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公开(公告)号:CN119101764A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202411508141.4
申请日:2024-10-28
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本申请实施例涉及一种用于构建椰子SNP指纹图谱的SNP位点组合及应用,属于分子生物学技术领域。本申请实施例旨在解决以往的指纹通常是基于SSR标记或者其他实验手段进行分子标记筛选,存在可重复性较差的技术问题。本申请实施例的SNP位点包括位于染色体Chr01~Chr16上的260个SNP位点。本申请提供的SNP位点组合,可用于构建椰子SNP指纹图谱和椰子品种的快速鉴定,且本申请提供了专属于不同椰子品种的全新的身份信息,可有效辨别个体真实性,追溯个体来源,在椰子种质资源分类鉴定、分子辅助育种等方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN116376804B
公开(公告)日:2024-10-18
申请号:CN202310492209.3
申请日:2023-04-28
Applicant: 海南大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用,本发明包括以下步骤:取参薯组培苗嫩叶,并切成0.5‑1.0mm的条带;在切割过程中,将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上,并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h;所述酶溶液包括0.4‑1.2w/w%纤维素酶、0.5‑1.5w/w%离析酶、0.01~0.03w/w%果胶酶;用W5溶液洗涤,过滤,过滤时用W5溶液洗涤,过滤后,通过离心收集叶片释放的原生质体,并将其重新悬浮在W5溶液中。本发明可以获得更高的参薯原生质体产量,且原生质体活力达到92%以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体,为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。
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公开(公告)号:CN116376804A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310492209.3
申请日:2023-04-28
Applicant: 海南大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明提供一种参薯原生质体的制备方法与应用,本发明包括以下步骤:取参薯组培苗嫩叶,并切成0.5‑1.0mm的条带;在切割过程中,将叶片放置在用甘露醇浸泡的滤纸上,并将叶片放入酶溶液中酶解3‑9h;所述酶溶液包括0.4‑1.2w/w%纤维素酶、0.5‑1.5w/w%离析酶、0.01~0.03w/w%果胶酶;用W5溶液洗涤,过滤,过滤时用W5溶液洗涤,过滤后,通过离心收集叶片释放的原生质体,并将其重新悬浮在W5溶液中。本发明可以获得更高的参薯原生质体产量,且原生质体活力达到92%以上。本发明可以高效的获得大量高活力的参薯原生质体,为蛋白质亚细胞定位以及基因功能分析提供良好的实验材料。
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公开(公告)号:CN114410816A
公开(公告)日:2022-04-29
申请号:CN202210006997.6
申请日:2022-01-05
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供一种适用木薯抗病研究的稳定内参基因的筛选方法及应用,包括:1)选取木薯候选内参基因,进行内参引物设计;2)木薯组培苗进行外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理,及不同品种的不同组织部位取样,RNA提取,合成cDNA样本;3)对候选内参基因引物采用cDNA样本进行qRT‑PCR反应,采用geNorm法、NormFinder法和BestKeeper法和ΔCT法,对候选内参基因在外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理后和不同木薯组织部位的表达稳定性分析,筛选出特定条件下木薯内参基因Manes.05G133600表达最稳定,可用作实时荧光定量PCR的稳定内参,为木薯的抗病分子生物学研究奠定方法学基础。
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公开(公告)号:CN119193599B
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411668777.5
申请日:2024-11-21
Applicant: 海南大学三亚南繁研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种椰子强启动子、植物表达载体及应用,所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。与已知启动子相比,本发明所提供的启动子,可驱动相关基因的高效表达,为强启动子。本发明还涉及含有该强启动子的植物表达载体及其在启动目的基因表达的应用。
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公开(公告)号:CN116250482B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN202310517387.7
申请日:2023-05-10
Applicant: 海南大学三亚南繁研究院
Abstract: 本发明公开了一种椰子组织培养快繁的方法,属于植物组织培养技术领域。该方法包括外植体预培养、愈伤诱导培养、体胚诱导培养和组培苗的炼苗移栽步骤。本发明采用Y3、MW基本培养基的部分成分和铁盐组合成基础培养基,并补入生长调节剂及其他附加成分,优选出以Y3、MW部分成分及铁盐组合的培养基为基础的椰子胚芽预培养培养基、愈伤诱导培养基和体胚诱导培养基,并结合外植体表面消毒、愈伤组织诱导、体胚萌发,组培小苗大量增殖、大苗生根炼苗等过程建立了椰子组培快繁体系,可显著提高愈伤组织诱导率、出胚率、出苗率和成活率,并显著缩短培养周期,为椰子转基因及遗传转化体系建立了基础。
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公开(公告)号:CN116250482A
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202310517387.7
申请日:2023-05-10
Applicant: 海南大学三亚南繁研究院
Abstract: 本发明公开了一种椰子组织培养快繁的方法,属于植物组织培养技术领域。该方法包括外植体预培养、愈伤诱导培养、体胚诱导培养和组培苗的炼苗移栽步骤。本发明采用Y3、MW基本培养基的部分成分和铁盐组合成基础培养基,并补入生长调节剂及其他附加成分,优选出以Y3、MW部分成分及铁盐组合的培养基为基础的椰子胚芽预培养培养基、愈伤诱导培养基和体胚诱导培养基,并结合外植体表面消毒、愈伤组织诱导、体胚萌发,组培小苗大量增殖、大苗生根炼苗等过程建立了椰子组培快繁体系,可显著提高愈伤组织诱导率、出胚率、出苗率和成活率,并显著缩短培养周期,为椰子转基因及遗传转化体系建立了基础。
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公开(公告)号:CN119193599A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411668777.5
申请日:2024-11-21
Applicant: 海南大学三亚南繁研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/84 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种椰子强启动子、植物表达载体及应用,所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。与已知启动子相比,本发明所提供的启动子,可驱动相关基因的高效表达,为强启动子。本发明还涉及含有该强启动子的植物表达载体及其在启动目的基因表达的应用。
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