木材样本中松材线虫DNA提取方法
    1.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119120651A

    公开(公告)日:2024-12-13

    申请号:CN202410138734.X

    申请日:2024-01-31

    Abstract: 本发明公开了木材样本中松材线虫DNA提取方法,松材线虫病是由松材线虫引起的松树病害,具有高度的破坏性,严重危害着森林资源。因此,松材线虫病的检测和防控具有极其重要的意义。但现有的松材线虫病检测方法仍存在着各种局限性,特别是从木材样本中提取松材线虫DNA的过程操作复杂、时间长、成本高。本方案通过对提取条件筛选,确定了使用超声细胞破碎机对木材样本进行松材线虫细胞破碎;通过对树木横截面不同位置的取样,确定了松材线虫主要在木材内圈分布;通过取样方法筛选,确定了使用生长锥对树木取样。最终建立了快速提取木材样本中松材线虫DNA的方法,该方法可以让松材线虫病诊断更加快速、简单、经济,并为松材线虫病的防治奠定了基础。

    一种松墨天牛幼虫肠道中纤维素降解细菌的分离鉴定方法

    公开(公告)号:CN108865888B

    公开(公告)日:2021-04-09

    申请号:CN201810315353.9

    申请日:2018-04-10

    Abstract: 本发明提供了一种松墨天牛幼虫肠道中纤维素降解细菌的分离鉴定方法,属于微生物技术领域。将松墨天牛幼虫的后肠道进行研磨,得到原始菌液,将原始菌液经过梯度稀释,分别涂布在以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的4号培养基上有氧培养,得到的单菌落进行形态观察和分子鉴定。本发明提供的方法从松墨天牛幼虫中后肠肠道中分离出154株具纤维素酶活性的细菌,分别隶属于变形菌门、厚壁菌门和拟杆菌门细菌的8个菌属、10个菌种。所述分离鉴定方法为揭示肠道细菌与松墨天牛的互作关系提供理论基础。

    一种解决杀虫毒素被昆虫肠道消化酶过度酶解的毒素改造方法

    公开(公告)号:CN111574599A

    公开(公告)日:2020-08-25

    申请号:CN202010419515.0

    申请日:2020-05-18

    Abstract: 本发明提供了一种解决杀虫毒素被昆虫肠道消化酶过度酶解的毒素改造方法。其是利用PeptideCutter或荧光多肽酶活测定或多重底物质谱分析法(MSP-MS)对昆虫肠道消化酶的特异性切割位点进行测定;然后利用Swiss Model和PyMOL软件相结合筛选出位于毒素非功能区域的改造位点;最后将筛选到的多个位点同时突变为不被肠道蛋白酶识别的氨基酸。本发明改造方法能够对毒素上的多个蛋白酶切割位点同时进行准确的突变,显著的提高对靶标昆虫的杀虫活性,具有特异性强,操作简单等优点。这为农、林业害虫的生物防治以及抗性的治理提供了一条有利的途径。

    一种人工养殖松墨天牛的方法

    公开(公告)号:CN107410213A

    公开(公告)日:2017-12-01

    申请号:CN201710324580.3

    申请日:2017-05-10

    Abstract: 本发明公开了一种人工养殖松墨天牛的方法,用于实验室条件下饲养繁殖松墨天牛。所述方法包括:(1)松墨天牛亚成熟个体的人工饲养;(2)松墨天牛人工产房的配备;(3)松墨天牛性成熟个体的人工配对饲养及诱导繁殖;(4)松墨天牛各龄期幼虫人工饲料的制备;(5)松墨天牛初生幼虫的分离获取;(6)松墨天牛幼虫转入人工饲料的后续培养;(7)松墨天牛蛹期及羽化管理。本发明采用的人工养殖松墨天牛的方法,在实验室条件下构建出一套适用于人工培养各生长阶段的松墨天牛的体系,在减少松材消耗的同时,显著提高松墨天牛各生长阶段的成活率,排除季节对松墨天牛生长繁殖的影响,缩短松墨天牛的生长周期,形成稳定的实验虫源。

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