-
公开(公告)号：CN105483190B
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201510692030.8
申请日：2015-10-23
Applicant: 山东金城生物药业有限公司 , 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程改造提高S‑腺苷‑L‑蛋氨酸产量的方法，先利用一步基因置换法将酿酒酵母菌株染色体上一条GLC3（糖原支链酶基因）等位基因替换成G418抗性基因，然后通过孢子分离方法得到只含有GLC3基因被替换的单倍体，从而得到GLC3基因突变了的纯合子。通过10L和500L发酵罐发酵验证，突变菌株生产腺苷蛋氨酸产量分别达到了7.93g/L和8.35g/L，比原始菌株提高了15.1%和24.7%。
-
公开(公告)号：CN104073508A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410311101.0
申请日：2014-07-02
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开一种提高大肠杆菌正丁醇耐受性的方法，包括以下步骤：将大肠杆菌菌株中的野生型fnr基因克隆到pKSC质粒上，得到重组载体pKSC-fnr，通过碱基替换，得到优化的重组载体pKSC-fnr1和pKSC-fnr2；最后用pKSC-fnr1和pKSC-fnr2中的fnr1和fnr2基因替换E.coliDH5α中野生型fnr基因，得到两个正丁醇耐受性提高的菌株。本发明通过对大肠杆菌菌株中的野生型fnr基因的碱基替换，影响其所调控的各种基因的转录水平，特别是与正丁醇耐受性相关的基因，进而提高大肠杆菌中的正丁醇耐受性，对利用大肠杆菌用于工业化生产正丁醇具有重要的意义。
-
公开(公告)号：CN104073459A
公开(公告)日：2014-10-01
申请号：CN201410311356.7
申请日：2014-07-02
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大肠杆菌发酵生产番茄红素产量的方法，包括以下步骤：制备产番茄红素的大肠杆菌菌株，将大肠杆菌菌株中的野生型crp基因克隆到pKSC质粒上，得到重组载体pKSC-crp，通过碱基替换：得到优化的重组载体pKSC-crp1；最后用pKSC-crp1中的crp1基因替换野生型crp基因，得到番茄红素高产量的菌株。本发明通过对大肠杆菌菌株中的野生型crp基因的碱基替换A26T，影响其所调控的各种基因的转录水平，调节番茄红素合成直至整个菌体的代谢网络，进而提高番茄红素在大肠杆菌中的合成能力。此方法能有效提高大肠杆菌合成番茄红素的能力，对利用大肠杆菌工业化生产番茄红素具有重要的意义。
-
公开(公告)号：CN106084017A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610419991.6
申请日：2016-06-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/245 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种大肠杆菌水通道蛋白AQPZ中整合非天然氨基酸pPpa的方法，包括：定点突变詹氏甲烷球菌的酪氨酸‑tRNA合成酶获得MjpPpaRS基因，将MjpPpaRS基因克隆到pIVEX2.4c质粒上，得到重组质粒pIVEX2.4c‑MjpPpaRS；将重组质粒pIVEX2.4c‑MjpPpaRS和pUC‑MjtRNA转化至大肠杆菌BL21，选取阳性转化子，发酵后制成大肠杆菌无细胞抽提物，建立无细胞表达体系；以pIVEX2.4c‑AqpZ为模板，对AQPZ的F10、F13和F17三个位点进行琥珀突变；向无细胞表达体系中添加去污剂可溶表达编入pPpa的AQPZ蛋白，利用亲和层析纯化获得定点编入pPpa的AQPZ蛋白。本发明利用大肠杆菌无细胞体系生产编入pPpa的AQPZ蛋白并利用亲和层析纯化获得该目标蛋白，非天然氨基酸的嵌入使得该水通道蛋白与磷脂的亲和性增强，使得相同的条件下水通道蛋白的嵌入后更稳定。
-
公开(公告)号：CN105505974A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610039395.5
申请日：2016-01-21
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/72
CPC classification number: C12N15/72 , C12N2800/101
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌基因无痕同源重组的方法，该方法基于Lac阻遏系统和抗性筛选实现；通过构建包含lac操纵序列控制的抗性操纵子的大肠杆菌重组菌和包含正负筛选标记的无痕重组工具基因串，建立了一种大肠杆菌无痕同源重组的方法，可实现目的基因对大肠杆菌染色体上的靶位点进行无痕重组的目标，对大肠杆菌染色体进行基因编辑研究工作具有重要的意义。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105483190A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201510692030.8
申请日：2015-10-23
Applicant: 山东金城生物药业有限公司 , 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母基因工程改造提高S-腺苷-L-蛋氨酸产量的方法，先利用一步基因置换法将酿酒酵母菌株染色体上一条GLC3（糖原支链酶基因）等位基因替换成G418抗性基因，然后通过孢子分离方法得到只含有GLC3基因被替换的单倍体，从而得到GLC3基因突变了的纯合子。通过10L和500L发酵罐发酵验证，突变菌株生产腺苷蛋氨酸产量分别达到了7.93g/L和8.35g/L，比原始菌株提高了15.1%和24.7%。
-
公开(公告)号：CN105039379A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510546412.X
申请日：2015-08-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌无细胞体系生产HIV-1gp41重组抗原的方法，先将HIV-1gp41基因克隆到pIVEX2.4c质粒上，得到重组载体pIVEX2.4c-gp41；将重组载体pIVEX2.4c-gp41放到含有去污剂的大肠杆菌无细胞体系中表达，最后利用亲和层析纯化获得HIV-1gp41蛋白。本发明利用大肠杆菌无细胞体系生产HIV-1gp41蛋白，通过向反应体系中添加去污剂提高HIV-1gp41的可溶性，利用亲和层析纯化获得目标蛋白。此方法能有效提高HIV-1gp41重组抗原的生产能力，对利用大肠杆菌无细胞体系生产系列HIV重组抗原具有重要的意义。
-
公开(公告)号：CN102559783A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210049262.8
申请日：2012-02-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种多联纤维床生物反应器系统发酵生产丁酸的方法，其步骤包括：制备多联纤维床生物反应器、菌种活化、种子液培养、预发酵培养、及进行批次或补料发酵。本发明工艺简单，利用多联纤维床生物反应器系统发酵生产丁酸，一方面，可以较低的成本实现大规模工业放大，另一方面，可以避免单纯反应器体积放大所产生的多相传质问题和纤维床填充物强度不足问题，同时还减短了发酵过程的延滞期、大幅缩短了生产周期、提高了终产物浓度，有利于发酵液的后续分离，并便于发酵过程的检测和控制，以及设备的维护。
-
-
公开(公告)号：CN105859892A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610401198.3
申请日：2016-06-08
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: C07K14/315 , C07K14/503 , C07K2319/00 , C12N15/70 , C12N2800/101 , C12N2800/22 , C12P21/06
Abstract: 本发明提供一种类胶原蛋白?人碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白，该融合蛋白全长488个氨基酸，氮端为经修饰的化脓链球菌来源的类胶原蛋白Scl2?M，Scl2?M蛋白长度为327个氨基酸，碳端为人碱性成纤维细胞生长因子hbFGF，hbFGF蛋白长度为155个氨基酸。两个肽段之间含有肠激酶酶切位点。制备方法包括类胶原蛋白?人碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白表达载体的构建、融合蛋白的发酵、重组人碱性成纤维细胞生长因子和类胶原蛋白的纯化以及生物活性的测定。本发明能够同时高效生产人碱性成纤维细胞生长因子和类胶原蛋白，从而为人碱性成纤维细胞生长因子的规模化制备以及类胶原蛋白的应用奠定基础。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
32
records
(took 0.023 seconds)
