体和抗体特异性识别并结合后，将ARGET ATRP的引发剂BMP固定在磁珠表面，在CuBr2/Me6TREN的催化作用下，AGRET ATRP反应在磁珠表面进行，形成带有氨基的聚合物链。最后，大量羧基卟啉通过酰胺键与聚合物连接。相比于其它传统的聚合方法，ARGET ATRP使用了强还原剂，能够极大的降低过渡态重金属催化剂的用量，并且使得该反应具有氧气耐受性，更加高效，环保，且操作简便。本发明所设计的试剂盒检测范围更宽、检测限更低，灵敏度较高。

公开(公告)号：CN114410749A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202210085879.9

申请日：2022-01-25

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 陈璐瑶 ,  杨昊源 ,  王剑锋 ,  李培培 ,  郭亮 ,  李晓飞 ,  杨怀霞

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/70 ,  G01N21/76 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明公开了基于点击化学和ARGET‑ATRP放大策略的电致化学发光检测试剂盒及方法，该试剂盒包括金电极、hairpin DNA、TCEP、MCH、鲁米诺、PBIB、AA、CuSO4、BPDS、CuBr2/ME6TREN、NAS。本发明利用长链聚合物来放大ECL信号，避免了目前常用信号放大策略中的纳米材料和生物酶的使用，信号得到成倍的放大，提高检测的灵敏度，稳定性和重现性。本发明采用ARGET‑ATRP策略，避免了传统ATRP反应中重金属离子催化剂的大量使用，具有商业化的引发剂和广泛的可用单体，以及温和的反应条件。与现有检测植物病毒的方法相比，本发明具有更广泛的检测范围和更低的LOD，且本发明具有良好的选择性、重现性和稳定性，有望用于tRNA的检测。

公开(公告)号：CN109613083B

公开(公告)日：2021-05-25

申请号：CN201811510368.7

申请日：2018-12-11

Applicant: 河南中医药大学

Inventor： 刘艳菊 ,  杨怀霞 ,  张亚萍 ,  王珂 ,  王笑阳 ,  杨丽娟 ,  靳一凡

IPC: G01N27/30 ,  G01N27/416 ,  G01N27/48 ,  B82Y30/00

Abstract: 本发明公开了纳米金‑原卟啉铜(Ⅱ)高灵敏检测H2O2电化学传感器的构建及其应用。本发明利用PEI的还原性和稳定性制备出纳米金，通过酰胺键与原卟啉铜(Ⅱ)相结合制备出纳米金‑原卟啉铜(Ⅱ)，并将其修饰在玻碳电极表面利用电化学方法对过氧化氢进行检测。结果表明，最优条件下，在一定范围内H2O2的浓度与电流信号呈现正相关，检测线性范围0.9～7.9fmol/L，相关系数为0.9945，检出限91.74amol/L，其稳定性较好表现在3天后该传感器电流信号为初始值的106.04％，抗干扰性达到99.59～102.89％。本发明传感器对过氧化氢的检测具有灵敏度高，稳定性高，抗干扰性强等特点，为后期应用于临床葡萄糖的检测及医学领域奠定了基础。