基于卡他莫拉菌表面蛋白的乳胶微球免疫层析试纸的制备方法

    公开(公告)号:CN110540594B

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201811564952.0

    申请日:2018-12-20

    Abstract: 本发明涉及一种快速检测卡他莫拉菌的乳胶免疫层析试纸条的制备方法,该试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC板组成,结合垫上喷涂有彩色乳胶微球偶联的抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体,硝酸纤维素膜上包被有抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体的检测线和羊抗兔IgG抗体的质控线。当加入的样品中含有卡他莫拉菌时,卡他莫拉菌首先与乳胶‑兔抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体形成复合物,在毛细作用下迁移至包被有卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体的检测线时被捕捉,检测线呈相应的彩色,因而可检测样品中是否含有卡他莫拉菌。该试纸条具有快速、简捷、灵敏度高,特异性好的优点。

    基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测法

    公开(公告)号:CN110724201A

    公开(公告)日:2020-01-24

    申请号:CN201911053066.6

    申请日:2019-10-31

    Inventor: 杨波 胡征 王毅

    Abstract: 本发明涉及一种基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测卡的制备方法,该检测卡由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC板组成,结合垫上喷涂有彩色乳胶微球偶联的抗鲍曼不动杆菌表面蛋白多重表位融合抗原多克隆抗体,硝酸纤维素膜包被有抗鲍曼不动杆菌表面蛋白多重表位融合抗原多克隆抗体的检测线和羊抗兔IgG抗体的质控线。当加入的样品中含有鲍曼不动杆菌时,鲍曼不动杆菌首先与乳胶-兔抗鲍曼不动杆菌表面蛋白多克隆抗体形成复合物,在毛细作用下迁移至包被有鲍曼不动杆菌表面蛋白多克隆抗体的检测线时被捕捉,检测线呈相应的彩色,因而可检测样品中是否含有鲍曼不动杆菌。该检测卡具有快速、简捷、灵敏度高,特异性好的优点。

    基于卡他莫拉菌表面蛋白的乳胶微球免疫层析试纸的制备方法

    公开(公告)号:CN110540594A

    公开(公告)日:2019-12-06

    申请号:CN201811564952.0

    申请日:2018-12-20

    Abstract: 本发明涉及一种快速检测卡他莫拉菌的乳胶免疫层析试纸条的制备方法,该试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC板组成,结合垫上喷涂有彩色乳胶微球偶联的抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体,硝酸纤维素膜上包被有抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体的检测线和羊抗兔IgG抗体的质控线。当加入的样品中含有卡他莫拉菌时,卡他莫拉菌首先与乳胶-兔抗卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体形成复合物,在毛细作用下迁移至包被有卡他莫拉菌表面蛋白多克隆抗体的检测线时被捕捉,检测线呈相应的彩色,因而可检测样品中是否含有卡他莫拉菌。该试纸条具有快速、简捷、灵敏度高,特异性好的优点。

    一种对羟基苯甲酰-COA硫酯酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN108048425A

    公开(公告)日:2018-05-18

    申请号:CN201711377198.5

    申请日:2017-12-19

    Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,尤其涉及一种对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶及其制备方法。包括以下步骤:1)利用PCR技术扩增得到对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶的克隆,2)构建对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶的表达载体;3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,进一步诱导表达、和纯化蛋白得到对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶。该方法简单,易操作,且发现了新的基因序列的对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶。另外,本发明还提供该对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶的多克隆抗体以及其检测方法,对低温菌Cryobacterium属菌种的鉴定提供新的依据,对于对羟基苯甲酰‑COA硫酯酶的研究提供了新的研究方向。

    双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶及其多克隆抗体

    公开(公告)号:CN107841490A

    公开(公告)日:2018-03-27

    申请号:CN201711241067.4

    申请日:2017-11-30

    Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,尤其涉及一种双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶及其多克隆抗体。双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶的多克隆抗体的制备方法,包括步骤:1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶为抗原,免疫小鼠制备抗血清;2)纯化抗血清得到双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶的多克隆抗体。本发明利用PCR技术在喜冷杆菌属Cryobacterium中扩增得到双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶基因,并通过基因工程技术得到Ecoli BL21-pET21a-BMTHC重组菌株,诱导表达重组菌株得到双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶蛋白,该蛋白具有较好的低温耐受,而且以双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶为抗原成功得到双功能亚甲基四氢叶酸脱氢酶/环化酶的多克隆抗体。

    一种定性检测人血清中鲍曼不动杆菌特异性抗体的检测条

    公开(公告)号:CN110713523A

    公开(公告)日:2020-01-21

    申请号:CN201911052203.4

    申请日:2019-10-31

    Inventor: 杨波 胡征 王毅

    Abstract: 本发明涉及一种一种定性检测人血清中鲍曼不动杆菌特异性抗体的检测条。该检测条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫、PVC板组成。结合垫上喷涂有彩色乳胶微球偶联的鼠抗人IgG单克隆抗体,硝酸纤维素膜上包被有鲍曼不动杆菌融合抗原的检测线和羊抗鼠IgG多克隆抗体的质控线。当加入的样品中含有鲍曼不动杆菌抗体时,鲍曼不动杆菌抗体首先与乳胶-鼠抗人IgG单克隆抗体形成复合物,在毛细作用下迁移至包被有鲍曼不动杆菌融合抗原的检测线时被捕捉,检测线呈相应的彩色,因而可检测样品中是否含有鲍曼不动杆菌抗体。该检测条具有快速、简捷、灵敏度高,特异性好,假阳性低的优点,能在十分钟之内得到明确的结果,有效用于鲍曼不动杆菌感染的辅助诊断。

    天冬氨酸转氨酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN107739733B

    公开(公告)日:2019-12-27

    申请号:CN201710916374.1

    申请日:2017-09-30

    Abstract: 本发明涉及分子生物学领域,尤其涉及一种天冬氨酸转氨酶及其制备方法。天冬氨酸转氨酶的制备方法,包括以下步骤:1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列;2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中,构建天冬氨酸转氨酶的表达载体;3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体,依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到天冬氨酸转氨酶蛋白。利用Ecoli BL21‑pET21a‑AT重组菌株诱导表达细菌谷氨酰胺合成酶蛋白的方法简单,易操作,而且经过试验证明本发明的天冬氨酸转氨酶为低温酶,具有较好低温的耐受力,能为工业生产节约能耗。

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