通过Cas9-crRNA复合物的RNA指导的DNA裂解

    公开(公告)号:CN114410625A

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202111462778.0

    申请日:2013-03-20

    Abstract: 嗜热链球菌CRISPR3/Cas系统的Cas9‑crRNA复合物的分离或体外组装及其用于DNA裂解的用途,所述DNA具有与crRNA互补的核苷酸序列和原型间隔子毗邻基序。使用RNA导向的DNA核酸内切酶在体外或体内对靶标DNA分子进行位点特异性修饰的方法,所述DNA核酸内切酶包含RNA序列及RuvC活性位点基序和HNH活性位点基序中至少一种;通过至少一个点突变使多肽中活性位点(RuvC或HNH)之一失活将Cas9多肽转化为双链DNA的切口酶裂解一条链的方法;在体内或体外组装活性多肽‑多核糖核苷酸复合物的方法;以及在体外对Cas9‑crRNA复合物的特异性进行重新编程的方法,该方法中使用了含有单一的重复序列‑间隔子‑重复序列单元的序列盒子。

    通过Cas9-crRNA复合物的RNA指导的DNA裂解

    公开(公告)号:CN104520429B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN201380023255.3

    申请日:2013-03-20

    Abstract: 嗜热链球菌CRISPR3/Cas系统的Cas9‑crRNA复合物的分离或体外组装及其用于DNA裂解的用途,所述DNA具有与crRNA互补的核苷酸序列和原型间隔子毗邻基序。使用RNA导向的DNA核酸内切酶在体外或体内对靶标DNA分子进行位点特异性修饰的方法,所述DNA核酸内切酶包含RNA序列及RuvC活性位点基序和HNH活性位点基序中至少一种;通过至少一个点突变使多肽中活性位点(RuvC或HNH)之一失活将Cas9多肽转化为双链DNA的切口酶裂解一条链的方法;在体内或体外组装活性多肽‑多核糖核苷酸复合物的方法;以及在体外对Cas9‑crRNA复合物的特异性进行重新编程的方法,该方法中使用了含有单一的重复序列‑间隔子‑重复序列单元的序列盒子。

    通过Cas9-crRNA复合物的RNA指导的DNA裂解

    公开(公告)号:CN114410625B

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202111462778.0

    申请日:2013-03-20

    Abstract: 嗜热链球菌CRISPR3/Cas系统的Cas9‑crRNA复合物的分离或体外组装及其用于DNA裂解的用途,所述DNA具有与crRNA互补的核苷酸序列和原型间隔子毗邻基序。使用RNA导向的DNA核酸内切酶在体外或体内对靶标DNA分子进行位点特异性修饰的方法,所述DNA核酸内切酶包含RNA序列及RuvC活性位点基序和HNH活性位点基序中至少一种;通过至少一个点突变使多肽中活性位点(RuvC或HNH)之一失活将Cas9多肽转化为双链DNA的切口酶裂解一条链的方法;在体内或体外组装活性多肽‑多核糖核苷酸复合物的方法;以及在体外对Cas9‑crRNA复合物的特异性进行重新编程的方法,该方法中使用了含有单一的重复序列‑间隔子‑重复序列单元的序列盒子。

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