-
公开(公告)号：CN113278645A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110403824.3
申请日：2021-04-15
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种增强链霉菌基因组编辑效率的方法及其应用。通过添加控制Cas9活性的元件，实现在转录、翻译和蛋白质水平上对Cas9蛋白活性的三重控制，抑制Cas9蛋白对链霉菌的细胞毒性，提高链霉菌中质粒的转化效率，在诱导条件下又能实现高效基因编辑。本发明建立了一个既受到化学小分子诱导，又受抑制蛋白调控的基因编辑系统，抑制Cas9体内毒性，在不影响编辑质粒转化效率和宿主细胞自身生长代谢的前提下，实现遗传元件的高效导入和后续基因的高效编辑。小分子化学诱导剂添加方便，能够实现基于双链断裂、定向修复的基因组高效精准编辑。本发明可应用于包含模式或工业链霉菌在内的链霉菌基因工程和遗传修饰改造。
-
公开(公告)号：CN109811010B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201910036100.2
申请日：2019-01-15
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种增强放线菌基因编辑效率的方法及其应用，是以删除天蓝色链霉菌中的actII‑ORF4为例，利用诱导型启动子tipAp、核糖体开关以及split Cas9控制Cas9活性，转化过程相比于传统的组成型Cas9表达，转化效率提高约260倍；编辑过程添加诱导物并提高ATP浓度，使编辑效率达到80％。本发明方法建立一个既能受到化学小分子诱导，又能受蓝光可逆调控的CRISPR/Cas9系统，从而保证在质粒转化效率和目的宿主正常生长代谢最大限度不受影响的情况下，实现基于双链断裂的精确高效基因编辑，本发明应用于包含链霉菌在内的其它模式或工业放线菌的基因工程和遗传修饰改造。
-
公开(公告)号：CN113278645B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202110403824.3
申请日：2021-04-15
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种增强链霉菌基因组编辑效率的方法及其应用。通过添加控制Cas9活性的元件，实现在转录、翻译和蛋白质水平上对Cas9蛋白活性的三重控制，抑制Cas9蛋白对链霉菌的细胞毒性，提高链霉菌中质粒的转化效率，在诱导条件下又能实现高效基因编辑。本发明建立了一个既受到化学小分子诱导，又受抑制蛋白调控的基因编辑系统，抑制Cas9体内毒性，在不影响编辑质粒转化效率和宿主细胞自身生长代谢的前提下，实现遗传元件的高效导入和后续基因的高效编辑。小分子化学诱导剂添加方便，能够实现基于双链断裂、定向修复的基因组高效精准编辑。本发明可应用于包含模式或工业链霉菌在内的链霉菌基因工程和遗传修饰改造。
-
公开(公告)号：CN109811010A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910036100.2
申请日：2019-01-15
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种增强放线菌基因编辑效率的方法及其应用，是以删除天蓝色链霉菌中的actII-ORF4为例，利用诱导型启动子tipAp、核糖体开关以及split Cas9控制Cas9活性，转化过程相比于传统的组成型Cas9表达，转化效率提高约260倍；编辑过程添加诱导物并提高ATP浓度，使编辑效率达到80％。本发明方法建立一个既能受到化学小分子诱导，又能受蓝光可逆调控的CRISPR/Cas9系统，从而保证在质粒转化效率和目的宿主正常生长代谢最大限度不受影响的情况下，实现基于双链断裂的精确高效基因编辑，本发明应用于包含链霉菌在内的其它模式或工业放线菌的基因工程和遗传修饰改造。
-
-
-
Search Results
4
records
(took 0.022 seconds)
