公开(公告)号：CN104404071A

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201410708026.1

申请日：2014-11-28

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 徐林 ,  陶弋婧 ,  周涯 ,  郭萌萌 ,  赵娟娟

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种新型下调miRNA-21表达的方法，在miRBase数据库中检索出>miR-21-5p的序列：5’-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3’；其反义互补序列为：5’-TCAACATCAGTCTGATAAGCTA-3’，再与载体粘性末端互补连接，得到合成的正反义链；将合成的正反义链混合，95℃加热5分钟退火形成双链，将退火的双链DNA室温连接30分钟得到连接产物；取2-10μl连接产物转化100μl感受态细胞DH5α，涂LB平板，含50μg/ml壮观霉素，37℃孵育16小时，取6个阳性克隆，接种到含50μg/ml壮观霉素的LB培养基中，按天根质粒小提试剂盒方法抽提质粒。本发明的有益效果是可以长效、便捷下调miR-21的表达。

公开(公告)号：CN104031980A

公开(公告)日：2014-09-10

申请号：CN201310543832.3

申请日：2013-11-06

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 徐林 ,  胡燕 ,  周涯 ,  李永菊 ,  廖珍媛

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12N15/79

Abstract: 本发明公开了一种下调微小RNA-126表达的方法，它明利用分子生物学技术，在含CMV启动子的真核载体基础上，构建含miR-126-sponge的真核表达载体，实现下调miR-126的表达；并通过将该载体体外转染真核细胞后，利用荧光定量PCR仪检测miR-126成熟体的表达，同时通过体外实验观察下调miR-126表达后的生物学效应。这样的方法不仅可以方便、快速、长效地下调miR-126的表达，同时还可快捷地观察miR-126下调表达后的生物学效应。不仅适于细胞的转染，也可用于整体水平转基因动物的制作。

公开(公告)号：CN103789347A

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201410047018.7

申请日：2014-02-11

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 徐林 ,  李永菊 ,  周涯 ,  陶弋婧

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种下调微小RNA-7表达的载体及其应用，所述的载体为含miR-7-sponge（海绵）核苷酸序列的真核表达载体。本发明的载体不仅可以方便、快速、长效地下调miR-7的表达，同时还可快捷地观察miR-7下调表达后的生物学效应。

公开(公告)号：CN103484544A

公开(公告)日：2014-01-01

申请号：CN201310421926.3

申请日：2013-09-17

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 徐林 ,  周涯 ,  廖珍媛 ,  李永菊 ,  罗军敏

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12Q1/686 ,  C12Q2525/143 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明公开了一种微小RNA启动子活性检测的方法，该微小RNA启动子活性检测的方法包括以下步骤：利用分子生物学技术，在无启动子、增强子的真核载体基础上，构建含miRNAs启动子、miRNA和3’段侧翼序列在内的重组真核载体；将重组真核载体体外转染真核细胞，利用荧光定量PCR仪检测miRNAs成熟体的表达；通过体外实验观察启动子表达miRNAs后的生物学效应。本发明提供的微小RNA启动子活性检测的方法可以在不依赖昂贵仪器的条件下，广泛用于分子生物学和细胞生物学实验中检测miRNAs启动子活性，方便地观察miRNAs表达后的生物学效应，检测方便并准确反映启动子活性。

公开(公告)号：CN103484544B

公开(公告)日：2015-11-25

申请号：CN201310421926.3

申请日：2013-09-17

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 徐林 ,  周涯 ,  廖珍媛 ,  李永菊 ,  罗军敏

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种微小RNA启动子活性检测的方法，该微小RNA启动子活性检测的方法包括以下步骤：利用分子生物学技术，在无启动子、增强子的真核载体基础上，构建含miRNAs启动子、miRNA和3’段侧翼序列在内的重组真核载体；将重组真核载体体外转染真核细胞，利用荧光定量PCR仪检测miRNAs成熟体的表达；通过体外实验观察启动子表达miRNAs后的生物学效应。本发明提供的微小RNA启动子活性检测的方法可以在不依赖昂贵仪器的条件下，广泛用于分子生物学和细胞生物学实验中检测miRNAs启动子活性，方便地观察miRNAs表达后的生物学效应，检测方便并准确反映启动子活性。

公开(公告)号：CN208663545U

公开(公告)日：2019-03-29

申请号：CN201821482082.8

申请日：2018-09-11

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 周涯 ,  徐林

IPC: B25B9/02

Abstract: 本实用新型公开了一种圆勺形端的镊子，包含镊柄、两只镊臂和镊嘴，所述两只镊臂的一端通过镊柄固定连接，另一端设有所述的镊嘴，所述镊嘴与镊臂之间设有圆弧形状的夹持部，在所述的夹持部内侧设置有垫片；在所述的一只镊臂上，镊嘴与夹持部之间设置有卡槽，所述卡槽呈凹槽型，其宽度能使另一只镊臂卡入其中，夹持东西时，使另一只镊臂在其中不左右摆动，所述镊臂由第一镊臂、第二镊臂和第三镊臂组成，所述第一镊臂、第二镊臂以及第三镊臂相互之间设有一个夹角固定连接，这种圆勺形端的镊子具备一般镊子的功能还可以很好地解决镊子被磁化和夹小铁球易滑落的问题，提高实验的可操作性与精确度。